Summary

Het ontleden van de niet-humane primaten Brain in stereotaxische Space

Published: July 16, 2009
doi:

Summary

De niet-menselijke primaat is een belangrijk translationeel soort voor ons begrip van de normale verwerking van de hersenen. De anatomische organisatie van het primaat hersenen kan belangrijke inzichten in normale en pathologische omstandigheden bij de mens.

Abstract

Het gebruik van niet-menselijke primaten biedt een uitstekende translationeel model voor ons begrip van ontwikkelings-en verouderingsprocessen in de mens<sup> 1-6</sup>. Daarnaast is het gebruik van niet-menselijke primaten onlangs de gelegenheid om op natuurlijke wijze model complexe psychiatrische stoornissen, zoals alcoholmisbruik<sup> 7</sup>. Hier beschrijven we een techniek voor het blokkeren van de hersenen in het frontale vlak van de vervet aap (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>) In het intacte schedel in stereotaxische ruimte. De hier beschreven methode levert een standaard vlak van sectie tussen de blokken en de onderwerpen en minimaliseert de gedeeltelijke gedeelten tussen de blokken. Snijden een blok van weefsel in het frontale vlak ook vergemakkelijkt de afbakening van een gebied van belang. Deze methode biedt beheersbaar formaat blokken, omdat een enkele halfrond van de vervet aap levert meer dan 1200 delen als het snijden in 50μm. Verder door het blokkeren van de hersenen in 1 cm blokjes, vergemakkelijkt de penetratie van sucrose voor cyroprotection en laat het blok te worden gesneden op een standaard cryostaat.

Protocol

Deel 1: Pre-verwerking van weefsel Weefsel moet goed worden geperfuseerd met paraformaldehyde, glutaaraldehyde, of formaline. Dit kan worden bereikt door middel van standaard transcardial perfusie meestal gebruikt om andere organen te oogsten. In de huidige studie het onderwerp was diep gesedeerd met ketamine hydrochloride (10 mg / kg, im), gedood met een overdosis natrium pentobarbital (25 mg / kg, iv) en perfusie transcardially met 0,1 M PBS tot het volledig exsanguinated.This wordt gevolgd met een 4% paraf…

Discussion

De St. Kitts vervet (Chlorocebus aethiops sabeus) is een Oude Wereld primaten met vergelijkbare patronen en de tarieven van de corticale en subcorticale ontwikkeling van de hersenen met die van mensen. Deze soort is gebruikt om complexe menselijke gedragsstoornissen model zoals angstig gedrag, hypertensie 8, 9 hemispherectomy, de ziekte van Parkinson 10, Alzhemier de ziekte van 11, en ​​alcoholmisbruik 12. Meer recent is deze soort is gebruikt om de effecten van d…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

De auteurs willen graag Ikiel Ptito bedanken voor zijn voortdurende technische ondersteuning. NSERC te verlenen aan MP.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Scalpel   Fine Science Tools 10003-12  
Scalpel blades   Fine Science Tools 10011-00  
Scissors   Fine Science Tools 14090-11 Any surgical scissors are sufficient
Rongeurs   Fine Science Tools 16121-14  
Forceps   Fine Science Tools 11027-12  
Filter paper   Fisher 09-924-150  
Stereotaxic Frame   Kopf Instruments    
Tissue slicing blade   Thomas    

References

  1. Gallagher, M., Rapp, P. R. The use of animal models to study the effects of aging on cognition. Annu Rev Psychol 48. , 339-370 (1997).
  2. Clancy, B., Darlington, R., Finlay, B. Translating developmental time across mammalian species. Neuroscience. 105, 7-17 (2001).
  3. Nowakowski, R. S., Rakic, P. The site of origin and route and rate of migration of neurons to the hippocampal region of the rhesus monkey. J Comp Neurol. 196, 129-154 (1981).
  4. Rakic, P., Bourgeois, J. P., Eckenhoff, M. F., Zecevic, N., Goldman-Rakic, P. S. Concurrent overproduction of synapses in diverse regions of the primate cerebral cortex. Science. 232, 232-235 (1986).
  5. Granger, B., Tekaia, F., Le Sourd, A. M., Rakic, P., Bourgeois, J. P. Tempo of neurogenesis and synaptogenesis in the primate cingulate mesocortex: comparison with the neocortex. J Comp Neurol. 360, 363-376 (1995).
  6. Zecevic, N., Rakic, P. Development of layer I neurons in the primate cerebral cortex. J Neurosci. 21, 5607-5619 (2001).
  7. Ervin, F. R., Palmour, R. M., Young, S. N., Guzman-Flores, C., Juarez, J. Voluntary consumption of beverage alcohol by vervet monkeys: population screening, descriptive behavior and biochemical measures. Pharmacol Biochem Behav. 36, 367-373 (1990).
  8. Palmour, R. M., Mulligan, J., Howbert, J. J., Ervin, F. Of monkeys and men: vervets and the genetics of human-like behaviors. Am J Hum Genet. 61, 481-488 (1997).
  9. Boire, D., Théoret, H., Ptito, M. Stereological evaluation of neurons and glia in the monkey dorsal lateral geniculate nucleus following an early cerebral hemispherectomy. Exp Brain Res. 142, 208-220 (2002).
  10. Bjugstad, K. B., Teng, Y. D., Redmond, D. E. J. r., Elsworth, J. D., Roth, R. H., Cornelius, S. K., Snyder, E. Y., Sladek, J. R. Human neural stem cells migrate along the nigrostriatal pathway in a primate model of Parkinson’s disease. Exp Neurol. 211, 362-369 (2008).
  11. Lemere, C. A., Beierschmitt, A., Iglesias, M., Spooner, E. T., Bloom, J. K., Leverone, J. F., Zheng, J. B., Seabrook, T. J., Louard, D., Li, D., Selkoe, D. J., Palmour, R. M., Ervin, F. R. Alzheimer’s disease abeta vaccine reduces central nervous system abeta levels in a non-human primate, the Caribbean vervet. Am J Pathol. 165, 283-297 (2004).
  12. Mash, D. C., Staley, J. K., Doepel, F. M., Young, S. N., Ervin, F. R., Palmour, R. M. Altered dopamine transporter densities in alcohol-preferring vervet monkeys. Neuroreport. 7, 457-462 (1996).
  13. Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure. Neuroreport. 20, 13-17 (2009).
check_url/1259?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J. Vis. Exp. (29), e1259, doi:10.3791/1259 (2009).

View Video