Anerkjennelse av epidermal Transglutaminase av IgA og Tissue Transglutaminase to antistoffer i et sjeldent tilfelle av Rhesus Dermatitis
Summary
Dermatitis herpetiformis (DH) er en kronisk inflammatorisk tilstand karakterisert ved en autoimmun reaksjon mellom IgA og epidermal transglutaminase (etg.). DH utvikler seg i en svært liten del av gluten-sensitive og / eller cøliaki pasienter. Resultatene av denne studien indikerer at DH kan også utvikle seg i en Rhesus ape vert med symptomer på idiopatic dermatitt.
Abstract
Tissue transglutaminase 2 (tTG2) er en intestinal fordøyelses enzym som deamidates allerede delvis fordøyd kosten gluten f.eks gliadin peptider. Hos genetisk disponerte individer, utløser tTG2 autoimmune reaksjoner som er karakterisert ved produksjon av tTG2 antistoffer og deres direkte avsetning i små tarmveggen 1,2. Tilstedeværelse av slike antistoffer utgjør en av de viktigste kjennetegnene på cøliaki (CD). Epidermal transglutaminase (etg.) er et annet medlem av transglutaminase familien som også kan fungere som en autoantigen i et lite mindretall av CD pasientene. I disse relativt sjeldne tilfeller utløser etg. en autoimmun reaksjon (hudutslett) klinisk kjent som dermatitis herpetiformis (DH). Selv om den eksakte mekanismen for CD og DH patogenese ikke er godt forstått, er det kjent at tTG2 og etg. dele antigene epitoper som kan bli gjenkjent av serum antistoffer fra både CD og DH pasienter 3,4.
<p cLass = "jove_content"> I denne studien, den konfokalmikroskopi undersøkelse av biopsi prøver fra hud lesjoner av to rhesus-aper (Macaca mulatta) med dermatitt (Tabell 1, fig. 1 og 2) ble brukt til å studere de berørte vev. I ett dyr (EM96) en spektral overlapping av IgA og tTG2 antistoffer (Fig. 3) ble demonstrert. Tilstedeværelsen av dobbel-positive tTG2 + IgA + celler var fokusert i den dype epidermis, rundt dermal papillae. Dette er konsistent med lesjoner beskrevet i DH pasienter 3. Da EM96 var plassert på en glutenfri diett, dermatitt, samt tTG2 + IgA + innskudd forsvant og var ikke lenger synlig (figur 1-3). Dermatitt dukket imidlertid basert på re-introduksjon av kosttilskudd gluten i EM96 (ikke vist). I andre makaker inklusive dyr med urelaterte dermatitt, ble tTG2 + IgA + innskudd ikke er oppdaget. Glutenfri diett-avhengig syndenes dermatitt i EM96 sammen med tilstedeværelse av tTG2 + IgA + celler i huden sin foreslå en autoimmun, DH-lignendemekanisme for utvikling av denne tilstanden. Dette er den første rapporten om DH-aktig dermatitt i enhver ikke-menneskelige primater.Protocol
Discussion
Vårt nyetablerte ikke-menneskelige primater modell av glutenintoleranse ble nylig brukt til å studere intestinal permeabilitet endringer utløst av kosten gluten 5,6. Plasma tTG2 antistoffer samt intestinal tTG2 + IgA + innskudd ble oppdaget i noen gluten-sensitive makaker. Siden vi nylig identifiserte sjeldne tilfeller av idiopatisk dermatitt i kolonien rhesus-aper, der ingen vanlige (infeksiøs / metabolsk) etiologien kan være etablert, var formålet med denne studien er å vurdere om tTG2 + IgA + antist…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Forfatterne ønsker å takke Amanda Tardo, Dr. Mostafa Bouljihad, Stephanie feely, Carol Coyne, Dr. Erin Ribka, Dr. Pete Didier og Dorothy Kuebler for deres tekniske assistanse. Dette arbeidet ble støttet av NIH stipend R01-DK076653 og 3R01-DK076653-02S1 til KS og basen driftsstøtte av TNPRC RR000164.
Materials
| Name of the reagent or equipment | Company | Catalogue Number / Product Code | Note |
| Anti-Human IgA-FITC * | Sigma, St. Louis, MO | F-5259 | 1:100 working dilution |
| Anti-Human tTG2 | Thermo Scientific, Kalamazoo, MI | MS-300-P1ABX | 1:100 working dilution |
| Anti-Mouse IgG1 ** | Invitrogen, Carlsbad, CA | A-21124 | 1:1,000 working dilution |
| ToPro-3 DNA probe *** | Invitrogen, Carlsbad, CA | T-3605 | 1:1,000 working dilution |
| Zinc Formalin (Z-fix) |
Anatech Ltd., Battle Creek, MI | 171 | |
| OCT Freezing Medium |
Sakura Finetek, Torrence, CA | 4583 | |
| Cytoseal Mounting Medium |
Richard-Allan Scientific, Kalamazoo, MI | 8312-4 | |
| Anti-Quenching Solution |
Sigma, St. Louis, MO | P 3130 | |
| Ethilon (Nylon Suture) |
Ethicon, Johnson & Johnson, Berkshire, UK | 663G | |
| Miltex Punch Dermal Biopsy Instrument | Miltex, York, PA | NA | |
| Oster Golden A5 Single Speed Vet Clipper with a size 40 blade | Oster Products, McMinnville, TN | 78005-050 | |
| Leica Tissue Processor | Leica Microsystems Inc., Buffalo Grove, KS | ASP300 | |
| Rotary Microtome | Microm International, Waldorf, Germany |
HM325 | |
| Cryostat | Thermo Scientific, Kalamazoo, MI |
HM560 | |
| Confocal Microscope | Leica, Wetzlar, Germany |
TCS SP2 |
* Fluorescein isothiocyanate
** Secondary (Alexa Fluor 568-conjugated) antibody used after tTG2 primary antibody
** Dye
References
- Diosdado, B., Wijmenga, C. Molecular mechanisms of the adaptive, innate and regulatory immune responses in the intestinal mucosa of celiac disease patients. Expert. Rev. Mol. Diagn. 5 (5), 681-700 (2005).
- Schuppan, D., Dennis, M. D., Kelly, C. P. Celiac disease: epidemiology, pathogenesis, diagnosis, and nutritional management. Nutr. Clin. Care. 8 (2), 54-69 (2005).
- Sardy, M. Epidermal transglutaminase (TGase 3) is the autoantigen of dermatitis herpetiformis. J. Exp. Med. 195 (6), 747-757 (2002).
- Rose, C. Autoantibodies against epidermal transglutaminase are a sensitive diagnostic marker in patients with dermatitis herpetiformis on a normal or gluten-free diet. J. Am. Acad. Dermatol. 61 (1), 39-43 (2009).
- Bethune, M. Transepithelial transport and enzymatic detoxification of gluten in gluten-sensitive rhesus macaques. PLoS ONE. 3 (3), e1857-e1857 (2008).
- Mazumdar, K. Visualization of transepithelial passage of the immunogenic 33-residue peptide from α-2 gliadin in gluten-sensitive macaques. PLoS ONE. 5 (4), e10228-e10228 (2010).
- Schuppan, D., Junker, Y., Barisani, D. Celiac disease: from pathogenesis to novel therapies. Gastroenterol. 137 (6), 1912-1933 (2009).
- Hunt, K. Newly identified genetic risk variants for celiac disease related to the immune response. Nature Genet. 40 (4), 395-402 (2008).
- Abadie, V. Integration of genetic and immunological insights into a model of celiac disease pathogenesis. Annu. Rev. Immunol. 29, 493-525 (2011).
