Single Cell Dissociation av Caenorhabditis elegans: En metode for å isolere levende celler
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Tyskland, E.M., et al. Isolering av spesifikke nevronpopulasjoner fra Roundworm Caenorhabditis elegans. J. Vis. Utt. (2019).
Denne videoen beskriver en metode for å dissosiere hele ormer i en encellet suspensjon egnet for FACS eller immunoprecipitation av intakte celler.
Protocol
Denne protokollen er et utdrag fra Tyskland et al, Isolering av spesifikke nevronpopulasjoner fra Roundworm Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Forberedelse og innsamling av eldre ormer for celleisolasjon MERK: Forklart nedenfor er isolasjonen av kolinerge nevroner fra …
Materials
| Agar, Molecular Biology Grade | VWR | A0930 | |
| CaCl2 | Sigma | C5670 | |
| Contess Automated Cell Counter | Invitrogen | Z359629 | |
| DTT | USBiological | D8070 | |
| FBS | Omega Scientific | FB-02 | |
| Fluorodeoxyuridine | Sigma | F0503 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| KCl | Amresco | O395 | |
| KH2PO4 | USBiological | P5110 | |
| Leibovitz's L-15 Medium | Gibco | 21083027 | |
| MgCl2 | Sigma | M8266 | |
| MgSO4 | USBiological | M2090 | |
| Na2HPO4·7H2O | USBiological | S5199 | |
| NaCl | VWR | X190 | |
| NaOCl (Bleach) | Clorox | ||
| Penicillin-Streptomicen | Fisher Scientific | 15140122 | |
| Pronase E | Sigma | 7433 | protease mixture from Streptomyces griseus |
| SDS | Amresco | O227 | |
| SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope | Tritech Research | ||
| Sucrose | USBiological | S8010 |
Cite This Article
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).