Organ Conditioned Medium: Medium genereren uit geoogste orgaancellen voor gemetastaseerde kankerstudies
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Piaseczny, M.M., et al. Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior. J. Vis. Exp.(2016).
Deze video beschrijft een methode voor het genereren van een orgaangeconditioneerd medium afgeleid van de muizenlever. Dit modelsysteem kan worden gebruikt om orgaan-afgeleide oplosbare factoren en hun effecten op het orgaantropisme en gemetastaseerd gedrag van kankercellen te identificeren en te bestuderen.
Protocol
1. Generatie van long- en hersengeconditioneerde media In een steriele weefselkweekkap, pbs-buizen met long of hersenen drie keer omkeren om restbloed uit organen te verwijderen en PBS met bloed te aspireren. Herhaal dit met verse koude PBS totdat de oplossing helder lijkt zonder bewijs van bloed. Plaats longen en hersenen in aparte 60 mm2 glazen petrischalen. Met behulp van twee steriele scalpelbladen, gehakt longen of hersenen door herhaaldelijk heen en weer te snijden totdat weefse…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 1x Phosphate-buffered saline | ThermoFisher Scientific | 10010-023 | Keep sterile |
| 60 mm2 glass petri dishes | Sigma-Aldrich | CLS7016560 | Keep sterile |
| DMEM:F12 | Life Technologies | 21331-020 | Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile |
| Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml) | Life Technologies | 15140-122 | Keep sterile |
| 50 ml conical tubes | Thermo Scientific (Nunc) | 339652 | Keep sterile |
| 0.22 μm syringe filters | Sigma-Aldrich | Z359904 | Keep sterile |
| 6-well tissue culture plates | Thermo Scientific (Nunc) | 140675 | Keep sterile |
| Scalpel blades | Fisher Scientific | S95937A | Keep sterile |
Cite This Article
Organ Conditioned Medium: Generating Medium from Harvested Organ Cells for Metastatic Cancer Studies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20218, doi: (2023).