Ортотопическая мышиной модели колоректального рака
Summary
Два метода могут быть использованы для создания этой модели: введение суспензии клеток рака в слепой кишки стену или трансплантация части опухоли подкожной на слепой кишки. Эта модель полезна для изучения естественное развитие колоректального рака и тестирования новых лекарственных средств против колоректального рака.
Abstract
Традиционные опухоли подкожной модели далеки от идеальных для изучения рака прямой кишки. Ортотопическая модели мыши колоректального рака, особенностью которой раковые клетки растут в их естественном месте, копировать человеческие заболевания с высокой точностью. Два метода могут быть использованы для создания этой модели. Оба метода схожи и требуют анестезии мыши и лапаротомию для выявления слепой кишки. Один метод предполагает введение колоректального рака суспензии клеток в слепой кишки стену. Раковые клетки вырастили первый в области культуры, собранных при subconfluent и готовят суспензии отдельных клеток. Небольшой объем клетки вводят медленно, чтобы избежать утечки. Другая техника включает в себя трансплантацию части опухоли подкожной на слепой кишки. Мышь с ранее установленной опухоли подкожной колоректального является эвтаназии и опухоль удаляется с использованием стерильной техники. Опухоль часть разделена на мелкие кусочки для пересадки на другой мыши. До трансплантации, слепой кишки стены слегка поврежденных чтобы облегчить опухолевой инфильтрации клеток. Время развитие первичной опухоли и метастазов в печень будет варьироваться в зависимости от техники, клеточной линии, и мышь видов, используемых. Это ортотопической модели мыши полезны для изучения естественное развитие колоректального рака и тестирования новых лекарственных средств против колоректального рака.
Protocol
Discussion
Хотя мышиные модели подкожной опухоли легко установить и контролировать, то ясно, что эта модель не может воспроизвести оригинальную анатомических сайт колоректального рака. Из-за разницы в микросреде, толстой кишки раковые клетки растущего под кожей, как было показано изменение их фенотипа и по…
Acknowledgements
Отделение хирургии, Университет Калифорнии, Сан-Франциско
Раймонд Шахин, доктор медицинских наук
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Cell culture media and components | will vary depending on cell line used | |||
| Phosphate Buffered Saline | BioWhitaker | 17-512F | also sold by a number of other vendors | |
| 15 mL centrifuge tubes, polypropylene | Corning | 430790 | ||
| 6 well plates with lid | Becton Dickinson Labware | 353046 | ||
| Iris forceps, straight, serrated tips | World Precision Instruments | 15914 | best to have a pair of these instruments | |
| Iris dissecting scissors, straight, sharp | World Precision Instruments | 14393 | ||
| Needle Holder (regular) | World Precision Instruments | 14109 | ||
| Needle Holder (Castroviejo) | World Precision Instruments | 14137 | ||
| Cidex Plus | World Precision Instruments | 7364 | instruments should be autoclaved periodically, but may also be sterilized by soaking in Cidex | |
| 6-0 or 7-0 suture | for cecum; courtesy of Department of Surgery, UCSF | |||
| 3-0 or 4-0 suture | for abd wall; courtesy of Department of Surgery, UCSF | |||
| Anesthetic machine / Isoflurane | J.A. Baulch and Associates | 3206 | also sold by a number of other vendors | |
| Heating Pad, disposable, 6″ x 6″ | Prism Technologies | 20419 | ||
| Tape, orange, 13 mm x 13 m | Fisher Scientific | 15901F | for restraining anesthetized mouse | |
| Pro-Cord/Cordless Trimmer | Oster | 78997-010 | for shaving mouse fur | |
| Betadine | Fisher Scientific | 19-027132 | may also be purchased at any medical supply store | |
| 2 x 2 gauze, 3-ply | Johnson and Johnson | 7635 | may also be purchased at any medical supply store | |
| Sterile Field, Barrier, 16″ x 29″ | Johnson and Johnson | 0905 | may also be purchased at any medical supply store | |
| Cotton tipped applicators, 6″ | Fisher Scientific | 14-960-3Q | may also be purchased at any medical supply store | |
| Syringe, 10 cc, Luer lock tip | BD | 309604 | ||
| Syringe, 1 cc, tuberculin, slip tip | BD | 309602 | ||
| 27 1/2 G needle | BD | 305109 | ||
| 30 G needle | BD | 305106 |
References
- Heijstek, M. W., Kraneburg, O., Rinkes Borel, I. H. Mouse models of colorectal cancer and liver metastases. Dig Surg. 22, 16-25 (2005).
- Kobaek-Larsen, M., Thorup, I., Diederichsen, A., Fenger, C., Hoitinga, M. R. Review of colorectal cancer and its metastases in rodent models: comparative aspects with those in humans. Comp Med. 50, 16-26 (2000).
- Wilmanns, C., Fan, D., O'Brian, C. A., Bucana, C. D., Fidler, I. J. Orthotopic and ectopic organ environments differentially influence the sensitivity of murine colon carcinoma cells to doxorubicin and 5-fluorouracil. Int J Cancer. 52, 98-104 (1992).
- Kashtan, H., Rabau, M., Mullen, J. B., Wong, A. H. C., Roder, J. C., Shiptz, B., Stern, H. S., Gallinger, S. Intra-rectal injection of tumor cells: a novel animal model of rectal cancer. Surg Oncol. 1, 251-256 (1992).
