闪存冻结和Cryosectioning E12.5小鼠脑
Summary
这个视频展示了闪光冻结和从小鼠胚胎脑组织切片技术。使用低温恒温器的有用提示，其中包括排除故障的方法，可以用来切割，以确保由此产生的组织部分无裂缝和其他扭曲。
Protocol
修复所需的时间为4％多聚甲醛的PBS组织。 蔗糖注入组织（cryoprotection） 请在PBS W / V在2059管30％的蔗糖溶液。 在PBS冲洗组织的3倍（与摇摆〜5分钟）。 将组织30％的蔗糖溶液中。组织不会下沉。 组织放置在4℃过夜，或直至它已经沉没。 标签适当大小cryomold信息和导向。 填写cryomold与华侨城（避免气泡）。 转移组织华侨城浴和大衣与华侨城组…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Tissue-Tek Cryomold | Ted Pella, Inc. | 27181 | ||
| O.C.T. | Ted Pella, Inc | 27050 | ||
| Sucrose solution | 30% sucrose solution in PBS w/v | |||
| paraformaldehyde | 4% paraformaldehyde in PBS |
Cite This Article
Currle, D. S., Monuki, E. S. Flash Freezing and Cryosectioning E12.5 Mouse Brain. J. Vis. Exp. (4), e198, doi:10.3791/198 (2007).