Fabrication des électrodes et l'implantation de Aplysia californica Des enregistrements multi-canaux neuronaux et musculaires au Intact, Animaux Librement Behaving
Une technique est décrite pour l'implantation de quatre<em> In vivo</em> Électrodes pour surveiller le contrôle neuromusculaire du comportement alimentaire chez les<em> Aplysia californica</em>.
Abstract
Enregistrement à partir de nerfs et des muscles clés du<em> Aplysie</em> Au cours du comportement alimentaire nous permet d'étudier les modalités de contrôle neural chez un animal intact. Simultanément enregistrement à partir de multiples nerfs et des muscles nous donne des informations précises sur le calendrier de l'activité neuronale. Méthodes d'enregistrement antérieures ont travaillé pendant deux électrodes, mais l'étude des nerfs ou des muscles supplémentaires nécessaires combinant et la moyenne des enregistrements de plusieurs animaux, ce qui rend difficile de déterminer les détails fins du calendrier et les étapes, en raison de la variabilité de la réponse à la réponse, et de animal à l'autre. L'implantation de quatre électrodes individu a un taux de réussite très faible en raison de la formation d'adhérences qui empêchent les animaux d'accomplir des mouvements alimentation normale. Nous avons développé une nouvelle méthode de fabrication d'électrodes qui réduit la majeure partie des électrodes à l'intérieur de l'animal permettant des mouvements de l'alimentation normale. En utilisant une combinaison de colles pour fixer les résultats des électrodes dans une isolation plus fiable de l'électrode qui dure plus longtemps, ce qui permet d'enregistrer des périodes aussi longues que d'une semaine. La technique de fabrication que nous décrivons pourrait être étendue pour incorporer plusieurs électrodes supplémentaires, et serait applicable aux animaux vertébrés.
Protocol
1. Fabrication des électrodes Pour créer l'électrode, utiliser des ciseaux pour couper un morceau de 0,001 émaillé fils d'acier de diamètre pouces inox d'environ 2 pieds de long. Fixez une petite boule de pâte à chaque extrémité du fil, pliez le fil en deux, et de spin les extrémités pour créer une paire torsadée, dite électrode différentielle. Bande aux deux extrémités du fil pour prévenir leur effilage. Faire quatre électrodes différentielles, en utilisant une coul…
Discussion
Une innovation clé qui a fait ces enregistrements succès est la combinaison des électrodes dans un seul câble. Deux enregistrements d'électrodes ont été utilisées avant, mais en élargissant à quatre électrodes individuelles conduit à la formation d'adhérences chirurgicales qui ont souvent empêché l'animal de faire des mouvements alimentation normale. Combinant les électrodes dans un seul câble réduit la majeure partie des électrodes à l'intérieur de l'animal, qui à son tour réd…
Acknowledgements
Nous remercions le soutien du NIH (NS047073 au CSM). Nous sommes également reconnaissants à Catherine pour son Kehl premières expériences Kwik-Sil, qui nous a encouragés à l'utiliser pour notre application.
Cullins, M. J., Chiel, H. J. Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals. J. Vis. Exp. (40), e1791, doi:10.3791/1791 (2010).