Bröst Epithelial transplantationen
Summary
Den här artikeln visar det förfarande som utvecklats av DeOme KB<em> Et al.</em> (1959) och sparsam förfarande som utvecklats av Brill B<em> Et al.</em> (2008) för att rensa den 4: e ljumsk juverfett pad av en ludna mus inför transplantation av bröst fragment, bröst epitelceller, eller bröst tumörceller.
Abstract
Den här artikeln beskriver och jämför fettet förfarande pad clearance utvecklades av DeOme KB et al. 1 och sparsam förfarande som utvecklats av Brill B et al. 2, följt av bröst epiteliala transplantationen. Det mammary transplantationen används flitigt av bröst biologer eftersom det tar fördel av det faktum att betydande utveckling av bröst epitel inte sker förrän efter puberteten. Vid 3 veckors ålder, är tillväxten av bröst epitelceller trädet begränsat till närheten av bröstvårtan och fettet pad är till stor del saknar bröst epitel, men med 7 veckors ålder epitelceller duktal trädet sträcker sig genom hela fet pad. Därför, om denna lilla del av fettet pad innehåller epitel är området mellan bröstvårtan och lymfkörtel, tas bort vid 3 veckors ålder, kommer den endogena epitelet befolkar aldrig juverfett pad och fettet pad beskrivs som "rensas ". Vid denna tid, kan bröst epitel från en annan källa ska transplanteras i rensas fett pad där den har potential att förlänga mammary duktal träd genom ut fettet pad. Detta förfarande har utnyttjats i många experimentella modeller inklusive granskning av tumör fenotyp i transgena bröst epitelvävnad utan störande inverkan av genotyp på hela djuret 3, identifiering av bröst stamceller genom att transplantera celler i begränsad utspädning 4,5, bestämma Om hyperplastiska knutor vidare till juvertumörer 6, och för att utvärdera effekten av tidigare hormonexponering på beteendet hos de mammary epitel 7,8.
Tre veckor gamla värd möss är bedövad, rengöras och återhållsam på en kirurgisk scen. En utvärdering efter halva sagittal snitt görs genom huden, men inte bukhinnan, sträcker sig från pubis till bröstbenet. Snedställda snitt görs genom huden från mitten av sagittal snitt över bäckenet mot varje ben. Huden dras bort från bukhinnan att exponera den 4: e ljumsk bröstkörtlarna. Fettet pad rensas genom att ta bort fettet främre pad vävnad till lymfkörtel. Epitel fragment eller epitelceller transplanteras in i rensas resterande fettet pad och musen är stängd.
Protocol
Discussion
I denna rapport presenterar vi två alternativa metoder för att rensa musen juverfett pad som en förberedelse för bröst epitelceller transplantationer. Standarden Förfarandet har varit i bruk sedan dess utveckling 1959 av DeOme et al. 1 Medan mer invasiva, är standard metoden att föredra för att utbilda nybörjare eftersom strukturen och orientering av bröstkörteln är lätt ses. Kan dock bespara förfarande föredras av de mer erfarna kirurgen på grund av flera fördelar 2. Vik…
References
- DeOme, K. B., Faulkin, L. J., Bern, H. A., Blair, P. B. Development of mammary tumors from hyperplastic alveolar nodules transplanted into gland-free mammary fat pads of female C3H mice. Cancer Res. 19, 515-520 (1959).
- Brill, B., Boecher, N., Groner, B., Shemanko, C. S. A sparing procedure to clear the mouse mammary fat pad of epithelial components for transplantation analysis. Laboratory Animals. 42, 104-110 (2008).
- Jerry, D. J., Kittrell, F. S., Kuperwasser, C., Laucirica, R., Dickinson, E. S., Bonilla, P. J., Butel, J. S., Medina, D. A mammary-specific model demonstrates the role of the p53 tumor suppressor gene in tumor development. Oncogene. 19, 1052-1058 (2000).
- Shackleton, M., Vaillant, F., Simpson, K. J., Stingl, J., Smyth, G. K., Asselin-Labat, M. -. L., Wu, L., Lindman, G. J., Visvader, J. E. Generation of a functional mammary gland from a single stem cell. Nature. 439, 84-88 (2006).
- Stingl, J., Eirew, P., Ricketson, I., Shackleton, M., Vaillant, F., Choi, D., Li, H. I., Eaves, C. J. Purification and unique properties of mammary epithelial stem cells. Nature. 439, 993-997 (2006).
- Medina, D. Preneoplastic Lesions in Murine Mammary Cancer. Cancer Res. 36, 2589-2595 (1976).
- Wagner, K. -. U., Boulanger, C. A., Henry, S. g. a. g. i. a. s., Hennighausen, M., Smith, G. H. L. An adjunct mammary epithelial cell population in parous females: its role in functional adaptation and tissue renewal. Development. 129, 1377-1386 (2002).
- Dunphy, K. A., Blackburn, A. C., Haoheng, Y., O Connell, L. R., Jerry, D. J. Estrogen and progesterone induce persistent increases in p53-dependent apoptosis and suppress mammary tumors in BALB/c-Trp53+/- mice. Breast Cancer Res. 10 (3), R43-R43 (2008).
