Summary

Молочные Эпителиальные Процедура трансплантации

Published: June 10, 2010
doi:

Summary

В этой статье показано процедура разработана DeOme КБ<em> Соавт.</em> (1959) и щадящая процедура разработана Брилл B<em> Соавт.</em> (2008) для очистки 4-й паховых молочных жиров площадке опушенные мыши в рамках подготовки к трансплантации молочных фрагменты, молочной эпителиальных клеток, или молочных опухолевых клеток.

Abstract

В этой статье описываются и сравниваются жира процедура оформления площадки разработанный КБ DeOme и соавт. 1 и щадящие процедуры разработаны Брилл В соавт. 2, а затем молочной эпителиальных процедуры трансплантации. Молочных процедуры трансплантации широко используется молочной биологов, поскольку она использует в своих интересах тот факт, что значительное развитие молочных эпителия происходит только после полового созревания. В 3-недельного возраста, роста молочных эпителиальных дерева ограничивается близости от соска и жировой ткани в значительной степени лишенные эпителия молочной, но на 7-недельного возраста эпителия протоков дерева простирается по всей жировой ткани. Поэтому, если это небольшая часть жировой ткани содержащие эпителия, область между соском и лимфатических узлов, удаляется на 3-недельного возраста, эндогенные эпителия никогда не будет заполнить молочной жировой ткани и жировой ткани описывается как "очищаются ». В это время, молочной эпителия из другого источника могут быть пересажены в очищенном жировой ткани, где она имеет потенциал для расширения протоков молочных деревьев путем из жировой ткани. Эта процедура была использована во многих экспериментальных моделей, включая рассмотрение опухоли фенотипа у трансгенных молочных эпителиальные ткани без смешанные эффекты генотипа на весь животный 3, в идентификации стволовых клеток молочной железы путем пересадки клеток в ограниченном разбавления 4,5, определяющих если гиперпластические узелки приступить к опухоли молочной железы 6, а также для оценки влияния предварительного воздействия гормона на поведение молочных эпителия 7,8.

Три недели старых мышей хоста под наркозом, очищено и сдержанный на хирургический этап. Середине сагиттальной разрез делается через кожу, но не брюшины, простирающейся от лобка до грудины. Наклонные разрезы производятся через кожу от середины сагиттальной разрез через таз к каждой ноге. Кожа оторвался от брюшины подвергать 4-й паховых молочной железы. Жировая ткань удаляется путем удаления жира передней ткани площадку для лимфатических узлов. Эпителий фрагменты или эпителиальные клетки пересаживают в оставшейся жировой ткани очищаются и мыши закрыт.

Protocol

1. Подготовка трансплантации Эпителий Свежие или замороженные доноров эпителиальной ткани можно пересаживать в очищается жировой ткани, но предварительная подготовка замороженных эпителия донором является более удобным с минимальным снижением эффективности транспла…

Discussion

В данном отчете мы представляем два альтернативных метода для очистки молочной железы мыши жировой ткани в рамках подготовки к молочной эпителиальных трансплантации. Стандартная процедура была в использовании, поскольку ее развитие в 1959 году DeOme и соавт. 1 При более агресси?…

References

  1. DeOme, K. B., Faulkin, L. J., Bern, H. A., Blair, P. B. Development of mammary tumors from hyperplastic alveolar nodules transplanted into gland-free mammary fat pads of female C3H mice. Cancer Res. 19, 515-520 (1959).
  2. Brill, B., Boecher, N., Groner, B., Shemanko, C. S. A sparing procedure to clear the mouse mammary fat pad of epithelial components for transplantation analysis. Laboratory Animals. 42, 104-110 (2008).
  3. Jerry, D. J., Kittrell, F. S., Kuperwasser, C., Laucirica, R., Dickinson, E. S., Bonilla, P. J., Butel, J. S., Medina, D. A mammary-specific model demonstrates the role of the p53 tumor suppressor gene in tumor development. Oncogene. 19, 1052-1058 (2000).
  4. Shackleton, M., Vaillant, F., Simpson, K. J., Stingl, J., Smyth, G. K., Asselin-Labat, M. -. L., Wu, L., Lindman, G. J., Visvader, J. E. Generation of a functional mammary gland from a single stem cell. Nature. 439, 84-88 (2006).
  5. Stingl, J., Eirew, P., Ricketson, I., Shackleton, M., Vaillant, F., Choi, D., Li, H. I., Eaves, C. J. Purification and unique properties of mammary epithelial stem cells. Nature. 439, 993-997 (2006).
  6. Medina, D. Preneoplastic Lesions in Murine Mammary Cancer. Cancer Res. 36, 2589-2595 (1976).
  7. Wagner, K. -. U., Boulanger, C. A., Henry, S. g. a. g. i. a. s., Hennighausen, M., Smith, G. H. L. An adjunct mammary epithelial cell population in parous females: its role in functional adaptation and tissue renewal. Development. 129, 1377-1386 (2002).
  8. Dunphy, K. A., Blackburn, A. C., Haoheng, Y., O Connell, L. R., Jerry, D. J. Estrogen and progesterone induce persistent increases in p53-dependent apoptosis and suppress mammary tumors in BALB/c-Trp53+/- mice. Breast Cancer Res. 10 (3), R43-R43 (2008).
check_url/1849?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Dunphy, K. A., Tao, L., Jerry, D. J. Mammary Epithelial Transplant Procedure. J. Vis. Exp. (40), e1849, doi:10.3791/1849 (2010).

View Video