ハワイのボブテイルイカから血球の入手 Euprymna scolopesと共生と非共生細菌への遵守を観察
Summary
このビデオでは、ハワイの不名誉除隊イカから血球（血液細胞）を取得する方法を紹介します<em> Euprymna scolopes</em>細胞生物学と細菌付着アッセイで使用するため。血球は、蛍光色素で染色し、GFPで標識した細菌にさらされる。
Abstract
有益なバクテリアとホストの間の分子のシグナル伝達を媒介する免疫系の役割に関する研究は、近年では、それらの細菌と真核生物の共進化の理解に多大な貢献をいただきました。ハワイのボブテイルのイカとの間の共生の関連付け、<em> Euprymna scolopes</em>と生物発光細菌<em>ビブリオfischeri</em>動物の開発に有益な細菌の効果を理解するためのモデル系として利用されている。最近の研究では、イカの宿主の自然免疫系の唯一の細胞成分、マクロファージのような血球ことが示されているが、おそらくこのアソシエーションの確立と維持を媒介する上で重要な役割を果たします。このプロトコルは、から血球を取得する方法を紹介します<em> E. scolopes</em>として細菌の結合アッセイにおいて、これらの細胞を使用してください。血リンパがメイン頭部血管から注射器で収集される前に大人のイカは、最初に麻酔です。抽出された血リンパに含まれているホストの血球は、、チャンバーカバーガラスに付着し、緑色蛍光タンパク質で標識された共生にさらされている<em>ビブリオfischeri</em>と非共生<em>ビブリオharveyi</em>。血球は、蛍光色素（細胞トラッカーオレンジ、Invitrogen社）で対比染色し、蛍光顕微鏡を用いて可視化されています。
Protocol
Discussion
有益なバクテリアとホストの間の分子のシグナル伝達を媒介する免疫系の役割に関する研究は、近年では、それらの細菌と真核生物の共進化の理解に多大な貢献をいただきました。イカ/ビブリオシステムはこのフィールド2,3,5,6,8での基本的な質問に答えるために扱いやすいモデル系としての地位を証明しています。イカEuprymna scolopesの光器官は発光細菌ビブリオfischeriに…
Acknowledgements
資金源：SVNへコネチカット研究財団と分子細胞生物学専攻の大学、シグマ西費補助金 – の研究とアントニオH.とMajorie R.
AJCにロマノ大学院教育フェローシップ
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Lab-Tek chambered #1.0 borosilicate coverglass system (8-chambers) | Thermo-Fisher Scientific | 155411 | ||
| 26.5 G 1ml latex-free insulin syringe | Becton, Dickinson and Company | C34551 | ||
| Cell Tracker Orange | Invitrogen | C34551 | ||
| SteREO Discovery V20 Microscope | Zeiss | |||
| SP2 Confocal Microscope | Leica |
References
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