Medio acondicionado de órganos: Generación de medios a partir de células de órganos cosechadas para estudios de cáncer metastásico

Abstract

Fuente: Piaseczny, M.M., et al. Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior. J. Vis. Exp.(2016).

Este video describe un método de generación de un medio acondicionado de órgano derivado del hígado del ratón. Este sistema modelo se puede utilizar para identificar y estudiar factores solubles derivados de órganos y sus efectos sobre el tropismo de órganos y el comportamiento metastásico de las células cancerosas.

Protocol

1. Generación de medios condicionados por pulmón y cerebro En una capucha de cultivo de tejido estéril, invierta tubos PBS que contengan pulmón o cerebro tres veces para extraer sangre residual de los órganos y aspirar PBS que contenga sangre. Repita con PBS frío fresco hasta que la solución parezca clara sin evidencia de sangre. Coloque los pulmones y el cerebro en placas de petri de vidrio separadas de 60 mm2. Uso de dos cuchillas estériles del bisturí, pulmones de mince o …

Materials

1x Phosphate-buffered saline	ThermoFisher Scientific	10010-023	Keep sterile
60 mm2 glass petri dishes	Sigma-Aldrich	CLS7016560	Keep sterile
DMEM:F12	Life Technologies	21331-020	Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile
Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml)	Life Technologies	15140-122	Keep sterile
50 ml conical tubes	Thermo Scientific (Nunc)	339652	Keep sterile
0.22 μm syringe filters	Sigma-Aldrich	Z359904	Keep sterile
6-well tissue culture plates	Thermo Scientific (Nunc)	140675	Keep sterile
Scalpel blades	Fisher Scientific	S95937A	Keep sterile