Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Effekten av Fus subkutana nålning på ischiasnervsmärta: Beteendemässiga och elektrofysiologiska förändringar i en råttmodell för kronisk förträngningsskada

Published: June 30, 2023 doi: 10.3791/65406
Automatic Translation
*1,2, *3,4, 5,6, 7,8,9
1Department of Chinese Medicine, Chang Bing Show Chwan Memorial Hospital, 2Graduate Institute of Integrated Medicine, College of Chinese Medicine, China Medical University, 3Institute of Fu's Subcutaneous Needling, Beijing University of Chinese Medicine, 4Clinical Medical College of Acupuncture & Moxibustion and Rehabilitation, Guangzhou University of Chinese Medicine, 5Experimental Animal Center, Department of Molecular Biology and Cell Research, Chang Bing Show Chwan Memorial Hospital, 6Department of Pharmacy and Master Program, Tajen University, 7Department of Physical Medicine and Rehabilitation, China Medical University Hospital, 8Department of Physical Therapy and Graduate Institute of Rehabilitation Science, China Medical University, 9Department of Physical Medicine and Rehabilitation, Asia University Hospital, Asia University
* These authors contributed equally

Summary

Vi presenterar ett protokoll för att använda Fus subkutana nålning i en modell av kronisk förträngningsskada för att inducera ischiasnervsmärta hos råttor.

Abstract

Fus subkutannålning (FSN), en uppfunnen akupunkturteknik från traditionell kinesisk medicin, används över hela världen för smärtlindring. Verkningsmekanismerna är dock fortfarande inte helt klarlagda. Under FSN-behandlingen förs FSN-nålen in och hålls kvar i de subkutana vävnaderna under lång tid med en svajande rörelse. Utmaningar uppstår dock när man upprätthåller en hållning samtidigt som man manipulerar FSN i djurmodeller (t.ex. råttor) för forskare. Obekväm behandling kan leda till rädsla och resistens mot FSN-nålar, vilket ökar risken för skador och kan till och med påverka forskningsdata. Anestesi kan också påverka studieresultaten. Därför finns det ett behov av strategier i FSN-terapi på djur som minimerar skador under ingreppet. Denna studie använder en modell för kronisk förträngningsskada på Sprague-Dawley-råttor för att inducera neuropatisk smärta. Denna modell replikerar smärtan som induceras av nervskada som observerats hos människor genom kirurgisk sammandragning av en perifer nerv, vilket efterliknar den kompression eller inklämning som ses vid tillstånd som nervkompressionssyndrom och perifera neuropatier. Vi introducerar en lämplig manipulation för att enkelt föra in en FSN-nål i det subkutana lagret av djurets kropp, inklusive nålinsättning och riktning, nålretention och svajande rörelse. Att minimera råttans obehag förhindrar att råttan blir spänd, vilket gör att muskeln drar ihop sig och hindrar nålens inträde och förbättrar studieeffektiviteten.

Introduction

Neuropatisk smärta, definierad som smärta orsakad av nervskada, beräknas drabba 6,9–10 % av världens befolkning, och den rapporterade livstidsprevalensen är 49–70 %1,2. Det anses också vara ett av de svåraste smärtsyndromen att hantera. Användningen av farmakologiska medel för att hantera neuropatisk smärta har gett begränsad framgång eftersom vanligt förskrivna smärtstillande läkemedel som icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel och opioider har visat liten effekt när det gäller att lindra denna typ av smärta 3,4. Det finns därför ett stort behov av att utforska nya behandlingsalternativ, särskilt icke-farmakologiska behandlingar. Akupunktur, som en icke-farmakologisk intervention, kan potentiellt lindra neuropatisk smärta genom att utöva smärtstillande effekter på det somatosensoriska systemet. Både kliniska och prekliniska studier har indikerat att akupunktur är effektivt för att lindra neuropatiska smärtsymtom utan signifikanta biverkningar 5,6,7. Den centrala mekanismen för akupunkturbehandling för smärtlindring vid neuropatisk smärta återstår dock att undersöka vidare.

Under de senaste åren har Fus subkutannålning (FSN) vunnit popularitet för behandling av smärtrelaterade neurologiska störningar8. FSN härstammar från traditionell kinesisk akupunktur och beskrevs första gången av den traditionella kinesiska läkaren Zhonghua Fu 1996 9,10. Även om FSN har sitt ursprung i traditionell akupunktur, skiljer sig FSN avsevärt i sina tekniker och teorier från meridianbaserad akupunktur, yin- och yang-principer och akupunkturpunktskoncept. FSN lägger större vikt vid neurofysiologiska och anatomiska metoder för att effektivt hantera myofasciell smärta11. FSN-terapi tillämpas i klinisk praxis för att behandla olika smärtsamma muskelsjukdomar, med inriktning på bindväv som är nära förknippad med musklerna, med särskilt fokus på behandling av spända muskler (TM)12. Som en kompletterande terapi för smärtlindring finns det också kliniska bevis för att FSN är effektivt vid behandling av mjukdelsskador förutom att det ger snabb smärtlindring och betydande förbättring av mjukdelspasmer13,14. FSN-terapi involverar specifika tekniker som är skräddarsydda för att ta itu med de underliggande myofasciella triggerpunkterna (MTrP) som är associerade med tillståndet. FSN-nålens insättningsposition är noggrant vald baserat på placeringen av dessa triggerpunkter, vilket möjliggör exakt inriktning på drabbade områden. Under ingreppet förs FSN-nålen in i det subkutana skiktet, där den avsiktligt stoppas för att optimera de terapeutiska effekterna. En distinkt teknik som kallas den svängande rörelsen används sedan, vilket innebär en mjuk oscillerande rörelse av nålen för att stimulera vävnaderna och främja de terapeutiska svaren10. Utvecklingen av MTrPs är förknippad med energikristeorin, som förklarar att faktorer som kronisk muskelöverbelastning, överdriven träning, felaktiga ansträngningsställningar, muskelatrofi och degeneration kan bidra till uppkomsten av muskelvävnadsischemi och hypoxi. Denna syre- och energibrist i muskelvävnaden tros spela en nyckelroll i bildandet av MTrPs15,16. Tidigare djurstudier har visat att FSN-behandling för kronisk smärta hos råttor förbättrar mitokondriernas morfologiska struktur och funktion i TM i viss utsträckning, vilket validerar FSN-terapins potential att främja återhämtningen av skadade nerver och muskler17.

Ischias har klassificerats som neuropatisk smärta18. Ursprunget till neuropatisk smärta tros ligga någonstans mellan den motoriska ändplattan och det yttre fibrösa lagret av muskeln, som involverar det mikrovaskulära systemet och neurotransmittorer på cellnivå. Förlust av muskelinnervation och apoptos av innerverade nervceller uppstår när nervskada uppstår19, vilket leder till smärtrelaterad gång i den drabbade extremiteten. Dessutom kan kronisk kompression eller irritation av nerven leda till en mängd olika förändringar i nervfunktionerna, vilket ytterligare kan förvärra symtomen på ischias20. Nervsystemets komplexitet gör det dock svårt att replikera det in vitro, vilket gör det nödvändigt att använda djurmodeller för sådana studier. Vid undersökning av neuropatiska smärtstörningar används ofta modellorganismer, som involverar olika metoder för direkt perifer nervskada, såsom ischiasnervligatur, transektion eller kompression21,22. Modellen för kronisk sammandragningsskada (CCI) hos Sprague-Dawley-råttor har använts för att inducera neuropatisk smärta. Denna modell replikerar smärtan som induceras av nervskada som observerats hos människor genom kirurgisk sammandragning av en perifer nerv, vilket efterliknar den kompression eller inklämning som ses vid tillstånd som nervkompressionssyndrom och perifera neuropatier.

I denna studie utvärderade vi de smärtstillande effekterna av FSN-terapi och lågfrekvent elektroterapi (transkutan elektrisk nervstimulator, TENS) hos råttor med kronisk förträngningsskada och neuropatisk smärta. Eftersom anestesi saktar ner eller blockerar nervimpulser och påverkar synaptisk överföring och neuronal funktion23, kan djur inte sövas under alla nålningsprocedurer och svajande rörelser. Därför krävs en lämplig nålteknik för att minska obehag hos råttor. Stegen för att etablera en CCI-modell för råttor, hur råttorna behandlades med FSN kombinerad svajrörelse utan bedövning, genomförbara beteendemönstertester på djur och elektrofysiologiska undersökningar beskrivs i detalj.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alla förfaranden som involverar djur godkändes av Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) vid Chang Bing Show Chwan Memorial Hospital, Changhua, Taiwan (111031) i oktober 2022 (figur 1).

1. Förberedelse av djur

  1. Köp 48 hanråttor av märket Sprague-Dawley (SD) (ålder: 8-10 veckor, vikt: 250-300 g).
  2. Förvara råttor individuellt i ventilerade burar vid 24 ± 2 °C och en 12-timmars mörk- och ljuscykel.
  3. Ge råttorna en standardpelletsdiet med sterilt dricksvatten redo att användas och ge dem mjukt strö.

2. Gruppering av djur

  1. Dela slumpmässigt upp 48 SD-råttor i sex grupper (n = 8 per grupp): sham-gruppen, CCI-gruppen, CCI+FSN-gruppen, CCI+TENS-gruppen, FSN-gruppen ensam och TENS-gruppen som i den tidigare studien utförd av Chan et al.24.
    OBS: Detaljerna för sex grupper: (1) Skengrupp: ingen operation och ingen behandling; (2) CCI-grupp: förberedd för operation utan behandling; (3) CCI+FSN-behandlingsgrupp: FSN-behandling efter framgångsrik CCI-modellering; (4) CCI+TENS-behandlingsgrupp: TENS-behandling efter framgångsrik CCI-modellering; (5) Gruppen med enbart FSN-behandling: endast FSN-behandling utan kirurgi. (6) Gruppen med enbart TENS-behandling: endast TENS-behandling utan kirurgi.

3. Inrättande av en modell för CCI-råttor

OBS: CCI-kirurgimodellen på råttor modifierades enligt Bennett och Xie som genomfördes 198825.

  1. Se till att operatören bär en kirurgisk mask, engångsmössa och sterila handskar.
  2. Desinficera operationsbordets yta med 70 % etanol. Sterilisera instrument (t.ex. saxar, pincetter och upprullningsdon), gasbinda, häftklamrar och bomullspinnar genom autoklavering.
    OBS: Aseptiska tekniker används under hela det kirurgiska ingreppet.
  3. Bedöva råttorna med 4 % isofluran efter standardförberedelse av huden (rakning) och underhåll råttorna med 2 % isofluran (Figur 2A).
    1. Bekräfta lämpligt anestesidjup genom att observera bristen på svar efter att ha nypt baktassen och övervaka de sövda råttorna under hela proceduren.
    2. Applicera tillräckligt med veterinär oftalmisk salva över ögonen för att skydda mot uttorkning.
  4. Placera råttan i bukläge på operationsbordet och raka håret på sidan av höger bakben, desinficera sedan huden med povidon-jodlösning och 75 % etanol tre gånger. Ge termiskt stöd under hela ingreppet och använd sterila draperier för att täcka operationsområdet.
    1. Gör ett parallellt snitt i huden 3-4 mm under lårbenet på ca 20-50 mm.
    2. Prioritera identifieringen av positionerna för gluteus maximus och biceps femoris. Separera det subkutana fettet och den ytliga fascian lager för lager med hjälp av en kirurgisk sax och skär genom den omgivande bindväven för att exponera muskeln (Figur 2B).
      OBS: För att särskilja de subkutana fett- och ytliga fasciaskikten, observera strukturen och färgen. Det subkutana fettlagret ska vara mjukt och smidigt med ett gulaktigt eller vitaktigt utseende. Den ytliga fascian är ett tunt fibröst skikt som ligger direkt under det subkutana fettet. Skilj mellan lagren genom att försiktigt palpera eller sondera med ett trubbigt instrument, notera att det subkutana fettet ger mer motståndskraft mot tryck jämfört med den ytliga fascian.
  5. Använd en trubbig sax för att klippa bindväven mellan den ytliga gluteus- och biceps femoris-musklerna.
    1. Vidga gapet mellan dessa två muskler med hjälp av en retraktor för att exponera ischiasnerven (Figur 2C).
      OBS: För att visuellt identifiera ischiasnerven hos en råtta, fokusera på lårregionen. Lokalisera mittpunkten i lårregionen för att visualisera ischiasnerven. Vanligtvis löper nerven längs den bakre delen av låret, med början från höftregionen och sträcker sig mot knäet.
    2. Utan att ändra nervmorfologin, plocka ischiasnerven med en mikronål genom en bra ljuskälla. Ligata ischiasnerven två gånger med 3-0 kroma tarmligaturer, placera ligaturpunkterna cirka 1 mm från varandra mellan de två suturerna.
    3. Börja med en lös ögla för varje ligatur, ta tag i ändarna av ligaturen nära öglan och dra åt tills öglan sitter precis tätt, se till att ligaturen inte glider längs nerven. Sluta när lätta ryckningar i extremiteten observeras under ligering (Figur 2D).
  6. Stäng muskeln och huden lager för lager med 4-0 suturlinjer. Desinficera slutligen såret med jod (Figur 2E).
  7. Övervaka råttornas vitala tecken noga under anestesi och placera dem i individuella återhämtningsburar tills de är vakna innan du placerar tillbaka dem i sina burar. Klä burarna med platt pappersströ för att förhindra kvävning hos medvetslösa djur. En kort ryckning i den postoperativa extremiteten indikerar en lyckad operation (Figur 2F).
  8. Utför smärtöverkänslighetstest flera gånger före CCI (baslinje) och vid olika tidpunkter efter CCI.
  9. Observera spontan smärta och beteendeförändringar på dag 1, 3, 5 och 7 efter modellkonstruktion.
    OBS: Observera gången och hållningen av höger bakben och förekomsten av slickande och bitande på lemmen.
    1. Identifiera förekomsten av neuropatisk smärta för att fastställa den framgångsrika etableringen av modellen och utesluta misslyckade råttor.
      OBS: Bedöm modellens framgång genom att observera tecken som svaghet i att gå i nedre extremiteter, tår i höger extremitet som hålls ihop med mild valgus, frekvent dinglande och ovilja att landa. Observera att råttan står med vänster bakben som stöd för vikten, medan höger bakben är upphöjt och nära buken.

4. Administrering av FSN-manipulation

  1. Fixera råttan i FSN-behandlingsgruppen (inklusive CCI+FSN- och FSN-gruppen) i gnagarfasthållningsanordningen med den drabbade extremiteten exponerad i sidled. Ge termiskt stöd under hela proceduren. Båda grupperna behandlades med FSN engångsnålar (Figur 3A).
  2. Utan bedövning förlängs råttans bakben gradvis och långsamt tills de sträcks ut (Figur 3B).
    OBS: Råtthuvudet är täckt med ett kirurgiskt draperi för att hålla djuret lugnt och stabilt. Sträck inte ut benet för mycket för att skada råttan. Observera råttans reaktion noga för att se om det finns några tecken på ångest eller obehag. Om råttan visar tecken på smärta eller obehag, stoppa förlängningen och ge en paus innan du försöker igen.
  3. Ta bort skyddshylsan på FSN-nålen.
    1. För in spetsen på FSN-nålen mot TM (muskler med MTrP), ungefär nära gluteus maximus-muskeln, som ligger på nedre delen av ryggen och baksidan.
  4. Placera FSN-nålen plant och gå in i huden i en vinkel på cirka 15°.
    1. Tryck den försiktigt och snabbt genom huden och in i det subkutana utrymmet för att förhindra stress hos råttan tills den är helt införd. Se till att nålen är tillräckligt insatt för att helt begrava den mjuka slangen under huden.
    2. När du trycker framåt, höj nålspetsen något för att observera om hudutbuktningen rör sig längs nålspetsen (Figur 3C).
  5. Utför den svängande rörelsen genom att smidigt och mjukt fläkta FSN-nålspetsen med tummen som stödpunkt samtidigt som du håller pekfingret, långfingret och ringfingret i linje i en rak linje.
    1. Håll FSN-nålen mellan långfingret och tummen i en vänd position och alternera rörelsen fram och tillbaka med pekfingret och ringfingret.
    2. Ställ in frekvensen på 100 slag per minut och utför operationen i cirka 1 minut (Figur 3D).
  6. När du har slutfört manipulationen, dra snabbt ut FSN-nålen.
    OBS: Åtgärden utfördes varannan dag under totalt fyra sessioner (dag 1, 3, 5 och 7 efter att CCI-modellen skapades). FSN-nålar för engångsbruk måste användas en gång. Upprepad användning kommer att göra nålen trubbig och orsaka ökad smärta hos råttor.

5. Administrering av TENS-manipulation

  1. Fixera råttan i TENS-behandlingsgruppen (inklusive CCI+TENS- och TENS-gruppen) i gnagarfasthållningsanordningen med den drabbade extremiteten exponerad i sidled. Ge termiskt stöd under hela proceduren. Se till att pälsen är rakad innan den behandlas.
    OBS: Elektroderna kapades till 45 mm (längd) gånger 5 mm (bredd) (Figur 4A).
  2. Välj Zusanli-punkt (ST36) och Sanyinjiao-punkt (SP6) som platser för TENS. Detta är baserat på teorin för behandling av neuropatisk smärta 26,27.
    1. Lokalisera Zusanli-punkten (ST36) cirka 5 mm lateralt om den främre tuberkeln på skenbenet mellan skenbenet och vadbenet strax under knä28.
    2. Lokalisera Sanyinjiao-punkten (SP6) vid skenbenets bakre gräns, 3 mm proximalt om den mediala fotknölen28.
      OBS: Båda dessa två akupunkturpunkter lokaliseras genom manuell inspektion enligt beskrivningen av Stux och Pomeranz och i djurakupunkturatlasen28,29 (Figur 4B).
  3. Leverera en lågfrekvent elektrisk stimulering (2 Hz kontinuerlig sinusvåg, 3 mA) i 10 minuter med TENS-enheten med elektroden applicerad på benet runt nerven. Täck råtthuvudets huvud med ett kirurgiskt draperi för att hålla det lugnt och stabilt.
    OBS: Denna procedur utförs varannan dag under totalt fyra sessioner (dag 1, 3, 5 och 7 efter att CCI-modellen skapades).

6. Fysiologiska mätningar som utför djurets beteendetest

OBS: Ischiasfunktionsindex (SFI)30 är ett allmänt använt index av forskare som studerar patologi och potentiell behandling av nervskador, som bestäms genom att jämföra geometrin hos den drabbade baktassen hos skadade råttor med den kontralaterala tassen och jämföra den med den motsatta tassen.

  1. Designa råttgångar med genomskinligt plexiglas och lutande speglar för att fånga råttornas fotavtryck och kroppsorientering under promenaden.
    OBS: Gångvägen är en plattform som är 10 cm lång, 50 cm bred och 15 cm hög med ett vitt pappersfoder i botten (Figur 5A).
  2. Placera råttorna försiktigt och fritt i lådan och låt dem acklimatisera sig till sin nya miljö i minst 5 minuter innan inspelning.
    OBS: Särskild försiktighet iakttas för att minimera onödig stress på djuret för att undvika dess eventuella effekt på postural muskelspänning.
  3. Doppa råttans tassar i rött bläck och låt råttan gå längs gångvägsremsan och lämna spår på underlagspappret. Spela in minst 2 s kontinuerlig gång för varje test. Låt råttan gå minst 3 gånger i en riktning (Figur 5B).
    OBS: Applicera snabbtorkande, giftfritt, vattenlösligt rött bläck på båda bakfötterna för att göra bakfotspåren tydligt synliga.
  4. I slutet av experimentet, torka gångvägsremsorna för att mäta parametrarna. Mät deras fotavtryck med en linjal och avrunda till närmaste 0,5 mm.
    OBS: Tre tydliga fotavtryck från varje råtta valdes ut från flera fotavtryck och tre olika parametrar mättes. Faktorer för SFI inkluderar utskriftslängd (PL), tåspridning (TS) och mellanliggande tåspridning (ITS).
    SFI-värden beräknas med hjälp av följande formel31:
    Equation 1
    (EPL, experimentell utskriftslängd; NPL, normal utskriftslängd; ETS, experimentell tåspridning; NTS, normal tåspridning; EIT, experimentell mellanliggande tåspridning; NIT, mellanliggande tåspridning.)
    SFI = 0 och - 100 indikerar normal och fullständig dysfunktion. Råttor som släpade tårna tilldelades godtyckligt ett värde på -100. För normal neurologisk funktion pendlar SFI runt 0, medan runt -100 SFI representerar fullständig dysfunktion32.

7. Neurofysiologisk bedömning genom elektrofysiologisk mätning33

OBS: Elektromyografi användes för att registrera den elektrofysiologiska aktiviteten i denna studie. Den sammansatta muskelaktionspotentialen (CMAP) orsakas av aktiveringen av muskelfibrer i målmuskeln som försörjs av nerven. CMAP-amplitud och latens undersöks. CMAP-amplituden mäts från baslinjen till den negativa toppen. Latensen för CMAP bestäms genom att mäta tiden mellan appliceringen av stimulus och uppkomsten av den sammansatta aktionspotentialen, som påverkas av avståndet mellan stimuleringsstället och inspelningsstället. Elektrofysiologi ger en objektiv bedömning av perifer nervfunktion hos råttor.

  1. Administrera Zoletil 50 (40 mg/kg, ip) för att bedöva råttorna. Förbered huden enligt standardprotokoll (rakning).
  2. Placera självhäftande ytelektroder för engångsbruk (20 mm ytterdiameter) på de avsedda områdena. Fäst registreringselektroderna på gastrocnemiusmuskelns laterala och dorsala ytor (Figur 6A).
  3. Applicera elektrisk stimulering (intensitet 1,2 mA) på den högra proximala ischiasnervstammen. Registrera en sammansatt muskelaktionspotential (CMAP) på magen på gastrocnemiusmuskeln (Figur 6B).
    OBS: Var försiktig när du sätter in elektroderna för att undvika muskelvävnaden.
  4. Anteckna effekten av tre upprepade mätningar för varje råtta.
    OBS: CMAP uttrycks som medelvärdet ± SD för varje grupp. Signalen förstärktes av en filtrerad förstärkare (0,3-3 kHz). Efter integreringen (tidskonstant = 0,05 s) matas både originalsignalen och den integrerade signalen in. Den ursprungliga signalen och den integrerade signalen digitaliseras sedan i PowerLab-systemet och lagras på datorns hårddisk.
  5. Efter att ha slutfört elektrofysiologiprocedurerna, flytta råttan till en annan bur och övervaka den tills den återfår tillräckligt med medvetande för att behålla en sternal liggande position. När råttan har återhämtat sig helt från bedövningsmedlet, överför den tillbaka till sin ursprungliga bur.

8. Statistik:

  1. Utvärdera skillnader i SFI och CMAP mellan grupper med hjälp av variansanalys med upprepade mått (ANOVA).
  2. Kvantifiera data med hjälp av assistenter som är blinda för de experimentella förhållandena. Uttryck data som medelvärde ± standardavvikelse.
  3. Jämför data, när det är lämpligt, med hjälp av Students tvåsidiga parade och oparade t-test. Fastställ statistisk signifikans som p < 0,05.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Fotavtryck och bestämning av SFI
Vi undersökte utvecklingen av SFI enbart i grupperna CCI, CCI+FSN och CCI+TENS (figur 7). Efter 4 sessioner med FSN- och TENS-behandlingar på dag 7 för CCI-kirurgi förbättrades SFI i CCI+FSN-gruppen (-15,85 ± 3,46) och CCI+TENS (-29,58 ± 9,19) signifikant jämfört med CCI-gruppen (-87,40 ± 14,22). Förbättringen var signifikant i gruppen CCI+FSN jämfört med gruppen CCI+TENS (figur 7A).

Vi undersökte också SFI i grupperna sham (0,02 ± 0,52), enbart FSN (0,06 ± 1,75) och enbart TENS (-2,36 ± 1,22). Resultaten visade att ingen av de två sistnämnda grupperna och skengruppen hade någon signifikant skillnad från varandra (Figur 7B). Detta indikerar att FSN och TENS är säkra behandlingar som inte orsakar någon skada på råttor i deras friska tillstånd (tabell 1).

Elektrofysiologisk respons
Vi undersökte utvecklingen av amplituden av CMAP i behandlingsgrupperna med enbart CCI, CCI+FSN och CCI+TENS (figur 8). Amplituden för CMAP i grupperna CCI+FSN (5,01 mV ± 0,67 mV) och CCI+TENS (4,64 mV ± 1,96 mV) förbättrades signifikant jämfört med gruppen med enbart CCI (1,80 mV ± 0,34 mV) (tabell 2). Grupperna CCI+FSN och CCI+TENS uppvisade ingen signifikant skillnad (figur 8A).

Vi undersökte också utvecklingen av latenstoppar för CMAP i enbart CCI-, CCI+FSN- och CCI+TENS-grupperna. Latenstopparna för CMAP i grupperna CCI+FSN (2,46 ms ± 0,72 ms) och CCI+TENS (2,26 ms ± 0,97 ms) förbättrades signifikant jämfört med gruppen med enbart CCI (1,23 ms ± 0,22 ms) (tabell 3). Grupperna CCI+FSN och CCI+TENS uppvisade ingen signifikant skillnad (figur 8C).

CMAP-amplituden och latensen undersöktes i sham-grupperna (5,80 mV ±0,53 mV; 2,35 ms ± 0,37 ms), enbart FSN (5,70 mV ± 0,45 mV; 2,64 ms ± 0,41 ms) och enbart TENS (5,54 mV ± 0,92 mV; 2,61 ms ± 0,20 ms) grupper, ingen signifikant skillnad mellan någon av dem noterades. Detta tyder på att FSN och TENS båda är säkra behandlingar och inte skadar råttor i deras friska tillstånd (Figur 8B,D).

Figure 1
Figur 1: Schematisk bild av tidslinjen för fastställande av CCI-råttmodellen. Smärttrösklar mäts från första dagen efter modellering (-7 dagar) och därefter varannan dag (-5, -3, -1 dag). Smärttrösklar uppmätta dag 1 indikerar framgångsrik modellering. Efter modellering påbörjas intervention och elektrofysiologiska mätningar dag 1. CCI+FSN, CCI+TENS, FSN ensamt och TENS ensamma grupper behandlades med FSN eller TENS vid fasta tidpunkter dag 1, 3, 5 respektive 7. Råttorna avlivades dag 7 efter elektrofysiologiska och fysiologiska mätningar. Förkortningar: FSN: Fus subkutana nålning; TENS: transkutan elektrisk nervstimulering; CCI: kronisk förträngningsskada; SFI: ischiasfunktionsindex. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 2
Figur 2: Kronisk sammandragningsskada (CCI) för att inducera neuropatisk smärta i ischiasnerven hos råttor. (A) Efter positionering och desinfektion rakas råttans högra bakben. Ett parallellt snitt görs i huden 3-4 mm ovanför lårbenet. (B) Platsen går in försiktigt medan du spänner muskeln, separerar muskelfibrerna och sedan tar bort dem i lager utan att stänga dem helt. Bindväven mellan den ytliga gluteus- och biceps femoris-muskulaturen snittas och fascian separeras lager för lager. (C) Snittet förblir öppet och exponerar den högra laterala ischiasnerven. (D) Ligaturen knyts runt ischiasnerven med hjälp av en 3-0 kromsutur, vilket säkerställer att ligaturen är säkrad på plats och inte glider längs nerven och begränsar blodflödet till nervens yttre membran. (E) Muskellagret och huden försluts med suturer. (F) En kort ryckning i den postoperativa extremiteten (de röda cirklarna indikerar ischiasnervens terminalgren) indikerar en lyckad operation. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 3
Figur 3: Manipulera Fus subkutana nålning (FSN). (A) Fixera råttan i gnagarfasthållningen med bakbenen exponerade, undvik ansträngning (B) FSN-nålen förs in mot den spända muskeln, ungefär nära gluteus maximus-muskeln. (C) Nålen förs in i huden med nålspetsen placerad ungefär 15° mot huden. (D) Svajande rörelse (svart solfjäder) av Fu subkutan nålning. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 4
Figur 4: Placering och fixering av elektroderna på råttans hudyta för applicering av transkutan elektrisk nervstimulering (TENS). A) Elektroder, skurna till 45 mm (längd) och 5 mm (bredd), placerade på råttan. (B) Placering av ST 36 och SP6 akupunkter. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 5
Figur 5: Registrering av fotspår på gångbanan. (A) Gångvägen för fysiologiska mätningar med utvärdering av ischiasfunktionellt index (SFI). (B) Registrerade fotspår den 7:e dagen postoperativt. Skillnader i flera djurtassmätningar kan skilja mellan tassarna i grupperna sham, CCI, CCI+FSN, CCI+TENS, FSN ensam och TENS ensamma. Mått som inter-toe (IT, det tvärgående avståndet mellan den andra tån till den fjärde tån), tåspridning (TS, det tvärgående avståndet mellan den första till den femte tån) och tasslängd (PL) används för att beräkna värden som SFI. Förkortningar: FSN: Fus subkutana nålning; TENS: transkutan elektrisk nervstimulering; CCI: kronisk förträngningsskada. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 6
Figur 6: Variation i digital nervaktivitet som en funktion av stimulusintensitet och distala mätningar av inspelningsställen hos råttor via elektrofysiologi. A) Elektrofysiologiska mätningar för registrering av sammansatta muskelaktionspotentialer (CMAP). Registrerings- och referenselektroderna (blå fläck) placeras på de laterala respektive mediala gastrocnemiusmusklerna, och elektrisk stimulering appliceras på den proximala änden av den högra ischiasnervstammen under anestesi inducerad och bibehållen med Zoletil. (B) Representativa CMAP-tracings sham, CCI, CCI+FSN, CCI+TENS, FSN ensamt och TENS ensamma grupper efter 4 behandlingar (före avlivning av djuret). För att beräkna baslinje-till-topp (BP) och topp-till-topp (P-P) sammansatta muskelaktionspotential (CMAP) amplituder, mäts vågformen från baslinjen (I) till den negativa toppen (II) respektive från den negativa toppen (II) till den positiva toppen (III). X-axeln representerar tid (ms) och Y-axeln representerar spänning (mV). Känslighet: 1 mV; Varaktighet: 2 ms, 1 ms per bildruta. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 7
Figur 7: Ischiasfunktionellt index (SFI) för varje grupp. A) Jämförelse av SFI mellan grupperna CCI, CCI+FSN och CCI+TENS (* p < 0,05). (B) Jämförelse av SFI mellan grupperna med enbart bluff, FSN och enbart TENS. Förkortningar: FSN: Fus subkutana nålning; TENS: transkutan elektrisk nervstimulering; CCI: kronisk förträngningsskada; SFI: ischiasfunktionsindex. Klicka här för att se en större version av denna figur.

Figure 8
Figur 8: Elektrofysiologiska fynd för varje grupp. (A) Amplitud för CMAP, jämförelse mellan CCI-, CCI+FSN- och CCI+TENS-grupperna (* p < 0,05). (B) Amplitud av CMAP, jämförelse mellan enbart Sham, FSN och TENS-grupper. (C) Latenstoppar för CMAP, jämförelse mellan CCI-, CCI+FSN- och CCI+TENS-grupperna (* p < 0,05). (D) Latenstoppar för CMAP, jämförelse mellan enbart Sham, FSN och enbart TENS-grupper. Förkortningar: FSN: Fus subkutana nålning; TENS: transkutan elektrisk nervstimulering; CCI: kronisk förträngningsskada; CMAP: sammansatt muskelaktionspotential. Klicka här för att se en större version av denna figur.

N Betyda SD
Bluff 8 0.02 0.52
CCI 8 -87.40 14.22
CCI+FSN 8 -15.85 3.46
Den kulturella och kreativa sektorn + de transeuropeiska näten 8 -29.58 9.19
FSN (FSN) 8 0.06 1.75
TIO 8 -2.36 1.22
FSN: Fus subkutana nålning;
TENS: transkutan elektrisk nervstimulering;
CCI: kronisk förträngningsskada.

Tabell 1: Sammanfattning av värden för ischiasindex hos råtta.

N Medelvärde (mV) SD
Bluff 8 5.80 0.53
CCI 8 1.80 0.34
CCI+FSN 8 5.01 0.67
Den kulturella och kreativa sektorn + de transeuropeiska näten 8 4.64 1.96
FSN (FSN) 8 5.70 0.45
TIO 8 5.54 0.92
FSN: Fus subkutana nålning;
TENS: transkutan elektrisk nervstimulering;
CCI: kronisk förträngningsskada;
CMAP: sammansatt muskelaktionspotential.

Tabell 2: Sammanfattning av värden för det elektrofysiologiska svaret på CMAP-amplitud hos råttor.

N Medelvärde (ms) SD
Bluff 8 2.35 0.37
CCI 8 1.23 0.22
CCI+FSN 8 2.46 0.72
Den kulturella och kreativa sektorn + de transeuropeiska näten 8 2.26 0.97
FSN (FSN) 8 2.64 0.41
TIO 8 2.61 0.20
FSN: Fus subkutana nålning;
TENS: transkutan elektrisk nervstimulering;
CCI: kronisk förträngningsskada.

Tabell 3: Sammanfattning av värden för den elektrofysiologiska responsen på latenstoppar hos råtta.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Denna studie observerar effekten av FSN-behandling på neuropatisk smärta i CCI-modeller på råtta. Denna studie presenterar ett protokoll för SFI och elektrofysiologisk testning för att utvärdera de terapeutiska effekterna efter FSN- eller TENS-behandling. Dessutom illustrerar den hur man utvärderar den funktionella återhämtningen av den skadade nerven med hjälp av icke-invasiva beteendetester och fysiologiska mätningar. Resultaten visade att FSN-behandlingen efter CCI-inducerad ischiasnervsmärta visade signifikant bättre förbättring i alla prognostiska indikatorer än TENS-behandlingen. Denna forskning har stor potential för framtida tillämpningar i djurstudier med fokus på FSN-terapi för att överbrygga gapet mellan grundforskning och klinisk tillämpning. Denna studie kommer att förbättra patientresultaten genom att bättre förstå sjukdomsmekanismerna

Akupunktur har använts i Kina i mer än 3000 år och anses ofta vara en säker och effektiv metod för att lindra smärta hos människor och försöksdjur34,35. Tidigare kliniska studier har bekräftat att akupunktur kan lindra smärtbeteende i CCI-modeller36. FSN, som en akupunkturteknik utvecklad från traditionell kinesisk akupunktur37, används ofta för att behandla många smärtrelaterade muskuloskeletala sjukdomar38,39. Trots dess tillfredsställande effekt vid smärtsamma muskuloskeletala sjukdomar är den underliggande mekanismen för FSN-behandling fortfarande oklar. Svårigheterna med att utföra akupunkturexperiment på djur, inklusive komplexiteten och svårigheten att kvantifiera traditionella akupunkturtekniker och djurets obekväma hållning, kan leda till rädsla och motstånd mot akupunktur, vilket gör korrekt akupunkturteknik och punktpositionering svårare, vilket ökar risken för skador och påverkar experimentella data40. Nyare forskning i djurstudier har belyst mekanismerna bakom akupunktursmärtlindring; Akupunkturinducerad smärtlindring är förknippad med frisättning av endogena opioidpeptider41. Smärtuppfattningen moduleras dock inte enbart under överföringen av smärtsignaler från periferin till hjärnbarken, vilket tyder på att andra faktorer och mekanismer också kan påverka upplevelsen av smärta.

Baserat på hypotesen som presenterades av Simons et al.42,43 spelar MTrP-bildning en nyckelroll i smärtkänslan. Patogenesen för triggerpunktsbildning tros vara relaterad till onormal motorisk ändplatta i muskeln. Överdriven frisättning av acetylkolin leder till onormala potentialer i ändplattan och bildning av bandage, vilket kan leda till ihållande muskelspasmer som resulterar i lokal ischemi och hypoxi som leder till hyperalgesi och onormal smärta44,45. En djurmodell för MTrP-studien på kaniner med torra nålar fastställd av Hong46 visar att dry needling kan modulera proximala MTrPs i muskel och ryggmärg. I detta experiment diskuterades dock endast sambandet mellan akupunktur och muskler, och färre djurförsök utfördes i samband med nervskador. FSN är inte samma sak som traditionell akupunktur eller dry needling när det gäller teknik och teoretisk grund. FSN-behandling fungerar inte direkt på den skadade nerven men är kliniskt effektiv 47,48. Det visade sig att vid många kliniska neurologiska sjukdomar kan det största problemet ligga på muskeln snarare än själva nerven. I denna studie, genom att införliva en nervskademodell med CCI och behandla musklerna runt ischiasnerven med FSN, visade FSN-terapi en signifikant minskning av neuropatisk smärta och främjade återhämtning av den skadade nerven och muskeln.

Ett ytterligare fokus för detta experiment är fördelarna med FSN-behandling utan anestesi. En tidigare studie har visat att akupunkturexperiment på råttor utan bedövning kan förändra fysiologiska parametrar som hjärtfrekvens, blodtryck och hormonnivåer på grund av immobiliseringsstress49. Vissa forskare har dock hävdat att fördelarna med att utföra akupunkturexperiment utan bedövning överväger de potentiella effekterna av immobiliseringsstress, till och med motverka effekterna av immobiliseringsstress50. På grund av gnagarnas ringa storlek och deras olika känslighet för bedövningsmedel och smärtstillande medel, förutom den medvetslöshet som orsakas av generell anestesi, kan djur inte uppfatta smärta. Men hos medvetslösa djur överförs och bearbetas smärtsamma stimuli fortfarande genom det centrala nervsystemet51. Förutom att gnagardjur är små och att de är olika känsliga för bedövningsmedel och smärtstillande medel, överförs och bearbetas smärtsamma stimuli fortfarande genom det centrala nervsystemet hos medvetslösa djur. Användning av μ- och δ-opioidreceptorantagonister hos djur som behandlas under anestesi kan till och med leda till att effekten av akupunkturupphävs.

Vi valde TENS som kontrollgrupp för denna studie. TENS är en smärtlindrande behandling som utnyttjar lågfrekventa pulserande elektriska strömmar som överförs genom huden via elektroder utan användning av läkemedel53. Det observerades att lågfrekvent TENS var effektivare än högfrekvent TENS när det gällde att öka vaskulär respons och kan vara en potentiell behandling för neuropatisk smärta orsakad av CCI54. Akupunktur är effektivt för tillstånd som neuropatisk smärta. Resultaten kan dock variera avsevärt beroende på vilken akupunkturpunkt som väljs55, medan TENS minskar nociceptiv överkänslighet genom att aktivera centrala hämmande vägar med låg variabilitet i valet av olika platser56.

Även om resultaten av denna studie är uppmuntrande, bör vissa studiebegränsningar noteras. Enligt Dr. Fus vägledning bör en komplett FSN-behandlingsmetod inkludera svajande rörelse (passiv behandling) och reperfusionstekniken (aktiv behandling). Detta experiment har dock bara en svajande rörelse; Att utforma ett bättre djurförsök i framtiden är nödvändigt. Tidigare standardiserade studier har visat att bedömningen av djurmodeller av nervkompression kräver integration av flera indikatorer inklusive beteendeanalys, elektromyografi, immunhistokemi och morfologisk utvärdering57. I vår studie använde vi främst beteendeanalys och elektromyografi för att utvärdera effekten av FSN-terapi. Men på grund av den potentiella betydelsen av immunhistokemi och morfologisk utvärdering i detta sammanhang, inser vi behovet av att prioritera dessa komponenter i framtida uppföljningsstudier för att bättre validera effektiviteten av FSN-terapi för att förbättra denna typ av sjukdom.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna konstaterar att det inte finns några konkurrerande intressekonflikter.

Acknowledgments

Denna studie stöddes av ett bidrag från djurcentret vid Chang Bing Show Chwan Memorial Hospital, Changhua, Taiwan. Författarna vill tacka Show Chwan Memorial Hospital IRCAD TAIWAN för deras ovärderliga stöd och hjälp under hela detta forskningsprojekt.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Forceps World Precision Instruments 14098
Fu’s subcutaneous needling Nanjing Paifu Medical Science and Technology Co.  FSN needles are designed for single use. The FSN needle is made up of three parts: a solid steel needle core (bottom), a soft casing pipe (middle), and a protecting sheath (top).
Medelec Synergy electromyography Oxford Instrument Medical Ltd. 034W003  Electromyogram (EMG) are used to help in the diagnosis and management of disorders such as neuropathies. Contains a portable two-channel electromyography/nerve conduction velocity system.
Normal saline (0.9%) 20 mL Taiwan Biotech Co.,Ltd. 4711916010323 Lot: 1TKB2022
POLYSORB 4-0 VIOLET 30" CV-25 UNITED STATES SURGICAL, A DIVISION OF TYCO HEALTHC GL-181
Retractor COOPERSURGICAL, INC.(USA) 3311-8G
Rompun Elanco Animal Health Korea Co. Ltd. 27668
SCISSORS CVD 90MM BBRUAN XG-LBB-BC101R
Transcutaneous Electrical Nerve Stimulation Well-Life Healthcare Co. Model Number 2205A Digital unit which offers TENS. Supplied complete with patient leads, self-adhesive electrodes, 3 AAA batteries and instructions in a soft carry bag. Interval ON time 1–30 s. Interval OFF time 1–30 s.
Zoletil  VIRRBAC 8V8HA

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. van Hecke, O., Austin, S. K., Khan, R. A., Smith, B. H., Torrance, N. Neuropathic pain in the general population: a systematic review of epidemiological studies. Pain. 155 (4), 654-662 (2014).
  2. Younes, M., et al. Prevalence and risk factors of disk-related sciatica in an urban population in Tunisia. Joint Bone Spine. 73 (5), 538-542 (2006).
  3. Woolf, C. J., Mannion, R. J. Neuropathic pain: aetiology, symptoms, mechanisms, and management. Lancet. 353 (9168), 1959-1964 (1999).
  4. Baron, R., et al. Neuropathic low back pain in clinical practice. European Journal of Pain. 20 (6), 861-873 (2016).
  5. Ma, X., et al. Potential mechanisms of acupuncture for neuropathic pain based on somatosensory system. Frontiers in Neuroscience. 16, 940343 (2022).
  6. Jang, J. H., et al. Acupuncture alleviates chronic pain and comorbid conditions in a mouse model of neuropathic pain: the involvement of DNA methylation in the prefrontal cortex. Pain. 162 (2), 514-530 (2021).
  7. He, K., et al. Effects of acupuncture on neuropathic pain induced by spinal cord injury: A systematic review and meta-analysis. Evidence Based Complement and Alternative Medicine. 2022, 6297484 (2022).
  8. Fu, Z., Lu, D. Fu's Subcutaneous Needling: A Novel Therapeutic Proposal. Acupuncture - Resolving Old Controversies and Pointing New Pathways. IntechOpen. , (2019).
  9. Fu, Z. H. The Foundation of Fu's Subcutaneous Needling. , People's Medical Publishing House, Co, Ltd. China. (2016).
  10. Fu, Z. H., Chou, L. W. Fu's Subcutaneous Needling, Trigger Point Dry Needling: An Evidence and Clinical-Based Approach. 2nd Edition. , Elsevier Health Sciences. Chapter 16 255-274 (2018).
  11. Fu, Z., Shepher, R. Fu's Subcutaneous Needling, a Modern Style of Ancient Acupuncture? Acupuncture in Modern Medicine. IntechOpen. , (2013).
  12. Chiu, P. E., et al. Efficacy of Fu's subcutaneous needling in treating soft tissue pain of knee osteoarthritis: A randomized clinical trial. Journal of Clinical Medicine. 11 (23), 7184 (2022).
  13. Huang, C. H., Lin, C. Y., Sun, M. F., Fu, Z., Chou, L. W. Efficacy of Fu's Subcutaneous Needling on Myofascial Trigger Points for Lateral Epicondylalgia: A randomized control trial. Evidence Based Complement and Alternative Medicine. 2022, 5951327 (2022).
  14. Huang, C. H. Rapid improvement in neck disability, mobility, and sleep quality with chronic neck pain treated by Fu's subcutaneous needling: A randomized control study. Pain Research and Management. 2022, 7592873 (2022).
  15. Chou, L. W., Hsieh, Y. L., Kuan, T. S., Hong, C. Z. Needling therapy for myofascial pain: recommended technique with multiple rapid needle insertion. Biomedicine (Taipei). 4 (2), 13 (2014).
  16. Ye, L., et al. Depression of mitochondrial function in the rat skeletal muscle model of myofascial pain syndrome is through down-regulation of the AMPK-PGC-1α-SIRT3 axis. Journal of Pain Research. 13, 1747-1756 (2020).
  17. Li, Y., et al. Effects of Fu's subcutaneous needling on mitochondrial structure and function in rats with sciatica. Molecular Pain. 18, 17448069221108717 (2022).
  18. Perreault, T., Fernández-de-Las-Peñas, C., Cummings, M., Gendron, B. C. Needling interventions for sciatica: Choosing methods based on neuropathic pain mechanisms-A scoping review. Journal of Clinical Medicine. 10 (10), 2189 (2021).
  19. Weller, J. L., Comeau, D., Otis, J. A. D. Myofascial pain. Seminars in Neurology. 38 (6), 640-643 (2018).
  20. Grøvle, L., et al. The bothersomeness of sciatica: patients' self-report of paresthesia, weakness and leg pain. European Spine Journal. 19 (2), 263-269 (2010).
  21. Jaggi, A. S., Jain, V., Singh, N. Animal models of neuropathic pain. Fundament Clinical Pharmacology. 25 (1), 1-28 (2011).
  22. Burma, N. E., Leduc-Pessah, H., Fan, C. Y., Trang, T. Animal models of chronic pain: Advances and challenges for clinical translation. Journal of Neuroscience Research. 95 (6), 1242-1256 (2017).
  23. McCann, M. E., Soriano, S. G. Does general anesthesia affect neurodevelopment in infants and children. British Medical Journal. 367, 6459 (2019).
  24. Chan, K. Y., et al. Ameliorative potential of hot compress on sciatic nerve pain in chronic constriction injury-induced rat model. Frontiers in Synaptic Neuroscience. 14, 859278 (2022).
  25. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33 (1), 87-107 (1988).
  26. Somers, D. L., Clemente, F. R. Transcutaneous electrical nerve stimulation for the management of neuropathic pain: The effects of frequency and electrode position on prevention of allodynia in a rat model of complex regional pain syndrome type II. Physical Therapy. 86 (5), 698-709 (2006).
  27. Xing, G., Liu, F., Wan, Y., Yao, L., Han, J. Electroacupuncture of 2 Hz induces long-term depression of synaptic transmission in the spinal dorsal horn in rats with neuropathic pain. Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 35 (5), 453-457 (2003).
  28. Schone, A. M. Veterinary Acupuncture: Ancient Art to Modern Medicine. , American Veterinary Publication. (1999).
  29. Stux, G., Pomeranz, B. Acupuncture: Textbook and Atlas. , Springer-Verlag. Berlin. (1987).
  30. de Medinaceli, L., Freed, W. J., Wyatt, R. J. An index of the functional condition of rat sciatic nerve based on measurements made from walking tracks. Experimental Neurology. 77 (3), 634-643 (1982).
  31. Bain, J. R., Mackinnon, S. E., Hunter, D. A. Functional evaluation of complete sciatic, peroneal, and posterior tibial nerve lesions in the rat. Plastic and Reconstructive Surgery. 83 (1), 129-138 (1989).
  32. Kanaya, F., Firrell, J. C., Breidenbach, W. C. Sciatic function index, nerve conduction tests, muscle contraction, and axon morphometry as indicators of regeneration. Plastic and Reconstructive Surgery. 98 (7), 1264-1271 (1996).
  33. Wild, B. M., et al. In vivo electrophysiological measurement of the rat ulnar nerve with axonal excitability testing. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (132), e56102 (2018).
  34. Wong, J. Y., Rapson, L. M. Acupuncture in the management of pain of musculoskeletal and neurologic origin. Physical Medicine and Rehabilitation Clinics of North America. 10 (3), 531-545 (1999).
  35. Qin, Z., Liu, X., Yao, Q., Zhai, Y., Liu, Z. Acupuncture for treating sciatica: A systematic review protocol. BMJ Open. 5 (4), 007498 (2015).
  36. Zhi, M. J., et al. Application of the chronic constriction injury of the partial sciatic nerve model to assess acupuncture analgesia. Journal of Pain Research. 10, 2271-2280 (2017).
  37. Fu, Z. H., Xu, J. G. A brief introduction to Fu's subcutaneous needling. Pain Clinic. 17, 343-348 (2005).
  38. Peng, J., et al. The effect of Fu's subcutaneous needling combined with reperfusion approach on surface electromyography signals in patients with cervical spondylosis and neck pain: A clinical trial protocol. Biomed Research International. 2022, 1761434 (2022).
  39. Fu, Z. H., Wang, J. H., Sun, J. H., Chen, X. Y., Xu, J. G. Fu's subcutaneous needling: possible clinical evidence of the subcutaneous connective tissue in acupuncture. Journal Alternative and Complementary Medicine. 13 (1), 47-51 (2007).
  40. Harrison, T. M., Churgin, S. M. Acupuncture and traditional Chinese veterinary medicine in zoological and exotic animal medicine: A review and introduction of methods. Veterinary Science. 9 (2), 74 (2022).
  41. Gollub, R. L., Hui, K. K., Stefano, G. B. Acupuncture: pain management coupled to immune stimulation. Zhongguo Yao Li Xue Bao. 20 (9), 769-777 (1999).
  42. Simons, D. G., Travell, J., Simons, L. E. Myofascial Pain and Dysfunction: The Trigger Point Manual. 2nd ed. , Williams and Wilkins. Baltimore, MD. (1999).
  43. Gerwin, R. D., Dommerholt, J., Shah, J. P. An expansion of Simons' integrated hypothesis of trigger point formation. Current Pain and Headache Reports. 8 (6), 468-475 (2004).
  44. Hong, C. Z., Simons, D. G. Pathophysiologic and electrophysiologic mechanisms of myofascial trigger points. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 79 (7), 863-872 (1998).
  45. Fu, Z., et al. Remote subcutaneous needling to suppress the irritability of myofascial trigger spots: an experimental study in rabbits. Evidence Based Complement and Alternative Medicine. 2012, 353916 (2012).
  46. Hsieh, Y. L., Yang, C. C., Liu, S. Y., Chou, L. W., Hong, C. Z. Remote dose-dependent effects of dry needling at distant myofascial trigger spots of rabbit skeletal muscles on reduction of substance P levels of proximal muscle and spinal cords. Biomed Research International. 2014, 982121 (2014).
  47. Ma, K., et al. Peripheral nerve adjustment for postherpetic neuralgia: a randomized, controlled clinical study. Pain Medicine. 14 (12), 1944-1953 (2013).
  48. Gao, Y., Sun, J., Fu, Z., Chiu, P. E., Chou, L. W. Treatment of postsurgical trigeminal neuralgia with Fu's subcutaneous needling therapy resulted in prompt complete relief: Two case reports. Medicine. 102 (9), e33126 (2023).
  49. Lucas, L. R., Wang, C. J., McCall, T. J., McEwen, B. S. Effects of immobilization stress on neurochemical markers in the motivational system of the male rat. Brain Research. 1155, 108-115 (2007).
  50. Yang, C. H., et al. Effect of electroacupuncture on response to immobilization stress. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 72 (4), 847-855 (2002).
  51. Adams, S., Pacharinsak, C. Mouse anesthesia and analgesia. Current Protocols in Mouse Biology. 5 (1), 51-63 (2015).
  52. Cantwell, S. L. Traditional Chinese veterinary medicine: the mechanism and management of acupuncture for chronic pain. Topics in Companion Animal Medicine. 25 (1), 53-58 (2010).
  53. Liebano, R. E., Rakel, B., Vance, C. G. T., Walsh, D. M., Sluka, K. A. An investigation of the development of analgesic tolerance to TENS in humans. Pain. 152 (2), 335-342 (2011).
  54. Khalil, Z., Merhi, M. Effects of aging on neurogenic vasodilator responses evoked by transcutaneous electrical nerve stimulation: relevance to wound healing. The Journals of Gerontology. Series A, Biological Sciences and Medical Sciences. 55 (6), B257-B263 (2000).
  55. Sato, K. L., Sanada, L. S., Silva, M. D. D., Okubo, R., Sluka, K. A. Transcutaneous electrical nerve stimulation, acupuncture, and spinal cord stimulation on neuropathic, inflammatory and, non-inflammatory pain in rat models. The Korean Journal of Pain. 33 (2), 121-130 (2020).
  56. Maeda, Y., Lisi, T. L., Vance, C. G., Sluka, K. A. Release of GABA and activation of GABA(A) in the spinal cord mediates the effects of TENS in rats. Brain Research. 1136 (1), 43-50 (2007).
  57. Degrugillier, L., et al. A new model of chronic peripheral nerve compression for basic research and pharmaceutical drug testing. Regenerative Medicine. 16 (10), 931-947 (2021).

Tags

Fus subkutana nålning ischiasnervsmärta akupunkturteknik traditionell kinesisk medicin smärtlindring verkningsmekanismer FSN-behandling subkutana vävnader hållningsunderhåll djurmodeller råttor obekväm behandling rädsla och motstånd skaderisk forskningsdata anestesi FSN-terapi på djur modell för kronisk förträngningsskada neuropatisk smärta nervskada kirurgisk sammandragning kompression eller inklämning lämplig manipulation nålinsättning och riktning Nålretention svajande rörelse
Effekten av Fus subkutana nålning på ischiasnervsmärta: Beteendemässiga och elektrofysiologiska förändringar i en råttmodell för kronisk förträngningsskada
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chiu, P. E., Fu, Z., Lai, D. W.,… More

Chiu, P. E., Fu, Z., Lai, D. W., Chou, L. W. Efficacy of Fu's Subcutaneous Needling on Sciatic Nerve Pain: Behavioral and Electrophysiological Changes in a Chronic Constriction Injury Rat Model. J. Vis. Exp. (196), e65406, doi:10.3791/65406 (2023).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter