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Multi-color Localization Microscopy of Single Membrane Proteins in Organelles of Live Mammalian Cells
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Microscopie multicolore localisation des protéines de la Membrane unique dans les organites des cellules mammifères vivants

DOI:
10.3791/57690-v

•

11:06 min

•

June 30, 2018

•

, , , ,
1School of Biology,University of Osnabrück, 2Center of Cellular Nanoanalytics, Integrated Bioimaging Facility,University of Osnabrück, 3Department of Biology,WWU Münster

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:54Physical Alignment of Image Splitter Generated Images
  • 02:25Alignment of Spectrally Separated Channels by Software Performing Spatial Transformation
  • 04:34Single Molecule Imaging of Mitochondrial Membrane Proteins
  • 08:32Results: Multi-color Localization of Mammalian Mitochondrial PINK1
  • 10:15Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Nous présentons ici un protocole pour la localisation multi-couleur des protéines membranaires unique dans les organites des cellules vivantes. Pour fixer les fluorophores, étiquetage des protéines sont utilisées. Protéines, situés dans des compartiments de différentes membranes de l’organite même, peuvent être localisées avec une précision d’environ 18 nm.

Tags

Keywords: Multi-color Localization MicroscopySingle Membrane ProteinsOrganellesLive Mammalian CellsProtein DynamicsSpatiotemporal OrganizationMitochondrial Membrane ProteinsTransfectionSample PreparationMicroscope SetupFluorescent BeadsObjective LensImmersion OilTransmission LightLaserFluorescence ChannelsImage SplitterTIRF MicroscopyTransformation MatrixDual-color ImagesCalibrationUnit ConversionLocalization ManagerPoint Spread Function (PSF)

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