准备脱细胞组织注射基质凝胶注入大鼠心肌的方法<em>在体内</em>描述。
该协议规定编制的注射细胞外基质(ECM)的心肌组织工程中的应用凝胶的方法。简单地说,是冻干脱细胞组织,精,酶消化,然后带来生理pH值。冻干删除所有从组织的含水量,导致干流脑可分为地面用小磨细粉。铣削后,ECM的粉是用胃蛋白酶消化,以形成一种注射矩阵。调整pH至7.4后,液体基质材料可注射到心肌。以往的定性分析的结果表明,脱细胞心包及心肌组织产生的基质凝胶保留原生的ECM成分,包括不同的蛋白质,肽和粘多糖。由于使用这种材料的组织工程,是体内特性特别有用;在这里,左心室壁内注射执行的方法(LV)的游离壁作为分析宿主反应基质凝胶的手段提出一个小动物模型。获得通过膈肌进入胸腔注射略高于在LV游离壁的心尖。生物衍生支架可以可视化和注射前生物素标记,然后与辣根过氧化物酶标记的neutravidin染色的组织切片,并通过二氨基联苯胺(DAB)染色可视化。注射区域的分析,也可以做组织学和免疫组织化学染色。这样,在先前研究的心包和心肌基质凝胶形成纤维,多孔网络和注射区域内促进血管的形成。
这种方法允许代生物衍生,注射用心肌组织工程支架。虽然这些方法最初是为制造和开发在体内试验心肌基质凝胶,并提出与心包基质凝胶中,这种协议可以适应任何组织使用,提供了组织可适当的脱细胞。脱细胞应进行验证使用这些方法之前,基质凝胶中的DNA的存在,可能会造成有害的免疫反应。有多种方式decellularize材料,并有关于这一问题的3,4的书面的几个很好的评价。
The authors have nothing to disclose.
这项研究是由美国国立卫生研究院主任的新的创新奖励计划,美国国立卫生研究院医学研究路线图的一部分,通过授予数量DP2 – 1 – OD004309 – 01,部分支持。 SBS – N。想感谢美国国家科学基金会研究生研究奖学金。