/
/
Cellefri proteinsyntese fra eksonuklease-mangelfulle cellulære ekstrakter ved bruk av lineære DNA-maler
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
1INRAe, AgroParisTech, Micalis Institute,Université Paris-Saclay, 2Helmholtz Institute for RNA-based Infection Research (HIRI),Helmholtz-Centre for Infection Research (HZI), 3Medical Faculty,University of Würzburg, 4Centre de Biochimie Structurale, INSERM U1054, CNRS UMR 5048,University of Montpellier
Capítulos
- 00:05Introduction
- 00:50Cell Culture and Lysate Preparation
- 04:17Cell-Free Buffer Calibration for Linear DNA
- 05:49Experimental Execution
- 06:33Results: Expression in Cell-Free Protein Synthesis Systems Using Linear DNA Templates
- 07:26Conclusion
Presentert her er en protokoll for fremstilling og bufferkalibrering av celleekstrakter fra eksonuklease V knockout-stammer av Escherichia coli BL21 Rosetta2 (ΔrecBCD og ΔrecB). Dette er en rask, enkel og direkte tilnærming for ekspresjon i cellefrie proteinsyntesesystemer ved hjelp av lineære DNA-maler.
