العزلة وثقافة العصبية الخلايا الجذعية من بصيلات الشعر كريست الإنسان
Summary
تقدم هذه المقالة قوية لبروتوكول العزلة وثقافة العصبية من الخلايا الجذعية قمة بصيلات الشعر البشري.
Abstract
نمو بصيلات الشعر الخضوع لمدى الحياة ودورة الشعر هو عملية تنطوي على رقابة جيدة تكاثر الخلايا الجذعية والسكون. انتفاخ الشعر هو عبارة عن كوة جيدة تتميز عن الخلايا الجذعية البالغة 1. هذا الجزء من غمد الجذر الخارجي يحتوي على عدد من أنواع مختلفة من الخلايا الجذعية، بما في ذلك الخلايا الجذعية الظهارية 2، الخلايا الجذعية الخلايا الصباغية 3 و قمة العصبية مثل الخلايا الجذعية 4-7. بصيلات الشعر تمثل مصدرا غنيا للوصول وبالنسبة لأنواع مختلفة من الخلايا الجذعية البشرية. عزلت نحن وغيرنا الخلايا الجذعية العصبية قمة (NCSCs) من بصيلات الشعر الإنسان الجنين والكبار 4،5. هذه الخلايا الجذعية البشرية هي التسمية الاحتفاظ الخلايا وتكون قادرة على التجديد الذاتي من خلال انقسام الخلايا غير المتماثلة في المختبر. يعبرون عن خلية غير ناضجة قمة العصبية ولكن ليس علامات علامات التمايز. وأظهرت دراستنا التنميط التعبير مفادها أنهما يتقاسمان نمط التعبير الجيني مماثلة مع الفئران غير ناضجة لجنة المساواة العرقية الجلد العصبيسانت الخلايا. يعرضون multipotency نسيلي التي يمكن أن تؤدي إلى خلية الأنساب عضلي، الصباغية، والخلايا العصبية في المختبر بعد نسيلي الثقافة خلية واحدة. الخلايا المتمايزة لا يكتسب فقط نسب محددة ولكن أيضا علامات تظهر وظائف مناسبة في ظروف فيفو السابقين. وبالإضافة إلى ذلك، تظهر هذه NCSCs المحتملة التمايز نحو الأنساب الوسيطة. يمكن الخلايا العصبية في الدماغ لا تزال قائمة متباينة الماوس والاحتفاظ علامات التمايز العصبية. فقد تبين أن الشعر جريب المستمدة NCSCs إعادة نمو الأعصاب يمكن أن تساعد، وأنها تحسن وظيفة السيارات في الفئران مع زرع هذه الخلايا الجذعية بعد إصابة الحبل الشوكي transecting 8. وعلاوة على ذلك، تم إصلاح الأعصاب الطرفية مع ترقيع الخلايا الجذعية 9، وغرس الخلايا المشتقة من السلائف الجلد المجاور لسحق الأعصاب الوركي أدى إلى عودة الميالين 10. ولذلك، فقد أظهرت جريب الشعر / البشرة NCSCs المستمدة بالفعل نتائج واعدة للبحثegenerative العلاج في نماذج قبل السريرية.
وقد أظهرت الجسدية الخلايا إعادة برمجة الخلايا المحفزة التي يسببها ل(آي بي إس) الجذعية إمكانات هائلة للطب التجديدي. ومع ذلك، هناك العديد من القضايا لا تزال مع خلايا الجذع، وخاصة تأثير على المدى الطويل من الجين الورمي / فيروس التكامل وtumorigenicity المحتملة للخلايا الجذعية المحفزة لم تعالج على نحو كاف. لا تزال هناك الكثير من العقبات التي يتعين التغلب عليها قبل أن تتمكن من استخدام خلايا الجذع للطب التجديدي. بينما من المعروف أن الخلايا الجذعية البالغة لتكون آمنة واستخدمت فيها سريريا لسنوات عديدة، مثل زرع نخاع العظام. وقد استفاد العديد من المرضى بالفعل من العلاج. ذاتي الخلايا الجذعية البالغة لا تزال الخلايا المفضل للزرع. ولذلك، فإن الجذعية البالغة يمكن الوصول إليها بسهولة وقابلة للتوسيع الخلايا في بصيلات الجلد / شعر الإنسان تعد مصدرا قيما للطب التجديدي.
Protocol
Discussion
الخلية العزلة والثقافة الأساليب المذكورة هي استنساخه وقوية. ونحن قد ولدت NCSCs من عشرات الأفراد عبر مجموعة واسعة العمر. على الرغم من أنه من الأفضل معالجة الأنسجة مباشرة بعد الحصاد الأنسجة، وجدنا أن الأنسجة يمكن تخزينها بأمان فروة الرأس في وسائل الإعلام على الجليد لنقل…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ويدعم هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح R01AR054593 وR01AR054593-S1 لشو.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| DMEM | Invitrogen | 11965-092 |
| DMEM/F12 | Invitrogen | 11330-32 |
| Heat-inactivated FBS | Hyclone | SH30071.03 |
| B27 supplement | Invitrogen | 17504044 |
| N2 supplement | Invitrogen | 17502048 |
| bFGF | Invitrogen | PHG0026 |
| EGF | R&D system | 236-EG-01M |
| IGF-I | R&D system | 291-G1-050 |
| 0.05% Trypsin/EDTA | Invitrogen | 25300-054 |
| Dispase | Invitrogen | 17105041 |
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15070063 |
Table 1.
References
- Cotsarelis, G., Cheng, S. Z., Dong, G., Sun, T. T., Lavker, R. M. Existence of slow-cycling limbal epithelial basal cells that can be preferentially stimulated to proliferate: implications on epithelial stem cells. Cell. 57, 201-209 (1989).
- Cotsarelis, G., Sun, T. T., Lavker, R. M. Label-retaining cells reside in the bulge area of pilosebaceous unit: implications for follicular stem cells, hair cycle, and skin carcinogenesis. Cell. 61, 1329-1337 (1990).
- Tanimura, S., et al. Hair follicle stem cells provide a functional niche for melanocyte stem cells. Cell Stem Cell. 8, 177-187 (2011).
- Yu, H., et al. Isolation of a novel population of multipotent adult stem cells from human hair follicles. Am. J. Pathol. 168, 1879-1888 (2006).
- Yu, H., Kumar, S. M., Kossenkov, A. V., Showe, L., Xu, X. Stem cells with neural crest characteristics derived from the bulge region of cultured human hair follicles. J. Invest. Dermatol. 130, 1227-1236 (2010).
- Wong, C. E., et al. Neural crest-derived cells with stem cell features can be traced back to multiple lineages in the adult skin. J. Cell Biol. 175, 1005-1015 (2006).
- Sieber-Blum, M., Grim, M., Hu, Y. F., Szeder, V. Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle. Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).
- Amoh, Y., et al. Implanted hair follicle stem cells form Schwann cells that support repair of severed peripheral nerves. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 17734-17738 (2005).
- Koliatsos, V. E., Xu, L., Yan, J. Human stem cell grafts as therapies for motor neuron disease. Expert Opin. Biol. Ther. 8, 137-141 (2008).
- McKenzie, I. A., Biernaskie, J., Toma, J. G., Midha, R., Miller, F. D. Skin-derived precursors generate myelinating Schwann cells for the injured and dysmyelinated nervous system. J. Neurosci. 26, 6651-6660 (2006).
- LeDouarin, N. M., Kalcheim, C. . The Neural Crest. , (1999).
- Tumbar, T., et al. Defining the epithelial stem cell niche in skin. Science. 303, 359-363 (2004).
- Roh, C., et al. Multi-potentiality of a new immortalized epithelial stem cell line derived from human hair follicles. In Vitro Cell Dev. Biol. Anim. 44, 236-244 (2008).
