Флэш Замораживание и Cryosectioning E12.5 мозга мыши

Summary

Продемонстрированный в этом видео-методы для флеш-замораживания и секционирования эмбриональной ткани мозга от мыши. Полезные советы по использованию криостат даны, в том числе способы устранения неполадок, которые могут использоваться при резке, чтобы результирующая разделах ткани без трещин и других искажений.

Protocol

Fix ткани в 4% параформальдегида в ФСБ на необходимое время. Сахароза влить ткани (криозащиты) Сделать 30% раствор сахарозы в ФБР м / о в 2059 трубке. Промойте ткань в 3 раза PBS (~ 5 мин с качалки). Место ткани в 30% раствором сахарозы. Ткань не утонет. Место ткани в 4 ° С в течение ночи…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Tissue-Tek Cryomold		Ted Pella, Inc.	27181
O.C.T.		Ted Pella, Inc	27050
Sucrose solution				30% sucrose solution in PBS w/v
paraformaldehyde				4% paraformaldehyde in PBS