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Síntesis de proteínas libres de células a partir de extractos celulares deficientes en exonucleasa utilizando plantillas de ADN lineal
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1INRAe, AgroParisTech, Micalis Institute,Université Paris-Saclay, 2Helmholtz Institute for RNA-based Infection Research (HIRI),Helmholtz-Centre for Infection Research (HZI), 3Medical Faculty,University of Würzburg, 4Centre de Biochimie Structurale, INSERM U1054, CNRS UMR 5048,University of Montpellier
Capítulos
- 00:05Introduction
- 00:50Cell Culture and Lysate Preparation
- 04:17Cell-Free Buffer Calibration for Linear DNA
- 05:49Experimental Execution
- 06:33Results: Expression in Cell-Free Protein Synthesis Systems Using Linear DNA Templates
- 07:26Conclusion
Aquí se presenta un protocolo para la preparación y calibración tampón de extractos celulares de cepas knockout de exonucleasa V de Escherichia coli BL21 Rosetta2 (ΔrecBCD y ΔrecB). Este es un enfoque rápido, fácil y directo para la expresión en sistemas de síntesis de proteínas libres de células utilizando plantillas de ADN lineal.
