Summary

استرجاع البويضات ماوس

Published: April 28, 2007
doi:

Summary

هذا البروتوكول يوضح تقنية لاستخراج البويضات أو الأجنة في مرحلة مبكرة من قناة البيض المخصب من الفئران. القدرة على تحديد infindibulum وادخال ابرة في نهاية حادة من الضروري القيام بشكل صحيح الإجراء.

Abstract

حتى الآن ، وأفادت دراسات قليلة فقط التلاعب الناجح للمرحلة التطور الجنيني Peromyscus أو البيولوجيا الإنجابية. جنبا إلى جنب مع الأسهم Peromyscus مركز الوراثية (http://stkctr.biol.sc.edu) ، ونحن تميز الاختلافات البارزة اللازمة لتطوير هذا النظام. وكان أحد الأهداف الرئيسية لتحسين البويضة / أوائل استرجاع الجنين.

Protocol

جنين / سيت استرجاعها يجب إذابة مدة ساعتين على الأقل قبل استرجاع الأجنة / البويضات ، يتم وضع KSOM في 37 درجة مئوية حاضنة 2 أكسيد الكربون وFHM من ° -20. ويستخدم الزجاج صحن يحتوي على ثلاثة آبار ضحلة مقعرة لقطرات منزل KSOM في ا?…

Discussion

في هذه المقالة ، ونحن لشرح استرجاع البويضات من الاباضة بفعل Peromyscus (superovulated). استخدام فرط الإباضة (على العكس من دورة دقي الطبيعي) هو شائع نظرا لأعداد أكبر بكثير الناتجة عن ذلك. ومع ذلك ، يجب اتخاذ الحذر في تفسير نتائج استخدام هذه البويضات / الأجنة ، كما كل من الهرمونات المستخدمة للح?…

Acknowledgements

وأود أن أشكر مايك ديوي من مركز ألبوم الوراثية Peromyscus على صبره والمساعدة والمعرفة.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Flushing needle Tool Zephyrtronics ZT5-130-L 30 gauge blunt
Forceps (2) Tool Roboz RS-5060  
Peromyscus Animal Peromyscus Genetic Stock Center    
Scissors Tool Roboz RS-5880  
FHM HEPES Buffered Media Reagent Specialty Media MR-025-d  
KSOM Embryo Culture Medium (5×10 ml) Reagent Specialty Media MR-020P-5F  
Mouth Pipette Tool     Pulled from glass capillaries and attached to rubber tubing
Oocyte holding dish Tool     Glass container with concave divets
check_url/185?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Duselis, A. R., Vrana, P. B. Retrieval of Mouse Oocytes. J. Vis. Exp. (3), e185, doi:10.3791/185 (2007).

View Video