फ्लैश बर्फ़ीली और E12.5 माउस ब्रेन Cryosectioning
Summary
इस वीडियो में प्रदर्शन कर रहे हैं फ़्लैश ठंड और सेक्शनिंग माउस से भ्रूण मस्तिष्क के ऊतकों के लिए तकनीकों. Cryostat का उपयोग करने के लिए उपयोगी सुझावों निवारण तरीकों कि इस्तेमाल किया जा सकता है, जबकि करने के लिए सुनिश्चित करें कि परिणामी ऊतकों वर्गों दरारें और अन्य विकृतियों के लिए स्वतंत्र हैं काटने सहित दिए गए हैं.
Protocol
पीबीएस में वांछित समय के लिए 4% paraformaldehyde में ऊतक को ठीक करें. Sucrose ऊतक पानी में डालना (cryoprotection) पीबीएस w v / में 2059 ट्यूब में 30% sucrose के समाधान करें. पीबीएस में ऊतक 3x कुल्ला (~ कमाल के साथ 5 मिनट). 30% sucrose के समाधान में र?…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Tissue-Tek Cryomold | Ted Pella, Inc. | 27181 | ||
| O.C.T. | Ted Pella, Inc | 27050 | ||
| Sucrose solution | 30% sucrose solution in PBS w/v | |||
| paraformaldehyde | 4% paraformaldehyde in PBS |
Cite This Article
Currle, D. S., Monuki, E. S. Flash Freezing and Cryosectioning E12.5 Mouse Brain. J. Vis. Exp. (4), e198, doi:10.3791/198 (2007).