Murine 난황과 AGM에서 조기 조혈 줄기 세포의 분리

Summary

이 비디오는 태아의 난황과 대동맥 – 생식선 – mesonephros 영역을 미세 절개하다 및 조혈 줄기 세포를 정렬 유동세포계측법를 사용하는 방법을 보여줍니다.

Abstract

마우스 배아에서 초기 조혈은 난황과 대동맥 – 생식선 – mesonephros 영역을 포함 여러 장기에 동시에 발생합니다. 이 지역은 태아의 혈액 시스템을 구축에 중요하고 태아 간 다음 bonemarrow의 성인 줄기 세포의 개발에 줄기 세포의 최종 움직임에 이르게한다. 초기 조혈 줄기 세포는 이러한 기관에서보다 순수한 인구를 얻는 흐름 cytometric 정렬 뒤에 배의 microdissection을 통해 격리 수 있습니다. 그것은 이러한 줄기 세포 인구가 태아와 성인 줄기 세포 수영장에 기여하는 방법을 명확 남아있다. 또한, 우리 연구소는 초기 줄기 세포가 기능 태아 및 성인 조혈 줄기 세포 차이가 어떻게 조사. 또한, 우리 실험실 종류의 조혈 줄기 세포의 다른 인구 및 유전자 모델의 다양한 맥락에서 자신의 기능 역할을 테스트합니다. 콜로니 assays 및 골수 이식 :이 비디오는, 우리가 일반적으로 사용하고 이러한 희귀한 인구를 분리 전형적인 외과의 plotfter의 결과를 보여 마이크로 절개 절차를 보여줍니다, 그것은 포함한 기능 assays 다양한 수행할 수 있습니다.

Protocol

murine 난황과 대동맥 – 생식선 – mesonephros 지역에서 초기 조혈 줄기 세포의 해부 및 절연 시작하기 전에 프로 시저에 필요한 모든 시약과 도구를 가지고하는 것이 중요합니다 : 가위 집게, 크기 4 및 수술 성적 벤트 – 스쳐 포셉, 크기 45분의 5 (옵션) 주사기 30 게이지 바늘 35mm와 100mm 페트리 접시 PBS 10 % 20% 태아 소 혈청과 그리고 마지막으로, Coll…