Un modèle de la vessie orthotopique tumorale et l'évaluation de Sarna traitement intravésicale
Summary
L'établissement d'un modèle de la vessie orthotopique tumeur à évaluer les effets antitumoraux de Sarna par voie intravésicale livré et suivi de la croissance tumorale par échographie et l'imagerie bioluminescente.
Abstract
Nous présentons une nouvelle méthode pour traiter le cancer de la vessie avec intravésicale livré activation petit ARN (SARNA) dans un modèle de xénogreffe de souris tumeur orthotopique de la vessie. Le modèle de la souris est mis en place par cathétérisme urétral sous anesthésie générale par inhalation. Brûlure chimique est ensuite introduit à la muqueuse de la vessie à l'aide intravésicale solution de nitrate d'argent pour perturber la couche glycosaminoglycane de la vessie et permet aux cellules d'attacher. Après plusieurs lavages à l'eau stérile, cancer de la vessie humaine KU-7-luc2-GFP cellules sont inculquées à travers le cathéter dans la vessie pour habiter pendant 2 heures. La croissance ultérieure de tumeurs de la vessie est confirmée et surveillée par échographie de la vessie dans l'imagerie in vivo et bioluminescente. Les tumeurs sont alors traitées par voie intravésicale avec SARNA formulée dans des nanoparticules lipidiques (LNPs). La croissance tumorale est contrôlée par échographie et la bioluminescence. Toutes les étapes de cette procédure sont mises en évidence dans la vidéo qui l'accompagne.
Protocol
Discussion
Nous présentons un protocole pour la mise en place d'une souris modèle de xénogreffes tumorales de la vessie orthotopique suivie d'un traitement par voie intravésicale des tumeurs avec SARNA TNL formulé qui cible le promoteur de p21 CIP1/WAF1 (p21) pour l'activation transcriptionnelle. 2, 3 Les tumeurs qui en résultent peuvent être confirmée et surveillée par imagerie bioluminescente et l'échographie de la vessie. Modèles orthotopiques peut être supérieure à intrapéri…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Cette recherche est financée par l'AACR Henry Shepard vessie Cancer Research Grant (09-60-30-LI).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| KU-7-luc-GFP cells | Caliper | 128091 | |
| thymic nude mice ( nu/nu) | Simonsen Laboratories | 6-7 weeks old | Sim:(NCr) nu/nu fisol |
| Ultrasound unit | Visualsonics | Vevo 770 | RMV-704 probe |
| Bioluminescence unit | Caliper | IVIS Spectrum | |
| Exel safelet catheter | Fisher | 14-841-21 | 24G X ¾” |
| Silver nitrate | Sigma | S8157 | |
| Hamilton syringe | Hamilton company | 80301 | |
| LNP-saRNA | Alnylam Pharmaceuticals |
Table 1. Specific reagents and equipment.
References
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