פיתחנו מבוססי קולגן<em> במבחנה</em> Assay המקדמת התפשטות ופלישה דגימות של כל תת סרטן השד. טומוגרפיה הקרנה אופטית, טכניקה three מיקרוסקופיה ממדי נוצל כדי לחזות ולכמת התפשטות הגידול. Assay זה עשוי לשמש לכמת תגובה התרופה של דגימות גידולים בודדים.
סרטן השד הוא הגורם המוביל לתמותה בעולם המערבי. היא מבוססת היטב כי התפשטות של סרטן השד, תחילה מקומית ולאחר מכן distally, היא גורם מרכזי פרוגנוזה המטופל. מערכות ניסיוני של סרטן השד מסתמכים על שורות תאים שמקורם בדרך כלל גידולים ראשוניים או השתפכויות פלאורלי. שני המכשולים העיקריים המעכבים את המחקר הזה: (i) ידוע כמה תתי סוגים של סרטן השד (בעיקר העניים luminal הפרוגנוזה גידולים B) אינם מיוצגים בתוך אוספים הקו הנוכחי (ii) את ההשפעה של microenvironment הגידול לא נלקח כלל בחשבון.
אנו להפגין טכניקה ראשונית תרבות סרטן השד דגימות של כל סוגי המשנה. זו מושגת על ידי שימוש תלת ממדי (3D) מערכת התרבות שבה חתיכות קטנות של גידולים המוטבעים קולגן עכברוש רך אני כריות. בתוך 2-3 שבועות, בתאי הגידול התפשט לתוך קולגן ויוצרים מבנים שונים הדומים לאלו שנצפו tumours1 האדם. Adipocytes קיימא, תאים אפיתל fibroblasts בתוך הליבה המקורית ניכרו על היסטולוגיה. תאים אפיתל ממאירים עם מורפולוגיה squamoid היו הפגינו הפולש לתוך קולגן שמסביב. Pleomorphism גרעיני ניכרה בתוך תאים אלה, יחד עם דמויות mitotic גופים אפופטוטיים.
יש לנו תחזית המועסקים טומוגרפיה אופטית (הכבושים), טכנולוגיית הדמיה 3D, על מנת לכמת את מידת התפשטות הגידול בתרבות. השתמשנו הכבושים כדי למדוד את נפח עיקר הגידול תרבות, פרמטר נמדד באופן שגרתי במהלך טיפול ניאו אדג'ובנטי של חולות סרטן השד על מנת להעריך תגובה לטיפול תרופתי.
כאן, אנו מציגים הזדמנות גידולים התרבות האנושית השד ללא משוא פנים תת סוג ולכמת את התפשטות vivo אלה לשעבר. שיטה זו יכולה לשמש בעתיד כדי לכמת את רגישות התרופה בגידול המקורי. זו עשויה לספק מודל החיזוי יותר שורות תאים המשמשים כיום.
קולגן מבוססי מבחני ללמוד את ההתנהגות של שורות תאים סרטניים נמצאים כעת בשימוש נרחב 6,7,8. עם זאת, מבחני אלה לא בא לידי ביטוי במורכבות מלאה של הגידול וסביבתו. במחקר זה, אנו מראים כי חומרים סרטן השד אנושי יכול לשמש באופן דומה, לשעבר vivo. יתר על כן, הפלסטינים הכבושים הוא כלי שימושי כדי לאפיין את התפשטות 3D של סרטן השד. מצאנו כי המגבלה העיקרית של הטכניקה הזו הוא הזמינות של חומרים הגידול (יחיד הליבה ביופסיה מספיק עבור מבחני 4-6). גורם נוסף המגביל הוא כי הפלישה מבניים מתרחשת רק כ -40% של מבחני. כדי להתגבר על זה, אנחנו באופן קבוע להוסיף כל טיפול הרצוי סביב יום 7 לכל מבחני עם צמיחה גלוי.
השימוש של השטחים הכבושים ניתן יהיה להרחיב בעתיד גם לזהות שינויים בתפזורת, vivo לשעבר, הנובע טיפול תרופתי. זה בתורו יכול להקל בטיפול בסרטן פרטנית יותר, עצמאיים של מודלים של בעלי חיים. כרגע אנחנו בוחנים את התגובה של ER + גידולים vivo לשעבר טמוקסיפן.
The authors have nothing to disclose.
אנו מודים לורנה רנשו (יחידת השד אדינבורו) לקבלת סיוע שלא יסולא בפז לה בהשגת דגימות קליניות.
שימוש בחומר הגידול אושרה על ידי מחקר Lothian ועדת האתיקה (08/S1101/41) וקיבלנו בחסות Experimental Medicine סרטן מרכז התוכנית (אדינבורו).
עבודה זו נתמכת על ידי המועצה הסקוטית מימון. הליגה נגד השמצה היא מרגרט מיס באטרס Reekie בחור בנאמנות קלינית.
Name of Reagent | Company | Catalogue No. |
MEGM Complete | Lonza | CC-3150 |
DMEM/F12 | Sigma-Aldrich | D8900 10X1L |
β-oestradiol | Sigma-Aldrich | E8875-250MG |
Rabbit anti-cytokeratin | Dako | Z0622 |
Goat anti-rabbit Alexa555 | Invitrogen | A21422 |
All other standard reagents were obtained from Sigma-Aldrich.