Summary

Isolatie van Vroege hematopoietische stamcellen van muizen dooierzak en AGM

Published: June 27, 2008
doi:

Summary

Deze video laat zien hoe de dooierzak en de aorta-gonaden-mesonephros regio micro-ontleden van embryo's en het gebruik flowcytometrie om hematopoietische stamcellen te sorteren.

Abstract

In de muis embryo, vroeg hematopoiese komt gelijktijdig in meerdere organen, die de dooierzak en de aorta-gonaden-mesonephros regio omvat. Deze regio's zijn cruciaal bij het vaststellen van het bloed in de embryo's en leidt tot de uiteindelijke verplaatsing van stamcellen in de foetale lever en vervolgens de ontwikkeling van volwassen stamcellen in het beenmerg. Begin van de hematopoietische stamcellen kunnen geïsoleerd worden uit deze organen door microdissectie van het embryo, gevolgd door flowcytometrische sorteren om een ​​meer zuivere populatie te verkrijgen. Het blijft onduidelijk hoe deze stamcelpopulaties bijdragen aan de foetale en volwassen stamcellen zwembad. Ook ons ​​lab onderzoekt hoe vroeg stamcellen functioneel afwijken van de foetale en volwassen hematopoietische stamcellen. Bovendien, onze lab allerlei verschillende populaties van hematopoietische stamcellen en testen hun functionele rol in het kader van een variëteit van genetische modellen. In deze video, tonen we de micro-dissectie procedure die wij vaak gebruiken en toont ook de resultaten van een typisch FACS plotfter isoleren van deze zeldzame populaties, is het mogelijk om een ​​scala aan functionele testen, waaronder: kolonie assays en beenmergtransplantaties.

Protocol

Dissectie en isolatie van vroege hematopoietische stamcellen van muizen dooierzak en aorta-gonaden-mesonephros regio Voordat u begint, is het belangrijk om alle reagentia en instrumenten die nodig zijn voor de procedure: Schaar Tang, maat 4, en chirurgische kwaliteit gebogen tip pincet, maat 5 / 45 (optioneel) 30 gauge naalden met spuit 35mm en 100mm Petrischalen PBS met 10% en 20% foetaal runderserum en ten slotte, Collagenase <l…
check_url/pt/789?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Morgan, K., Kharas, M., Dzierzak, E., Gilliland, D. G. Isolation of Early Hematopoietic Stem Cells from Murine Yolk Sac and AGM. J. Vis. Exp. (16), e789, doi:10.3791/789 (2008).

View Video