分离人脐静脉内皮细胞（HUVEC）

Summary

这个视频协议说明了人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的人脐血的分离和培养。一旦分离出这些细胞可以在体外血管生成像优化的纤维蛋白凝胶珠还展示了由休斯实验室的检测分析。

Abstract

血管生成是一个复杂的多步骤的过程，在血管生成刺激，从现有的血管创建新船。这些步骤包括：降解基底膜，增殖和迁移（发芽）内皮细胞到细胞外基质，对齐欧共体（EC）的成线，形成管腔吻合，并形成一个新的基底膜。在体外实验中有许多已开发研究这个过程，但大多只模仿血管生成的某些阶段，形态的船只往往并不像在体内的船只。在这里，我们证明，利用人脐静脉EC和成纤维细胞在体外血管生成试验进行了优化。这种模式概括所有血管生成的关键早期阶段，而重要的血管显示专利包围极化欧共体间流明。船只，可以很方便地观察相衬和时间推移显微镜，并在下游应用纯粹的形式收回。

Protocol

程序放置于清洁垫和民建联多余的血线。线的两端的新鲜削减。 21 1 / 2 G针 ，静脉插入的塑料针鞘上。 （静脉是世界上最大的开放; 2较小的动脉） 用止血钳将针钳 ，重视汉克斯20CC的注射器针头。 通过适度的压力静脉推汉克斯 。与漂白水的烧杯中收集的废物。 （用单手的针和线的同时，也会防止针头静…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
0.1% Collagenase				10ml per cord, warmed to 37°C
Tissue culture flasks				T75, one per cord.
Hanks medium
scissors				sterile
beaker				sterile
50 ml tubes