Summary

Procedura di trapianto epiteliali mammarie

Published: June 10, 2010
doi:

Summary

Questo articolo illustra la procedura sviluppata da DeOme KB<em> Et al.</em> (1959) e la procedura risparmiando sviluppato da Brill B<em> Et al.</em> (2008) per la cancellazione del 4 inguinale pad mammaria di un topo grasso pubescente in preparazione per il trapianto di frammenti mammaria, cellule epiteliali mammarie, o cellule tumorali mammarie.

Abstract

Questo articolo descrive e mette a confronto il grasso procedura di liquidazione pad sviluppato da DeOme KB et al. 1 e della procedura di risparmio sviluppato da Brill B et al. 2, seguita dalla procedura di trapianto epiteliali mammarie. La procedura di trapianto mammaria è ampiamente utilizzato dai biologi mammaria perché sfrutta il fatto che lo sviluppo significativo dell'epitelio mammario non avviene solo dopo la pubertà. A 3 settimane di età, la crescita della pianta epiteliali mammarie è limitata alla vicinanza con il capezzolo e il cuscinetto adiposo è in gran parte privo di epitelio mammario, ma da 7 settimane di età dell'albero epiteliale duttale si estende in tutto il cuscinetto di grasso intero. Pertanto, se questa piccola porzione del cuscinetto adiposo contenente epitelio, la regione tra il capezzolo e il linfonodo, viene rimosso a 3 settimane di età, l'epitelio endogeno non sarà mai popolare il pad mammaria grasso e il cuscinetto adiposo è descritto come "cancellato ". In questo momento, epitelio mammario da un'altra fonte possono essere trapiantate nel cuscinetto di grasso eliminato dove si ha la possibilità di estendere mammario duttale alberi attraverso il cuscinetto adiposo. Questa procedura è stata utilizzata in molti modelli sperimentali tra cui l'esame del fenotipo tumorale in transgenico tessuti epiteliali mammarie senza gli effetti confondenti del genotipo sull'animale intero 3, per l'identificazione delle cellule staminali mammarie trapiantando cellule in diluizione limitato 4,5, determinando se noduli iperplastici procedere alla tumori mammari 6, e di valutare l'effetto della esposizione ormonale prima sul comportamento dell'epitelio mammario 7,8.

Tre topi ospitare settimana di vita sono anestetizzati, puliti e trattenuto in una fase chirurgica. Un sagittale incisione è fatta attraverso la pelle, ma non il peritoneo, che si estende dal pube allo sterno. Tagli obliqui sono realizzate attraverso la pelle a partire dalla metà sagittale incisione in tutto il bacino verso ogni gamba. La pelle è allontanata dal peritoneo per esporre il 4 ghiandola mammaria inguinale. Il cuscinetto adiposo viene cancellata, eliminando il grasso anteriore tessuto pad per il linfonodo. Frammenti di epitelio o cellule epiteliali vengono trapiantate nel restante pad eliminato il grasso e il mouse è chiuso.

Protocol

1. Preparazione del trapianto di epitelio Tessuto del donatore freschi o surgelati epiteliali possono essere trapiantate nel cuscinetto di grasso eliminato, ma la preparazione prima di epitelio donatore congelato è più conveniente con una diminuzione minima in termini di efficienza trapianto (efficienza> 85%). Il protocollo per la preparazione di epitelio donatore congelato è la seguente: Prima di preparare trapianto di epitelio donatore, preparare i supporti…

Discussion

In questo rapporto, presentiamo due metodi alternativi per la pulizia del cuscinetto adiposo mammario del mouse in preparazione per i trapianti epiteliali mammarie. La procedura standard è stato in uso dal suo sviluppo nel 1959 da DeOme et al. 1 Mentre più invasivo, il metodo standard è il metodo preferito per la formazione del novizio perché la struttura e l'orientamento della ghiandola mammaria sono facilmente visualizzati. Tuttavia, la procedura risparmiando può essere preferito dal chiru…

References

  1. DeOme, K. B., Faulkin, L. J., Bern, H. A., Blair, P. B. Development of mammary tumors from hyperplastic alveolar nodules transplanted into gland-free mammary fat pads of female C3H mice. Cancer Res. 19, 515-520 (1959).
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Cite This Article
Dunphy, K. A., Tao, L., Jerry, D. J. Mammary Epithelial Transplant Procedure. J. Vis. Exp. (40), e1849, doi:10.3791/1849 (2010).

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