Summary

Gå igenom Icke-mänskliga primater Brain i Stereotaxic rymden

Published: July 16, 2009
doi:

Summary

Den icke-mänskliga primater är en viktig translationella art för vår förståelse av normal bearbetning av hjärnan. Den anatomiska organisation primater hjärnan kan ge viktiga insikter i normala och patologiska tillstånd hos människor.

Abstract

Användningen av icke-mänskliga primater är en utmärkt translationella modell för vår förståelse av utvecklings-och åldringsprocesser hos människor<sup> 1-6</sup>. Dessutom har användningen av icke-mänskliga primater ges nyligen tillfälle att naturligt modellera komplexa psykiatriska tillstånd såsom alkoholmissbruk<sup> 7</sup>. Här beskriver vi en teknik för att blockera hjärnan i coronal plan grön markatta (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>) I skallbenet i stereotaxic rymden. Den metod som beskrivs här ger en vanlig plan sträckan mellan block och ämnen och minimerar partiell sektioner mellan blocken. Sektionering ett block av vävnad i koronala plan underlättar också avgränsningen av ett område av intresse. Denna metod ger hanterbar storlek block eftersom en enda halvklot av grön markatta ger mer än 1200 delarna när skivning på 50μm. Vidare genom att blockera hjärnan i 1 cm block, det underlättar penetrationen av sackaros för cyroprotection och låter det block som ska skivas på en standard kryostat.

Protocol

Del 1: Förbehandling av vävnad Vävnad skall vara väl perfusion med paraformaldehyd, glutaraldehyd eller formalin. Detta kan uppnås genom vanliga transcardial perfusion vanligtvis används för att skörda andra organ. I den aktuella studien i ämnet var djupt sederad med ketamin hydroklorid (10 mg / kg im), avlivas med en överdos av natrium pentobarbital (25 mg / kg, iv) och perfusion transcardially med 0,1 M PBS tills den är helt exsanguinated.This följs med en 4% paraformaldehyd lösning i PBS i 5 m…

Discussion

St Kitts vervet (Chlorocebus aethiops sabeus) är en gammal värld primat med liknande mönster och skattesatser i kortikala och subkortikala hjärnans utveckling den för människor. Denna art har använts för att modellera komplexa mänskliga beteendestörningar såsom ångest beteende, hypertoni 8, hemispherectomy 9, Parkinsons sjukdom 10, Alzhemier sjukdom 11 och missbruk av alkohol 12. På senare tid har denna art använts för att studera neuroanatom…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Författarna vill tacka Ikiel Ptito för hans fortsatta teknisk support. NSERC bidrag till MP.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Scalpel   Fine Science Tools 10003-12  
Scalpel blades   Fine Science Tools 10011-00  
Scissors   Fine Science Tools 14090-11 Any surgical scissors are sufficient
Rongeurs   Fine Science Tools 16121-14  
Forceps   Fine Science Tools 11027-12  
Filter paper   Fisher 09-924-150  
Stereotaxic Frame   Kopf Instruments    
Tissue slicing blade   Thomas    

References

  1. Gallagher, M., Rapp, P. R. The use of animal models to study the effects of aging on cognition. Annu Rev Psychol 48. , 339-370 (1997).
  2. Clancy, B., Darlington, R., Finlay, B. Translating developmental time across mammalian species. Neuroscience. 105, 7-17 (2001).
  3. Nowakowski, R. S., Rakic, P. The site of origin and route and rate of migration of neurons to the hippocampal region of the rhesus monkey. J Comp Neurol. 196, 129-154 (1981).
  4. Rakic, P., Bourgeois, J. P., Eckenhoff, M. F., Zecevic, N., Goldman-Rakic, P. S. Concurrent overproduction of synapses in diverse regions of the primate cerebral cortex. Science. 232, 232-235 (1986).
  5. Granger, B., Tekaia, F., Le Sourd, A. M., Rakic, P., Bourgeois, J. P. Tempo of neurogenesis and synaptogenesis in the primate cingulate mesocortex: comparison with the neocortex. J Comp Neurol. 360, 363-376 (1995).
  6. Zecevic, N., Rakic, P. Development of layer I neurons in the primate cerebral cortex. J Neurosci. 21, 5607-5619 (2001).
  7. Ervin, F. R., Palmour, R. M., Young, S. N., Guzman-Flores, C., Juarez, J. Voluntary consumption of beverage alcohol by vervet monkeys: population screening, descriptive behavior and biochemical measures. Pharmacol Biochem Behav. 36, 367-373 (1990).
  8. Palmour, R. M., Mulligan, J., Howbert, J. J., Ervin, F. Of monkeys and men: vervets and the genetics of human-like behaviors. Am J Hum Genet. 61, 481-488 (1997).
  9. Boire, D., Théoret, H., Ptito, M. Stereological evaluation of neurons and glia in the monkey dorsal lateral geniculate nucleus following an early cerebral hemispherectomy. Exp Brain Res. 142, 208-220 (2002).
  10. Bjugstad, K. B., Teng, Y. D., Redmond, D. E. J. r., Elsworth, J. D., Roth, R. H., Cornelius, S. K., Snyder, E. Y., Sladek, J. R. Human neural stem cells migrate along the nigrostriatal pathway in a primate model of Parkinson’s disease. Exp Neurol. 211, 362-369 (2008).
  11. Lemere, C. A., Beierschmitt, A., Iglesias, M., Spooner, E. T., Bloom, J. K., Leverone, J. F., Zheng, J. B., Seabrook, T. J., Louard, D., Li, D., Selkoe, D. J., Palmour, R. M., Ervin, F. R. Alzheimer’s disease abeta vaccine reduces central nervous system abeta levels in a non-human primate, the Caribbean vervet. Am J Pathol. 165, 283-297 (2004).
  12. Mash, D. C., Staley, J. K., Doepel, F. M., Young, S. N., Ervin, F. R., Palmour, R. M. Altered dopamine transporter densities in alcohol-preferring vervet monkeys. Neuroreport. 7, 457-462 (1996).
  13. Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure. Neuroreport. 20, 13-17 (2009).
check_url/1259?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J. Vis. Exp. (29), e1259, doi:10.3791/1259 (2009).

View Video