Моделирование мышей колит использованием декстрана сульфата натрия (DSS)
Summary
Декстран сульфата натрия (DSS) вводят в питьевой воде является признанным мышиной модели воспалительных травмы острого колита. Этот протокол описывает метод для DSS лечения и подготовки ткани.
Abstract
Колит может быть вызван вирусной или бактериальной инфекции, ишемический инсульт, или аутоиммунные расстройства, особенно неспецифический язвенный колит и толстой вариант Болезнь Крона – Колит Крона. Острого колита могут проявляться болями в животе и вздутие живота, нарушение всасывания, понос, Hematochezia и слизи в стуле. Мы начинаем понимать сложные взаимодействия между окружающей средой, генетики и эпителиального барьера в дисфункция Воспалительные заболевания кишечника и животных моделях колита, сыграли существенную роль в продвижении нашего понимания этого заболевания. Один из популярных моделей не предусматривает дополняющие питьевой воды мышей с низкой молекулярной массой декстран сульфата натрия (DSS), что приводит к повреждению эпителия и надежный воспалительную реакцию в толстой кишке в течение нескольких дней<sup> 1</sup>. Вариации этот подход может быть использован для моделирования острой травмы, острое повреждение затем ремонт и повторяющиеся циклы DSS перемежаются с восстановлением моделирования хронических воспалительных заболеваний<sup> 2</sup>. После однократного четыре-й день лечения в размере 3% DSS в питьевой воде, мышах показывают признаки острого колита, включая потерю веса, кровавый стул и диарею. Мыши эвтаназии в конце курса лечения и при вскрытии расчлененный двоеточия обрабатываются и могут быть "швейцарский проката"<sup> 3</sup>, Чтобы микроскопический анализ всей толстой кишки или переплетаются с формалином, как "Колбасы", чтобы позволить макроскопического анализа. Ткань затем заливали в парафин, секционные и окрашивали для гистологического анализа.
Protocol
Discussion
Этот протокол может быть изменена для модели острого повреждения, травмы, ремонт, или хронические процессы толстой травмы.
Модификация острого травматизма:
DSS лечения импровизировать в течение 4-6 дней, после чего немедленно жертвы
Травма-Рем?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Финансовые средства, предоставленные NIH (1 K08 DK080221-01) и Вандербильт институциональных фондов развития.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Dextran Sulfate Sodium Salt | USB Corp | 9011-18-1 | mol wt 40,000-50,000 | |
| 10% Buffered Formalin Phosphate | Fisher Scientific | SF100-4 | ||
| Isoflurane, USP | Phoenix Pharmaceuticals | NDC 57319-474-06 | ||
| TISSUE PATH Macrosette Cassettes | Fisher Healthcare | 15182706 | ||
| BD 10 ml Syringe | B-D | 309604 | ||
| Ethyl Alcohol | Pharmco-Aaper | E190 | Dilute to 70% with distilled water | |
| 20G Straight Feeding Needle | VWR | 20068-612 | ||
| 27G1/2 PrecisionGlide Needle | B-D | 305109 | ||
| Dissecting Scissors Sharp/Blunt Tip | VWR | 82027-588 | ||
| Waugh Forceps | VWR | 82027-428 | ||
| Non-absorbable Suture | LOOK Surgical Specialties | SP116 | ||
| Whatman Blotting Paper | VWR | 28298-020 | Cut as needed | |
| Nalgene Surfactant-Free Cellulose Acetate (SFCA) Filter | Cole-Parmer | EW-06731-2 | ||
| Carbon fiber composites digital caliper | Fisher Scientific | 15-007-958 |
References
- Okayasu, I. A novel method in the induction of reliable experimental acute and chronic ulcerative colitis in mice. Gastroenterology. 98 (3), 694-702 (1990).
- Martinez, J. A. Deletion of Mtgr1 sensitizes the colonic epithelium to dextran sodium sulfate-induced colitis. Gastroenterology. 131 (2), 579-588 (2006).
- Moolenbeek, C., Ruitenberg, E. J. The “Swiss roll”: a simple technique for histological studies of the rodent intestine. Lab Anim. 15 (1), 57-59 (1981).
- Mahler, M. Differential susceptibility of inbred mouse strains to dextran sulfate sodium-induced colitis. Am J Physiol. 274, G544-551 (1998).
- Aharoni, R. Immunomodulatory therapeutic effect of glatiramer acetate on several murine models of inflammatory bowel disease. J Pharmacol Exp Ther. 318 (1), 68-78 (2006).
- Hahm, K. B. Loss of transforming growth factor beta signalling in the intestine contributes to tissue injury in inflammatory bowel disease. Gut. 49 (2), 190-198 (2001).
- Green, B. T. Adrenergic modulation of Escherichia coli O157:H7 adherence to the colonic mucosa. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 287 (6), G1238-1246 (2004).
- Dieleman, L. A. Chronic experimental colitis induced by dextran sulphate sodium (DSS) is characterized by Th1 and Th2 cytokines. Clin Exp Immunol. 114 (3), 385-391 (1998).
