대장암의 Orthotopic 마우스 모델
Summary
이게 맹장에 피하 종양의 조각의 cecal 벽이나 이식으로 암 세포 현탁액의 주입 : 두 기술이 모델을 확립하는 데 사용할 수 있습니다. 이 모델은 대장암의 자연 진행을 공부하고 대장암에 대한 새로운 치료 요원을 테스트하는 데 유용합니다.
Abstract
전통 피하 종양 모델은 대장암을 연구에 이상적보다 적습니다. 그들의 자연적인 위치에 성장하는 암 세포를 특징 대장암의 Orthotopic 마우스 모델, 높은 성실과 인간의 질병을 복제합니다. 두 기술은이 모델을 수립하는 데 사용할 수 있습니다. 두 기술과 유사하며 맹장의 노출에 대한 마우스 마취와 개복술을 필요로합니다. 한 기술은 cecal 벽에 대장암의 세포 현탁액의 주입을 포함한다. 암 세포 먼저, 문화, 재배 때 subconfluent 수확 및 단일 세포 현탁액으로 준비하고 있습니다. 세포의 작은 볼륨 누출을 피하기 위해 천천히 주입합니다. 다른 기술은 맹장에 피하 종양의 조각의 이식을 포함한다. 이전에 설립 피하 대장암 종양을 가진 마우스는 euthanized되고 종양은 멸균 기술을 사용하여 제거됩니다. 종양이 작품은 다른 마우스에 이식을위한 작은 조각으로 나뉘어져 있습니다. 이전 이식하는 cecal 벽은 가볍게 종양 세포 침투를 용이하게하기 위해 손상되었습니다. 차 종양과 간 metastases을 개발하는 시간은 기술, 세포주, 및 사용 마우스 종류에 따라 달라집니다. 이 orthotopic 마우스 모델은 대장암의 자연 진행을 공부하고 대장암에 대한 새로운 치료 요원을 테스트하는 데 유용합니다.
Protocol
Discussion
마우스 피하 종양 모델 확립 및 모니터링 쉬운 있지만,이 모델은 대장암의 원래 해부 사이트를 복제할 수 없다는 분명하다. microenvironment의 차이로 인해, 피부 아래에 성장 대장암 세포들은 표현형을 변경하고 거의 항상 1,2를 진보와 전이에 실패 표시되었습니다. 사실, 치료 종양 반응은 암세포가 이소성 (피하) 대 orthotopic 위치 3의 이식 여부에 따라 크게 달라질 수 있습니다. 그들의 자연적인 위?…
Acknowledgements
외과 계열, 캘리포니아 대학, 샌프란 시스코
레이몬드 샤힌, MD
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Cell culture media and components | will vary depending on cell line used | |||
| Phosphate Buffered Saline | BioWhitaker | 17-512F | also sold by a number of other vendors | |
| 15 mL centrifuge tubes, polypropylene | Corning | 430790 | ||
| 6 well plates with lid | Becton Dickinson Labware | 353046 | ||
| Iris forceps, straight, serrated tips | World Precision Instruments | 15914 | best to have a pair of these instruments | |
| Iris dissecting scissors, straight, sharp | World Precision Instruments | 14393 | ||
| Needle Holder (regular) | World Precision Instruments | 14109 | ||
| Needle Holder (Castroviejo) | World Precision Instruments | 14137 | ||
| Cidex Plus | World Precision Instruments | 7364 | instruments should be autoclaved periodically, but may also be sterilized by soaking in Cidex | |
| 6-0 or 7-0 suture | for cecum; courtesy of Department of Surgery, UCSF | |||
| 3-0 or 4-0 suture | for abd wall; courtesy of Department of Surgery, UCSF | |||
| Anesthetic machine / Isoflurane | J.A. Baulch and Associates | 3206 | also sold by a number of other vendors | |
| Heating Pad, disposable, 6″ x 6″ | Prism Technologies | 20419 | ||
| Tape, orange, 13 mm x 13 m | Fisher Scientific | 15901F | for restraining anesthetized mouse | |
| Pro-Cord/Cordless Trimmer | Oster | 78997-010 | for shaving mouse fur | |
| Betadine | Fisher Scientific | 19-027132 | may also be purchased at any medical supply store | |
| 2 x 2 gauze, 3-ply | Johnson and Johnson | 7635 | may also be purchased at any medical supply store | |
| Sterile Field, Barrier, 16″ x 29″ | Johnson and Johnson | 0905 | may also be purchased at any medical supply store | |
| Cotton tipped applicators, 6″ | Fisher Scientific | 14-960-3Q | may also be purchased at any medical supply store | |
| Syringe, 10 cc, Luer lock tip | BD | 309604 | ||
| Syringe, 1 cc, tuberculin, slip tip | BD | 309602 | ||
| 27 1/2 G needle | BD | 305109 | ||
| 30 G needle | BD | 305106 |
References
- Heijstek, M. W., Kraneburg, O., Rinkes Borel, I. H. Mouse models of colorectal cancer and liver metastases. Dig Surg. 22, 16-25 (2005).
- Kobaek-Larsen, M., Thorup, I., Diederichsen, A., Fenger, C., Hoitinga, M. R. Review of colorectal cancer and its metastases in rodent models: comparative aspects with those in humans. Comp Med. 50, 16-26 (2000).
- Wilmanns, C., Fan, D., O'Brian, C. A., Bucana, C. D., Fidler, I. J. Orthotopic and ectopic organ environments differentially influence the sensitivity of murine colon carcinoma cells to doxorubicin and 5-fluorouracil. Int J Cancer. 52, 98-104 (1992).
- Kashtan, H., Rabau, M., Mullen, J. B., Wong, A. H. C., Roder, J. C., Shiptz, B., Stern, H. S., Gallinger, S. Intra-rectal injection of tumor cells: a novel animal model of rectal cancer. Surg Oncol. 1, 251-256 (1992).
