Çekal ligasyon Delinme Prosedürü
Summary
Çekal ligasyon ve ponksiyon insan sepsis çalışma için değerli bir araç olarak fare modeli.
Abstract
İnsan sepsis, yanıt olarak, yerel ev sahibi tarafından yer olmak için başarısız yoğun ve şiddetli enfeksiyon sistemik reaksiyonlar bir dizi ile karakterizedir. Şu anda, ABD'de yoğun bakım ünitelerinde 1 ilk on ölüm nedenleri arasında sepsis sırada yer alıyor. Sepsis sırasında çakışabilir iki kurulan hemodinamik evreleri vardır. İlk faz (hiperdinamik), makrofaj ve nötrofiller damar geçirgenliği (hipotansiyon), kalp fonksiyonu etkiler ve doku nekrozu ve organ yetmezliği ile sonuçlanan metabolik değişiklikler oluşturur proinflamatuvar sitokinler ve reaktif oksijen türlerinin büyük bir üretim olarak tanımlanır. Sonuç olarak, en yaygın ölüm nedeni akut böbrek hasarı. Ikinci aşaması (hypodynamic) değişmiş monosit antijen sunumu içeren bir anti-enflamatuar süreç, lenfosit proliferasyonu ve fonksiyon ve artan apoptozis azalmıştır. Immünosupresyon veya immün depresyon olarak bilinen bu devlet keskin nocosomial enfeksiyonları ve sonuçta, ölüm riskini artırır. Bu patofizyolojik süreçlerin mekanizmaları iyi karakterize değildir. Sepsis her aşamasında geri dönüşü olmayan ve telafisi mümkün olmayan hasara neden olabileceğinden, hastanın immünolojik ve fizyolojik durumunu belirlemek için esastır. Bu, pek çok tedavi edici ilaçların neden başarısız oldu ana sebebidir. Sepsis farklı aşamalarında verilen aynı ilaç tedavi ya da başka zararlı veya etkisi 2,3 hiçbir çeşitli düzeylerde sepsis anlamak için hastalığın klinik seyri üretir uygun ve kapsamlı hayvan modeli için çok önemlidir. Sepsis sırasında meydana gelen patofizyolojik mekanizmalar karakterize ve potansiyel terapötik ajanlar test etmek için model koşulları kontrol etmek için önemlidir.
Insan sepsis araştırmacıların etiyolojisi araştırmak için farklı hayvan modelleri geliştirdik. En yaygın olarak kullanılan klinik modeli çekal ligasyon ve ponksiyon (CLP). CLP modeli periton boşluğuna fekal madde salınımını polimikrobiyal enfeksiyon tarafından uyarılan bir şiddetlenir bağışıklık yanıtı oluşturmak için izin çekum perforasyonu oluşur. Bu model, klinik olarak anlamlı olan insan bir koşulu yerine getirmektedir. İnsanlarda olduğu gibi, sıvı resüsitasyon CLP geçiren fareler zaman içinde ikinci (geç) hypodynamic aşaması ilerledikçe ilk (erken) hiperdinamik faz göstermektedir. Buna ek olarak, sitokin profili insan sepsis lenfosit apoptozis (gözden 4,5) artmış olduğu görülen benzer. Sepsis dahil birden fazla ve üst üste mekanizmaları nedeniyle, araştırmacılar, tutarlı ve tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için kontrollü şiddeti uygun bir sepsis modeli gerekir.
Protocol
Discussion
Burada farelerde CLP modeli nasıl gerçekleştirmek için ayrıntılı göstermek ve şiddetinin derecesi modüle.
Sepsis diğer hayvan modelleri ile karşılaştırıldığında, CLP, farklı yaş ve cinsiyet herhangi bir fare zorlanma yapılabilir. Bu nispeten kolay ve ucuz bir cerrahi işlemdir. Bu modelde, şiddet derecesi hayatta kalma oranı üzerinde doğrudan bir etkisi vardır. Ligasyonu uzunluğu, iğne kalınlığı ve delikler sayısı, şiddeti CLP mortalite / modüle kontrol e…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma, Pennsylvania Sağlık Bakanlığı bir hibe ile desteklenmiştir.
Dr. Miguel Garcia Toscano Alfonso Martin Escudero Vakfı tarafından finanse edilen bu çalışma sırasında Temple Üniversitesi'nde bir doktora sonrası Üyesi oldu.
Biz Iliya Yordanov ve Kevin Kotredes video yapmak için teşekkür etmek istiyorum.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
|---|---|---|---|
| Ketamine | Ketaset | 0856-2013-01 | |
| Xylazine | AnaSed | NADA# 139-236 | |
| Insulin syringe 29G | Exel | 26028 | |
| Silk suture, 6-0 PROLENE | Ethicon | 8680G | |
| 19G and 25G Needle | BD | 305186 | |
| Shaver | General supply | General supply | |
| Infrared Heating lamp | General supply | General supply | |
| Michel wound clips 7mm | Roboz Surgical Instr | RS-9270 | |
| Ear Loop Mask | Fisher Scientific | 19-130-4181 | |
| Dissection scissors | Roboz Surgical Instr | RS-6702 | |
| Betadine solution | VWR | 63410-992 | |
| Surgical forceps | Roboz Surgical Instr | RS-5135 | |
| 70% Isopropyl alcohol pad | Fisher Scientific | 22-031-350 | |
| Buprenorphine | Bedford Labs | 55390-100-10 | |
| Tramadol | Sigma-Aldrich | 42965 |
References
- Angus, D. C. Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care. Crit Care Med. 29, 1303-1310 (2001).
- Riedemann, N. C., Guo, R. F., Ward, P. A. The enigma of sepsis. J Clin Invest. 112, 460-467 (2003).
- Eichacker, P. Q., Gerstenberger, E. P., Banks, S. M., Cui, X., Natanson, C. Meta-analysis of acute lung injury and acute respiratory distress syndrome trials testing low tidal volumes. Am J Respir Crit Care Med. 166, 1510-1514 (2002).
- Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. Animal models of sepsis: setting the stage. Nat Rev Drug Discov. 4, 854-865 (2005).
- Doi, K., Leelahavanichkul, A., Yuen, P. S., Star, R. A. Animal models of sepsis and sepsis-induced kidney injury. J Clin Invest. 119, 2868-2878 (2009).
- Godshall, C. J., Scott, M. J., Peyton, J. C., Gardner, S. A., Cheadle, W. G. Genetic background determines susceptibility during murine septic peritonitis. J Surg Res. 102, 45-49 (2002).
- De Maio, A., Torres, M. B., Reeves, R. H. Genetic determinants influencing the response to injury, inflammation, and sepsis. Shock. 23, 11-17 (2005).
- Diodato, M. D., Knoferl, M. W., Schwacha, M. G., Bland, K. I., Chaudry, I. H. Gender differences in the inflammatory response and survival following haemorrhage and subsequent sepsis. Cytokine. 14, 162-169 (2001).
- Turnbull, I. R. Effects of age on mortality and antibiotic efficacy in cecal ligation and puncture. Shock. 19, 310-313 (2003).
- Miyaji, T. Ethyl pyruvate decreases sepsis-induced acute renal failure and multiple organ damage in aged mice. Kidney Int. 64, 1620-1631 (2003).
- Torres, M. B., De Maio, A. An exaggerated inflammatory response after CLP correlates with a negative outcome. J Surg Res. 125, 88-93 (2005).
- Doi, K. AP214, an analogue of alpha-melanocyte-stimulating hormone, ameliorates sepsis-induced acute kidney injury and mortality. Kidney Int. 73, 1266-1274 (2008).
- Wilson, M. A. Fluid resuscitation attenuates early cytokine mRNA expression after peritonitis. J Trauma. 41, 622-627 (1996).
- Zanotti-Cavazzoni, S. L. Fluid resuscitation influences cardiovascular performance and mortality in a murine model of sepsis. Intensive Care Med. 35, 748-754 (2009).
- Hugunin, K. M., Fry, C., Shuster, K., Nemzek, J. A. Effects of tramadol and buprenorphine on select immunologic factors in a cecal ligation and puncture model. Shock. 34, 250-260 (2010).
