Intravitrealen Injektion zur Einrichtung Ocular Krankheiten Modell

Summary

Intravitreale Injektion ist eine weit verbreitete Technik in Visual Sciences Forschung für Augenerkrankungen oder als direkte Anwendung der lokalen Behandlung. Dieses Video demonstriert ein Protokoll für die intravitreale Injektion mit einer 1 ml Spritze mit Glaspipette. Nützliche Tipps zum Vermeiden von massiven Blutungen und Linse beschädigen gegeben sind.

Abstract

Intravitreale Injektion ist eine weit verbreitete Technik in Visual Sciences Forschung. Es kann benutzt werden, um Tiermodelle mit Augenerkrankungen oder als direkte Anwendung der lokalen Behandlung zu etablieren. Dieses Video stellt, wie man einfache und kostengünstige Tools verwenden, um die intravitreale Injektion Vorgang zu beenden. Die Verwendung einer 1 ml Spritze, statt eines hemilton Spritze verwendet wird. Praktische Tipps, wie Sie geeignete Injektionsnadeln mit Glas-Pipetten mit perfekten Tipps, und wie man ganz einfach verbinden die Nadel der Spritze mit der Glaspipette dicht zusammen, gegeben sind.

Zur Durchführung einer guten intravitrealen Injektion, gibt es drei Aspekte zu beachten: 1) an der Injektionsstelle sollte nicht stören Netzhaut Struktur, 2) Blutung sollte vermieden werden, um das Risiko einer Infektion zu verringern; 3) Objektiv sollte unangetastet an traumatische Katarakt zu vermeiden. Kurz gesagt, ist der wichtigste Punkt, um die Unterbrechung des normalen Auges Struktur zu reduzieren. Um zu vermeiden, Unterbrechung der Netzhaut, war die überlegene Nasenregion der Ratte Auge gewählt. Außerdem wurde der Einstichstelle der Nadel an der par planar, was etwa 1,5 mm von der Limbus-Region der Ratte Auge war. Eine kleine Menge des Glaskörpers wird sanft durch das Punktionsloch geschoben, um den Augeninnendruck vor der Injektion zu reduzieren. Mit dem 45 ° Einspritzwinkel, ist es weniger wahrscheinlich, dass traumatische Katarakt in der Ratte Auge verursachen, wodurch Komplikationen und der Einfluss von linsenförmigen Faktoren. Bei dieser Operation gab es kein Schneiden der Bindehaut und der Augenmuskeln, keine Blutungen. Mit schnellen und leichten Verletzungen, kann eine erfolgreiche intravitrealen Injektion in Minuten erledigt werden.

Die Injektion gesetzt in diesem Protokoll beschriebenen ist spezifisch für intravitreale Injektion. Allerdings können die Methoden und Materialien vorgestellt hier auch für andere Injektionsverfahren in Drug-Delivery an das Gehirn, Rückenmark oder anderen Organen in kleine Säugetiere verwendet werden.

Protocol

Bereiten Sie die Glaspipetten mit Pipetten Abzieher, verbinden Sie es zu einem 1ml Spritze, und versiegeln Sie die Verbindung mit Parafilm. Ziehen Sie 2 ml der Lösung in die Spitze der Pipetten und erhalten für die Injektion bereit. Betäuben die Ratte durch intraperitoneale Injektion von Ketamin (80mg/kg) und Xylazin (8mg/kg) (Volumen-Verhältnis bei 2:1). Einen Tropfen von 0,5% Alcaine der Ratte Augen, als topische Anästhetika vor intravitrealen Injektion. Position der Ratte und setzen die überlegene…

Discussion

Gute intravitrealen Injektion ist nützlich für die Gründung Tiermodell sowie direkte intraokulare Behandlung. Erstens sollte der Injektionsstelle nicht stören Netzhaut-Struktur. Zweitens, Blutungen zu vermeiden, um das Risiko einer Infektion zu verringern. Drittens Objektiv sollte unangetastet an traumatische Katarakt zu vermeiden. Am wichtigsten ist es, die Unterbrechung des normalen Auges Struktur zu reduzieren.

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Operating Microscope		Olympus	OME
Glass Pipettes		World Precision Instruments, Inc.
Pipette Puller		David Kopf Instruments
1ml syringes				single use
30G needles				single use
Ketamine		Aldasan		anesthetic
Xylazine		Aldasan		anesthetic
Alcaine		Alcon-Couvreur		0.5% proparacaine hydrochloride
Tobrex		Alcon-Couvreur		ointment, 3% tobramyxin.