/
/
Lineer DNA Şablonlarını Kullanarak Ekzonükleaz Eksikliği Olan Hücresel Ekstraktlardan Hücresiz Protein Sentezi
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
1INRAe, AgroParisTech, Micalis Institute,Université Paris-Saclay, 2Helmholtz Institute for RNA-based Infection Research (HIRI),Helmholtz-Centre for Infection Research (HZI), 3Medical Faculty,University of Würzburg, 4Centre de Biochimie Structurale, INSERM U1054, CNRS UMR 5048,University of Montpellier
Capítulos
- 00:05Introduction
- 00:50Cell Culture and Lysate Preparation
- 04:17Cell-Free Buffer Calibration for Linear DNA
- 05:49Experimental Execution
- 06:33Results: Expression in Cell-Free Protein Synthesis Systems Using Linear DNA Templates
- 07:26Conclusion
Burada sunulan, Escherichia coli BL21 Rosetta2'nin (ΔrecBCD ve ΔrecB) ekzonükleaz V nakavt suşlarından hücre ekstraktlarının hazırlanması ve tampon kalibrasyonu için bir protokoldür. Bu, lineer DNA şablonlarını kullanarak hücresiz protein sentez sistemlerinde ekspresyon için hızlı, kolay ve doğrudan bir yaklaşımdır.
