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Lentiviral Mediated Gene Silencing in Human Pseudoislet Prepared in Low Attachment Plates
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Lentiviral mediato gene silenziamento in pseudoislet umano preparato in piastre a basso attaccamento

DOI:
10.3791/59578-v

•

11:24 min

•

May 14, 2019

•

, , , , ,
1Department of Internal Medicine, Carver College of Medicine,University of Iowa, 2Fraternal Order of Eagles Diabetes Research Center,University of Iowa, 3Roy J. Carver Department of Biomedical Engineering,University of Iowa

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:42Overnight Culture of Human Islets for Recovery After Shipment
  • 01:32Preparation of Single Cell Suspension from Human Islets
  • 04:03Pseudoislet Formation and Transduction by Lentivirus
  • 08:44Results: Morphological and Functional Studies Using Gene Modified Human Pseudoislets
  • 09:53Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Viene presentato un protocollo per creare pseudoislets umani modificati in gene da cellule di isole umane disperse che vengono tradusse da lentivirus che trasportano RNA a forcina corta (shRNA). Questo protocollo utilizza vasi enzimatici e di coltura prontamente disponibili, può essere eseguito facilmente e produce pseudoislets umani geneticamente modificati adatti per studi funzionali e morfologici.

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Keywords: LentiviralGene SilencingHuman PseudoisletLow Attachment PlatesIslet FunctionGene Expression ModulationSHR8 TransductionProteolytic EnzymeCollagenolytic EnzymeCell DissociationCMRL MediumFetal Bovine Serum

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