مثلي الفأر نموذج من سرطان القولون والمستقيم
Summary
ويمكن استخدام اثنين من التقنيات لإنشاء هذا النموذج : حقن الخلايا السرطانية تعليق في الحائط الأعور أو زرع قطعة من ورم تحت الجلد على الأعور. هذا النموذج هو مفيد لدراسة التطور الطبيعي لسرطان القولون والمستقيم واختبار عوامل علاجية جديدة ضد سرطان القولون والمستقيم.
Abstract
الورم تحت الجلد التقليدية النموذج هو أقل من مثالية لدراسة سرطان القولون والمستقيم. نماذج الماوس مثلي من سرطان القولون والمستقيم ، والتي تتميز الخلايا السرطانية المتزايدة في مواقعها الطبيعية ، وتكرار الأمراض التي تصيب البشر مع الدقة العالية. ويمكن استخدام اثنين من التقنيات لإنشاء هذا النموذج. كلا تقنيات متشابهة وتتطلب تخدير الماوس والبطن عن التعرض للالأعور. أسلوب واحد ينطوي على حقن الخلايا السرطانية تعليق القولون الأعور في الحائط. first تزرع الخلايا السرطانية في الثقافة ، وعندما تحصد subconfluent وأعد تعليق خلية واحدة. يتم حقن كمية صغيرة من الخلايا ببطء لتجنب تسرب. تقنية أخرى تتضمن زرع قطعة من ورم تحت الجلد على الأعور. والموت الرحيم والفأر مع وجود ورم في السابق تحت الجلد والقولون والمستقيم هو إزالة الورم باستخدام تقنية معقمة. يتم تقسيم قطعة الورم إلى أجزاء صغيرة لزرعها لآخر الماوس. قبل الزرع ، معطوب طفيفة الأعوري الجدار لتسهيل تسلل خلية الورم. والوقت لتطوير أورام الكبد الأولية والانبثاث تختلف تبعا للتقنية ، خط الخلية ، وأنواع الماوس المستخدمة. هذا نموذج الفأر مثلي مفيد لدراسة تطور طبيعي لسرطان القولون والمستقيم واختبار وكلاء علاجية جديدة ضد سرطان القولون والمستقيم.
Protocol
Discussion
على الرغم من أن نماذج الماوس ورم تحت الجلد من السهل إنشاء ورصد ، فمن الواضح أن هذا النموذج لا يمكن نسخ الموقع الأصلي التشريحية لسرطان القولون والمستقيم. بسبب الاختلاف في المكروية ، وقد تبين أن خلايا سرطان القولون والمستقيم النامي تحت الجلد لتغيير النمط الظاهري ، وتقريبا دائما ت…
Acknowledgements
قسم الجراحة في جامعة كاليفورنيا في سان فرانسيسكو
ريمون شاهين ، MD
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Cell culture media and components | will vary depending on cell line used | |||
| Phosphate Buffered Saline | BioWhitaker | 17-512F | also sold by a number of other vendors | |
| 15 mL centrifuge tubes, polypropylene | Corning | 430790 | ||
| 6 well plates with lid | Becton Dickinson Labware | 353046 | ||
| Iris forceps, straight, serrated tips | World Precision Instruments | 15914 | best to have a pair of these instruments | |
| Iris dissecting scissors, straight, sharp | World Precision Instruments | 14393 | ||
| Needle Holder (regular) | World Precision Instruments | 14109 | ||
| Needle Holder (Castroviejo) | World Precision Instruments | 14137 | ||
| Cidex Plus | World Precision Instruments | 7364 | instruments should be autoclaved periodically, but may also be sterilized by soaking in Cidex | |
| 6-0 or 7-0 suture | for cecum; courtesy of Department of Surgery, UCSF | |||
| 3-0 or 4-0 suture | for abd wall; courtesy of Department of Surgery, UCSF | |||
| Anesthetic machine / Isoflurane | J.A. Baulch and Associates | 3206 | also sold by a number of other vendors | |
| Heating Pad, disposable, 6″ x 6″ | Prism Technologies | 20419 | ||
| Tape, orange, 13 mm x 13 m | Fisher Scientific | 15901F | for restraining anesthetized mouse | |
| Pro-Cord/Cordless Trimmer | Oster | 78997-010 | for shaving mouse fur | |
| Betadine | Fisher Scientific | 19-027132 | may also be purchased at any medical supply store | |
| 2 x 2 gauze, 3-ply | Johnson and Johnson | 7635 | may also be purchased at any medical supply store | |
| Sterile Field, Barrier, 16″ x 29″ | Johnson and Johnson | 0905 | may also be purchased at any medical supply store | |
| Cotton tipped applicators, 6″ | Fisher Scientific | 14-960-3Q | may also be purchased at any medical supply store | |
| Syringe, 10 cc, Luer lock tip | BD | 309604 | ||
| Syringe, 1 cc, tuberculin, slip tip | BD | 309602 | ||
| 27 1/2 G needle | BD | 305109 | ||
| 30 G needle | BD | 305106 |
References
- Heijstek, M. W., Kraneburg, O., Rinkes Borel, I. H. Mouse models of colorectal cancer and liver metastases. Dig Surg. 22, 16-25 (2005).
- Kobaek-Larsen, M., Thorup, I., Diederichsen, A., Fenger, C., Hoitinga, M. R. Review of colorectal cancer and its metastases in rodent models: comparative aspects with those in humans. Comp Med. 50, 16-26 (2000).
- Wilmanns, C., Fan, D., O'Brian, C. A., Bucana, C. D., Fidler, I. J. Orthotopic and ectopic organ environments differentially influence the sensitivity of murine colon carcinoma cells to doxorubicin and 5-fluorouracil. Int J Cancer. 52, 98-104 (1992).
- Kashtan, H., Rabau, M., Mullen, J. B., Wong, A. H. C., Roder, J. C., Shiptz, B., Stern, H. S., Gallinger, S. Intra-rectal injection of tumor cells: a novel animal model of rectal cancer. Surg Oncol. 1, 251-256 (1992).
