Solide Plate-basierte diätetische Einschränkung in Caenorhabditis elegans</em
Summary
Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Durchführung von festen Platte für die Ernährung Einschränkung in<em> C. elegans</em> Mit abgetöteten Bakterien.
Abstract
Reduktion der Nahrungsaufnahme, ohne Unterernährung oder Hunger ist bekannt, dass Lebensdauer zu erhöhen und das Einsetzen der verschiedenen altersbedingten Erkrankungen in einer Vielzahl von Arten, darunter Säugetiere. Es führt auch zu einer Abnahme des Körpergewichts und der Fruchtbarkeit sowie niedrigere Plasma-Glukose, Insulin und IGF-1 in dieser Tiere. Diese Behandlung wird oft als diätetische Einschränkung (DR) oder kalorische Restriktion (CR) bezeichnet. Der Fadenwurm Caenorhabditis elegans wurde als ein wichtiger Modellorganismus für die Erforschung der Biologie des Alterns entwickelt. Sowohl Umwelt-und genetischen Manipulationen zu Modell DR verwendet worden und haben gezeigt, dass Lebensdauer in C verlängern elegans. Allerdings sind viele der gemeldeten DR Studien in C. elegans wurden durch die Weitergabe von Tieren in flüssigen Medien, während die meisten genetischen Studien in der alternden Feld auf der Standard-festem Agar in Petrischalen durchgeführt wurden durchgeführt. Hier präsentieren wir Ihnen eine DR-Protokoll unter Verwendung von Standard solide NGM-Agar-Basis-Platte mit abgetöteten Bakterien.
Protocol
Discussion
Diätetische Einschränkung (DR) ist bekannt, dass Lebensdauer zu erhöhen und das Einsetzen der verschiedenen altersbedingten Erkrankungen in einer Vielzahl von Arten, darunter Säugetiere 5-7. Sowohl Umwelt-und genetischen Manipulationen zu Modell DR in C eingesetzt elegans, einschließlich Kultivierung Würmer in einem semi-definierten flüssigen Medium 8,9, Verdünnung der bakteriellen Nahrungsquelle in einem flüssigen Medium 10-12, und die Verwendung von Verhalten…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde von einem Piloten Auszeichnung des Nathan Shock Center (P30 AG13283) und R01 zu gewähren (R01 AG028516) aus dem National Institute on Aging (NIA) auf A.-LH unterstützt
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Carbenicillin | Duchefa Biochemie | C0109.25 | Dissolved in water. |
| Kanamycin | Roche | 10106801001 | Dissolved in water. |
| Bacto-peptone | Becton, Dickinson and company | DF0118072 | |
| Bacto-tryptone | Becton, Dickinson and company | DF0123075 | |
| Bacto-yeast extract | Becton, Dickinson and company | DF0127071 | |
| Agar | Becton, Dickinson and company | DF00145170 | |
| Sterile culture tube | USA Scientific | 1485-0810 | |
| Spectrophotometer | Amersham Biosciences | Gene Quant pro | Amersham is now part of GE Healthcare. |
| Dissecting Microscope | Zeiss | Stemi 2000 | |
| Centrifuge | Beckman Coulter | Accuspin FR |
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