Um modelo de tumor de bexiga ortotópico e Avaliação de Tratamento de sarna intravesical
Summary
Estabelecer um modelo de tumor de bexiga ortotópico para avaliar os efeitos antitumorais de sarna intravesical entregue e acompanhamento do crescimento tumoral por ultra-som e de imagem de bioluminescência.
Abstract
Apresentamos um novo método para o tratamento de cancro da bexiga com intravesical entregue pequena activador RNA (sarna) em um xenoenxerto modelo de rato ortotópico tumor da bexiga. O modelo do rato é estabelecido por cateterismo uretral sob anestesia geral inalatória. Queimadura química é então introduzido para a mucosa da bexiga usando solução de nitrato de prata intravesical para romper a camada de glicosaminoglicano bexiga e permite que as células para anexar. Após várias lavagens com água estéril, cancro da bexiga humana KU-7-luc2-GFP células são instilado através do cateter no interior da bexiga para habitar durante 2 horas. Subsequente crescimento de tumores de bexiga é confirmada e monitorado por ultra-som na bexiga vivo e de imagem de bioluminescência. Os tumores são então tratados com intravesical sarna formulados em nanopartículas de lípidos (LNPs). O crescimento do tumor é monitorizado com ultra-sons e bioluminescência. Todos os passos do presente processo são demonstradas no vídeo que o acompanha.
Protocol
Discussion
Apresenta um protocolo para o estabelecimento de um modelo ortotópico xenoenxerto rato tumor da bexiga, seguido de tratamento intravesical dos tumores com LNP sarna formulado que tem como alvo o promotor de p21 CIP1/WAF1 (p21) para a activação transcricional. 2, 3 Os tumores resultantes podem ser confirmada e monitorados com exames de imagem de bioluminescência e ultra-som da bexiga. Modelos ortotópicos pode ser superior à intraperitoneal, subcutânea ou intravenosa os modelos, fornecendo um …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Esta pesquisa é financiada pelo Henry AACR Bexiga Shepard Cancer Research Grant (09-60-30-LI).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| KU-7-luc-GFP cells | Caliper | 128091 | |
| thymic nude mice ( nu/nu) | Simonsen Laboratories | 6-7 weeks old | Sim:(NCr) nu/nu fisol |
| Ultrasound unit | Visualsonics | Vevo 770 | RMV-704 probe |
| Bioluminescence unit | Caliper | IVIS Spectrum | |
| Exel safelet catheter | Fisher | 14-841-21 | 24G X ¾” |
| Silver nitrate | Sigma | S8157 | |
| Hamilton syringe | Hamilton company | 80301 | |
| LNP-saRNA | Alnylam Pharmaceuticals |
Table 1. Specific reagents and equipment.
References
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