一个小鼠模型在子宫内移植
Summary
在小鼠模型<em>在子宫内</em>移植是一种多用途的工具，可用于胎儿干细胞移植和基因治疗研究的潜在的临床应用。在这个协议中，我们提出了一个执行此技术的一般方法
Abstract
在子宫内移植的干细胞和病毒，用于治疗人类胎儿先天性疾病的巨大潜力。例如， 在子宫内的造血干细胞移植（IUT）已成功地用于治疗重症联合免疫缺陷。1,2在其他几个条件的患者，然而，IUT的已经尝试没有成功。鉴于这些好坏参半的结果，可用性一个有效率的非人性化的模型来研究干细胞移植和基因治疗的生物后遗症，是推进这一领域的关键。我们和其他人使用IUT的研究在野生型小鼠4-7和遗传性疾病的影响因素在宫内移植造血干细胞成功植入小鼠模型。8,9胎儿环境也提供了相当大的优势在子宫内基因治疗的成功。例如，交付10的腺病毒，腺相关病毒，逆转录病毒11和慢病毒载体进入胎儿体内12,13 在子宫内导致在远离注射网站长期的基因表达的多器官的转导。因此，基因疗法可能被视为一个单基因疾病，如肌肉萎缩症或囊性纤维化的可能的治疗策略。 IUT的另一个潜在优势是能够到一个特定的抗原诱导免疫耐受。由于血友病因子IX的宽容早在发展成果引入到这种蛋白质的小鼠 。14
除了其使用在调查潜在的人类疗法，对IUT的小鼠模型可以是一个强大的工具，在发育和干细胞生物学研究的基本问题。例如，一个可以提供各种小分子诱导或抑制特定基因的表达在妊娠阶段的定义和操作的发展途径。这些改动的影响，可以在不同的时间点进行评估后，最初的移植。此外，还有一个可以移植到胎儿的环境，研究在非照射和泰然自若的主机环境中的干细胞分化的多能干或宗族的祖细胞。
在免疫学领域，发育和干细胞生物学内的IUT的小鼠模型已经提供了许多见解。在此视频为基础的协议，我们描述了一个步骤，循序渐进的方式执行IUT的小鼠胎儿，并概述这项技术的关键步骤和潜在的隐患。
Protocol
Discussion
比林汉姆，布伦特和梅达沃在50年前， 在子宫内移植在小鼠体内诱导外源蛋白的免疫耐受。从那时起，16几个变化，这种技术已被用于解决在免疫学和干细胞生物学的问题。
这里详细的协议是IUT的最方便的方法之一。胎肝提供了一个轻松的可视化的目标，并提供通过门户网站和肝静脉全身血液循环的访问。然而，一些已修改，以优化的时间和所需注射的位置。?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们要感谢我们的资金来源：再生医学临床研究员培训资助（AN）的加州理工学院，美国国家科学基金会（兆瓦），艾琳Perstein奖（TCM），美国外科医生学院（中医），美国小儿外科协会（中医），三月优生优育基金会（中医）。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Pipettes | Kimble | 71900-100 | ||
| Pipette puller | Sutter Instruments Company | Model P-30 | ||
| Microinjector | Narishige | IM-300 | ||
| Pipette sharpener | Sutter Instruments Company | Model BV-10 |
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