É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:04Título
- 01:34Preparation of Streptavidin Coated Magnetic Beads — I
- 03:52Preparation of Cell Lysate
- 05:36Preparation of Streptavidin Magnetic Beads — II
- 06:34Pull-down of Target mRNA-miRNA Complexes
- 07:35Total RNA Extracted, cDNA Synthesis, and qPCR
- 08:57Results: Use of MicroRNAs to Capture the Target mRNA
- 09:55Conclusion
דו ח זה מתאר שיטה מהירה ואמינה עבור אימות מטרות mRNA miRNAs הסלולר. משתמשת בשיטה biotinylated סינתטי מבוססת מגבר קדם חומצת גרעין נעול miRNA מחקה ללכידת המטרה mRNA. לאחר מכן, מצופים streptavidin beads מגנטי מועסקים הנפתח המטרה mRNA על כימות על ידי תגובת שרשרת של פולימראז qPCR.
