Summary

Elektrot İmalat ve İmplantasyon Aplysia californica Bozulmamış, Serbestçe Behaving Hayvanlar Çok kanallı Sinir ve Kas Kayıtlar

Published: June 04, 2010
doi:

Summary

Tekniği dört implante<em> In vivo</em> Elektrotlar beslenme davranışı nöromüsküler kontrolü izlemek için<em> Aplysia californica</em>.

Abstract

Anahtar sinirler ve kaslar kayıt<em> Aplysia</em> Beslenme davranışı sırasında, bize sağlam bir hayvan desenleri sinir kontrol çalışma sağlar. Aynı zamanda birden fazla sinir ve kas kayıt sinirsel aktivite zamanlaması hakkında bize kesin bilgi verir. Önceki kayıt yöntemleri, iki elektrot için çalıştılar, ama yanıt yanıt birleştirerek ve değişkenliği nedeniyle zor zamanlama ve aşamalı ince ayrıntılarını belirlemek için yapılan birden fazla hayvan kayıtları, ortalama ek sinirlerin ve kasların çalışma gerekli, ve hayvan hayvan. Dört ayrı elektrot implante normal beslenme hareketleri yapan hayvanlar önlemek yapışıklıkların oluşumuna bağlı olarak çok düşük bir başarı oranı vardır. Biz normal beslenme hareketleri için izin hayvan içindeki elektrotlar toplu azaltır elektrot fabrikasyonu yeni bir yöntem geliştirdi. Tutkal, daha uzun sürer elektrot, daha güvenilir bir yalıtım elektrotlar sonuçlarını eklemek mümkün, bir hafta gibi uzun süreler rekor bir arada kullanarak. Birkaç ek elektrotlar dahil anlatan üretim tekniği uzatılabilir ve omurgalı hayvanlar için geçerli olacaktır.

Protocol

1. Elektrot Fabrikasyon Elektrot oluşturmak için, yaklaşık 2 metre uzunluğunda, emaye kaplı, 0.001 inç çapında paslanmaz çelik tel bir parça kesmek için makas kullanın. Macun, telin her iki ucuna da küçük bir topu takın yarısında tel kat ve bükümlü çift oluşturmak için biter Spin diferansiyel elektrot denir. Teyp çözülüyor önlemek için tel uçlarının her ikisini de. Tanıtım amaçlı her diferansiyel elektrot (Şekil 1A) için dört bant farklı bir renk kullanılar…

Discussion

Bu kayıtların başarılı kılan önemli yenilik, tek bir kablo içine elektrotlar birleştiriyor. İki elektrot kayıtları önce kullanılan, ancak dört ayrı elektrotlar genişleyen genellikle normal beslenme hareketleri yapmaktan hayvan engelledi cerrahi yapışıklıkların oluşumuna neden olmuştur. Tek bir kablo içine elektrotlar birleştiren da bağışıklık yanıtı azaltır hayvan, içine elektrotlar toplu azaltır ve hayvan daha serbestçe hareket etmesine olanak sağlar.

B…

Acknowledgements

Biz minnetle NIH (NS047073 YYK) desteğiyle kabul etmiş sayılırsınız. Biz de, bize uygulama için kullanmaya teşvik Kwik-Sil, onu erken deneyler için Catherine Kehl minnettarız.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Enamel coated stainless steel wire   California Fine Wire   0.001D, coating h
Household Silicone II Glue   GE    
Kwik-Sil Adhesive   WPI    
Duro Qwik-Gel superglue   Henkel corp.    
A-M Systems model 1700 amplifier   A-M Systems   Filter settings:100-1000Hz nerves,10-1000Hz I2 muscle
Axoscope 10.1   Molecular Devices    
Gold Connector Pins   Bulgin SA3148/1  
Gold Connector Sockets   Bulgin SA3149/1  

References

  1. Lu, H., Chestek, C. A., Shaw, K. M., Chiel, H. J. Selective extracellular stimulation of individual neurons in ganglia. J. Neural Eng. 5, 287-309 (2008).
  2. Morton, D. W., Chiel, H. J. In vivo buccal nerve activity that distinguishes ingestion from rejection can be used to predict behavioral transitions in Aplysia. J Comp. Physiol. A. 172, 17-32 (1993).
  3. Warman, E. N., Chiel, H. J. A new technique for chronic single extracellular recording in freely behaving animals using pipette electrodes. J. Neurosci. Methods. 57, 161-169 (1995).
  4. Ye, H., Morton, D. W., Chiel, H. J., J, H. nbsp;Neuromechanics of multifunctionality during rejection in Aplysia californica. J. Neurosci. 26, 10743-10755 (2006).
check_url/1791?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Cullins, M. J., Chiel, H. J. Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals. J. Vis. Exp. (40), e1791, doi:10.3791/1791 (2010).

View Video