Summary

固体プレートベースの食餌制限線虫(Caenorhabditis elegans)</em

Published: May 28, 2011
doi:

Summary

ここでは、固体プレートベースの食事制限を行うためのプロトコルを提示<em> C.エレガンス</em>死菌で。

Abstract

栄養失調や飢餓のない食物摂取の減少は、寿命を向上させ、哺乳動物を含めた種の広い範囲で様々な加齢に伴う病気の発症を遅らせることが知られている。また、体重と生殖能力の低下だけでなく、血漿グルコース、インスリン、およびこれらの動物におけるIGF – 1の低いレベルになります。この治療はしばしば、食事制限(DR)やカロリー制限(CR)と呼ばれています。線虫Caenorhabditis elegansは老化の生物学を研究するための重要なモデル生物として注目されています。環境と遺伝子操作モデルDRに使用されてきたとCで寿命を延ばすことが示されている両方エレガンス 。しかし、C言語で報告されたDRの研究の多くエレガンスは、加齢分野における遺伝学的研究のほとんどはペトリ皿の標準固形寒天上で行われた一方、液体培地で動物を伝播することによって行われた。ここでは、死菌と標準固体NGM寒天ベースのプレートを使用してDRのプロトコルを提示する。

Protocol

1。細菌の濃度を推定するための検量線の確立このセクションでは、C言語の食事制限の実験のための食料源として使用される任意の細菌株(例えば、OP50、HT115)のための細菌の濃度を推定する方法を説明しますエレガンス 。別々の検量線は、株が使用されている各細菌のために確立されるべきである。 E.のシングルコロニーを植菌大?…

Discussion

食事制限(DR)が寿命を増やすおよび5-7哺乳類を含む種の広い範囲で様々な加齢に伴う病気の発症を遅らせることが知られている。両方の環境と遺伝子操作は、CのモデルDRに使用されている半定義された液体培地8,9、液体培地10-12で細菌の食物源の希釈、およびより遅い速度13で送り、その動作の変異体の使用で培養型ワームなど、 エレガンス、。</e…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、A. – LHへネイサンショックセンター(P30 AG13283)と国立老化研究所(NIA)からR01助成金(R01 AG028516)からのパイロット賞によってサポートされていました

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Carbenicillin Duchefa Biochemie C0109.25 Dissolved in water.
Kanamycin Roche 10106801001 Dissolved in water.
Bacto-peptone Becton, Dickinson and company DF0118072  
Bacto-tryptone Becton, Dickinson and company DF0123075  
Bacto-yeast extract Becton, Dickinson and company DF0127071  
Agar Becton, Dickinson and company DF00145170  
Sterile culture tube USA Scientific 1485-0810  
Spectrophotometer Amersham Biosciences Gene Quant pro Amersham is now part of GE Healthcare.
Dissecting Microscope Zeiss Stemi 2000  
Centrifuge Beckman Coulter Accuspin FR  

References

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Cite This Article
Ching, T., Hsu, A. Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (51), e2701, doi:10.3791/2701 (2011).

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