腫瘍間質流体圧の空間測定:間質流体圧を測定する方法

間質流体圧力またはIFPは、組織内の細胞間の空間内の流体によって加えられる力である。まず、酸素と混合した2%のイソフルオランで腫瘍を持つマウスを麻酔し、コンピュータ断層撮影またはCT-IFPロボットプラットフォーム上で固定化する。さて、マウスの側尾静脈に造影剤を封入したリポソームを用いて注射し、腫瘍を可視化する。ケージに動物を戻し、それを回復させてください。

48〜72時間の注射後、CT-IFPプラットフォーム上で麻酔マウスを固定し、IFPを測定するために腫瘍上のいくつかの均等に間隔をあけた位置を選択する。次に、挿入前にヘパリン生理液でIFPシステムの針を洗い流します。選択した位置に針を持ってきて、腫瘍組織の中に挿入する。

今、すべての位置で画像を取得し、ソフトウェアを使用してIFPを測定します。腫瘍のIFPは、通常、その緻密な性質、異常な血管、および欠陥リンパ系のために高い。これは、腫瘍周辺におけるリポソームの蓄積につながる可能性があります。以下のプロトコルでは、固形腫瘍におけるIFPを測定する手法を示す。

IFPを測定するために、動物をCT-IFPロボットプラットフォームにテープで貼り付け、腫瘍が固定化され、CT-IFPロボットシステムにアクセス可能になるようにする。ちょうど実証したように解剖マイクロCTスキャンを取得し、その後、CT-IFPロボットアライメントソフトウェアにプリニードル挿入データをロードし、腫瘍を視覚化するためにウィンドウとレベルを調整します。任意の画像で腫瘍のリムをクリックし、続いて腫瘍の隣接する側の第2のリム位置を選択する。

ソフトウェアは、2 つの点間の直線に沿って一連の位置を計算します。次に、一覧から 5 ~ 8 の等間隔の位置の x、y、および Z 座標を選択します。次に、IFPシステムの針を生理液ヘパリン溶液で洗い流し、最初の所定の針位置をCT-IFPロボット制御ソフトウェアのXYZ座標ウィンドウに入力します。

移動ボタンを押して、ロボットを目的の場所に移動します。次に、各針の位置について、[針の挿入] ボタンをクリックして、針を組織に挿入します。PE-20チューブをピンチして解放し、IFP針と組織間の良好な流体通信を確認し、IFP測定が増加し、IFP取得ソフトウェア上のピンチ前の値に戻ることを観察します。最後に、針を挿入して解剖学的CTスキャンを取得し、スキャンの最後にあるリトラクトニードルボタンをクリックして組織から針を取り除きます。