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Multi-color Localization Microscopy of Single Membrane Proteins in Organelles of Live Mammalian Cells

Localização de cor multi microscopia de proteínas de membrana única em organelas de células de mamíferos vivas

DOI:
10.3791/57690-v

•

11:06 min

•

June 30, 2018

•

, , , ,
1School of Biology,University of Osnabrück, 2Center of Cellular Nanoanalytics, Integrated Bioimaging Facility,University of Osnabrück, 3Department of Biology,WWU Münster

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:54Physical Alignment of Image Splitter Generated Images
  • 02:25Alignment of Spectrally Separated Channels by Software Performing Spatial Transformation
  • 04:34Single Molecule Imaging of Mitochondrial Membrane Proteins
  • 08:32Results: Multi-color Localization of Mammalian Mitochondrial PINK1
  • 10:15Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aqui, apresentamos um protocolo para multi cor localização das proteínas de membrana única em organelas de células vivas. Para anexar fluorophores, auto rotulação de proteínas são utilizadas. Proteínas, localizadas em compartimentos diferentes membranas da organela a mesma, podem ser localizadas com precisão de ~ 18 nm.

Tags

Keywords: Multi-color Localization MicroscopySingle Membrane ProteinsOrganellesLive Mammalian CellsProtein DynamicsSpatiotemporal OrganizationMitochondrial Membrane ProteinsTransfectionSample PreparationMicroscope SetupFluorescent BeadsObjective LensImmersion OilTransmission LightLaserFluorescence ChannelsImage SplitterTIRF MicroscopyTransformation MatrixDual-color ImagesCalibrationUnit ConversionLocalization ManagerPoint Spread Function (PSF)

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