É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:04Título
- 00:46Production of AAV in HEK 293 Cells by Plasmid DNA Transfection
- 02:50Recovery of Viral Particles, and Treatment with Serratia marcescens Endonuclease and Proteinase K
- 04:20Phenol-choloroform Extraction, Ethanol Precipitation, and Preparation of Plasmid DNA Standards
- 05:55Dot Blot Assay
- 08:46Hybridization and Washing
- 10:50Results: AAV Titration and Functional Assessment of AAP Proteins Using a Quantitative Dot Blot Assay
- 12:58Conclusion
Dit manuscript details een eenvoudig punt vlek assay voor kwantificatie van adeno-associated virus (AAV) titers en de toepassing ervan op het bestuderen van de rol van de vergadering-activeren eiwitten (AAPs), een nieuwe klasse van niet-structurele virale eiwitten gevonden in alle AAV serotypen, bij het bevorderen van de vergadering van capsids afgeleid van cognaat en heterologe AAV serotypen.
