我们已经开发出一种基于胶原蛋白<em>在体外</em>促进所有乳腺癌亚型样本的增殖和侵袭的实验。利用光学投影层析成像,立体显微镜技术,可视化和量化肿瘤扩展。此法可用于量化个别肿瘤样本中的药物反应。
乳腺癌是在西方世界造成的死亡率。它是公认的乳腺癌扩散,首先在本地和远端后,是在患者预后的主要因素。乳腺癌的实验系统依靠从原发肿瘤或胸腔积液通常派生的细胞株。两大障碍阻碍了这项研究:(一)一些已知的子类型的乳腺癌患者(尤其是预后不良的管腔乙肿瘤)没有代表在当前行的集合;(二)肿瘤微环境的影响通常不考虑。
我们展示一个小学文化的所有子类型的乳房癌标本的技术。这是通过使用三维(3D)文化系统中,小块的肿瘤是我垫在软大鼠胶原嵌入式。在2-3周之内,肿瘤细胞扩散到胶原蛋白,形成类似人类tumours1观察的各种结构。可行的脂肪细胞,上皮细胞和成纤维细胞内原有的核心,在组织学上可见一斑。 squamoid形态的恶性上皮细胞进行了论证,侵犯到周围的胶原质。这些细胞内,核异型明显,核分裂和凋亡小体。
我们所采用的光学投影层析成像(OPT),三维成像技术,以量化肿瘤的扩散程度文化。我们使用的OPT,测量肿瘤的文化体积,参数常规测量过程中的新辅助治疗的乳腺癌患者,以评估药物治疗的反应。
在这里,我们提供一个机会,文化的人类乳腺肿瘤,无分型的偏见和量化那些体内的扩散。这种方法可用于在未来量化在原发肿瘤的药物敏感性。这可以提供一个比目前使用的细胞株的预测模型。
胶原蛋白为基础的分析,研究肿瘤细胞株的行为是目前广泛使用的6,7,8。然而,这些实验都没有充分反映在肿瘤及其周围环境的复杂性。在这项研究中,我们显示,人类乳腺癌的材料,可用于以类似的方式, 体外 。此外,OPT是一个有用的工具来刻画乳腺癌的3D扩展。我们发现,这项技术的主要限制是肿瘤材料的可用性(单核心活检是足够4-6实验)。另一个限制因素是结构的入侵只是发生在约40%的检测。为了克服这个问题,我们会定期添加任何7天左右所需的治疗,所有检测明显增长。
在未来,可以延长使用OPT的,也发现大量变更 ,体外,药物治疗造成的。这反过来又可以促进更多的个性化的癌症治疗,独立的动物模型。目前,我们正在探索ER +肿瘤他莫昔芬体外的反应。
The authors have nothing to disclose.
我们感谢她在取得临床标本的宝贵援助洛娜伦肖(爱丁堡乳腺癌单位)。
肿瘤物质的使用被批准的洛锡安研究伦理委员会(08/S1101/41)和实验癌症医学中心项目(爱丁堡)的主持下获得的。
这项工作是由苏格兰拨款委员会的支持。 ADL的是一个吴霭仪黄油Reekie信托临床研究员。
Name of Reagent | Company | Catalogue No. |
MEGM Complete | Lonza | CC-3150 |
DMEM/F12 | Sigma-Aldrich | D8900 10X1L |
β-oestradiol | Sigma-Aldrich | E8875-250MG |
Rabbit anti-cytokeratin | Dako | Z0622 |
Goat anti-rabbit Alexa555 | Invitrogen | A21422 |
All other standard reagents were obtained from Sigma-Aldrich.