PRP als neuer Ansatz, um eine Infektion zu verhindern: Vorbereitung und<em> In-vitro-</em> Antimikrobielle Eigenschaften von PRP
Summary
Implantat-assoziierten Infektion ist eine signifikante klinische Komplikation. Diese Studie beschreibt einen Ansatz mit plättchenreichem Plasma (PRP) zu implantieren-assoziierten Infektionen zu verhindern, stellt das Protokoll zur Herstellung PRP mit konstanter Blutplättchenkonzentration, und meldet die neu identifizierten antimikrobiellen Eigenschaften von PRP und verwandten Protokollen für die Prüfung wie antimikrobielle Eigenschaften<em> In vitro.</em
Abstract
Implantat-assoziierte Infektion wird immer schwieriger, die Healthcare-Industrie weltweit durch die zunehmende Antibiotika-Resistenz, die Übertragung von Antibiotika-resistenten Bakterien zwischen Tieren und Menschen, und die hohen Kosten der Behandlung von Infektionen.
In dieser Studie offenbaren wir eine neue Strategie, die wirksam bei der Verhinderung Implantat-assoziierten Infektion basierend auf den potentiellen antimikrobiellen Eigenschaften von plättchenreichem Plasma (PRP) kann. Aufgrund seiner gut untersuchten Eigenschaften zur Förderung der Heilung hat PRP (ein biologisches Produkt) zunehmend für klinische Anwendungen einschließlich der orthopädischen Operationen, parodontalen und oralen Chirurgie, Kiefer-Operationen, Schönheitsoperationen, Sportmedizin, etc. verwendet
PRP könnte eine erweiterte Alternative zu herkömmlichen Antibiotika zu verhindern Implantat-assoziierten Infektionen. Der Einsatz von PRP kann vorteilhaft sein, im Vergleich zu herkömmlichen Antibiotika since PRP ist weniger wahrscheinlich zu Antibiotikaresistenz induzieren und PRP Die antimikrobielle und Heilung fördernden Eigenschaften können einen synergistischen Effekt auf die Infektionsprävention haben. Es ist wohlbekannt, daß Erreger und menschliche Zellen werden für Implantatoberflächen Renn, und PRP die Eigenschaften der Förderung der Heilung könnte menschlichen Zellanheftung zu verbessern wodurch die Chancen für Infektion. Darüber hinaus ist PRP inhärent biokompatibel und sicher und frei von der Gefahr von übertragbaren Krankheiten.
Für unsere Studie haben wir verschiedene klinische Bakterienstämme, die üblicherweise in der orthopädischen Infektionen gefunden und untersucht, ob PRP in vitro antimikrobielle Eigenschaften gegen diese Bakterien ausgewählt hat. Wir haben PRP hergestellt unter Verwendung eines doppelten Zentrifugation Ansatz, der die gleiche Thrombozytenkonzentration für alle Proben erhalten werden können. Wir haben konsequente antimikrobielle Ergebnisse erreicht und festgestellt, dass PRP starke weist in vitro eine antimikrobielle Eigenschaften gegen Bakterien wie methicillin-sensitiv und Methicillin-resistenten Staphylococcus aureus, Streptococcus der Gruppe A, und Neisseria gonorrhoeae. Daher kann der Einsatz von PRP haben das Potenzial, Infektion zu verhindern und die Notwendigkeit für kostspielige Nachbehandlung von Implantat-assoziierten Infektionen zu reduzieren.
Introduction
Implantat-assoziierten Infektion eine signifikante klinische Komplikation. Staphylococcus aureus (S. aureus) ist eine der häufigsten Mikroorganismen aus Implantat-assoziierten Infektionen isoliert. Es ist geeignet zur Herstellung einer Biofilm, die die Oberflächen von Implantaten abdeckt und kann zu antibiotikaresistenten Infektion 1,2 führen. Behandlung von Implantat-assoziierten Infektionen erfordert häufig langfristige Krankenhausaufenthalte für wiederholte Debridements und verlängerte parenterale antibiotische Therapie. In antibiotikaresistente Fällen kann die Entfernung des Implantats erforderlich sein. Die steigende Resistenz von Bakterien gegen Antibiotika hat auch wurde von den Centers for Disease Control and Prevention (CDC) als "eines der weltweit drängendsten Gesundheitsprobleme." In der Zeit, ohne die Entwicklung von neuen und wirksame antimikrobielle Behandlungen, ist es möglich, dass multiresistenten Krankheitserreger werden mit herkömmlichen Antibiotika behandelbar. Prävention von Implantat-assoziiertenInfektion ist daher wichtig und neuartige prophylaktische Mittel oder Ansätze zur Verhinderung solcher Infektionen benötigt.
Platelet-Rich Plasma (PRP) ist eine Konzentration von Eigenblut, die über 30 Wachstumsfaktoren, die mit Knochen und Knochenersatzmaterialien Heilung 3-5 helfen kann enthält. Die Anwendung des PRP, um Knochenregeneration und Weichgewebe Reifung Verbesserung wurde zunehmend in Kliniken wegen seiner hohen Konzentration verschiedener Wachstumsfaktoren durch Plättchen freigesetzt gemeldet.
Mehrere Merkmale des PRP zeigen, dass PRP kann auch antimikrobielle Eigenschaften 9.6. PRP enthält eine Vielzahl von Plättchen, die eine hohe Konzentration von Leukozyten (der Host-Abwehrmaßnahmen gegen Bakterien und Pilze besitzen) und mehrere antimikrobielle Peptide 7,8,10. In einer aktuellen Studie von einer großen Kohorte von herzchirurgischen Patienten zeigte sich, dass die intraoperative Anwendung von PRP-Gel während Wundverschluss significantly verringert das Auftreten von oberflächlichen und tiefen Brustbein Infektion 11. Aus diesen Gründen und Beobachtungen stellten wir die Hypothese, dass PRP, neben seiner gut untersuchten die Heilung fördernden Eigenschaften hat antimikrobielle Eigenschaften. Die potentiellen Vorteile der Verwendung von PRP eine Infektion verhindern können gehören: (i) PRP ist weniger wahrscheinlich, Resistenz zu induzieren im Vergleich zu herkömmlichen Antibiotika. (Ii) PRP hat auch Eigenschaften, Heilung, die eine synergistische Wirkung auf Infektionsprävention aufweisen kann fördern; PRP die Heilung fördernden Eigenschaften könnten eine Dichtung zu schaffen, um bakterielle Anbringung verhindern wodurch die Chancen für Infektion als Krankheitserreger und menschlichen Zellen für Implantatoberflächen 12 sind Rennen , 13. (Iii) PRP ist inhärent biokompatibel und sicher und frei von der Gefahr von übertragbaren Krankheiten.
Unser langfristiges Ziel ist es, PRP als neuer Ansatz verwenden, um Implantat-assoziierten infecti verhindernons. Das Ziel dieser Studie war es, PRP Vorbereitung mit einem doppelten Zentrifugation Ansatz, PRP in vitro antimikrobielle Eigenschaften zu untersuchen und die Protokolle zur Auswertung wie antimikrobielle Eigenschaften zu beschreiben.
Protocol
Representative Results
Discussion
Platelet-Rich Plasma wurde zunehmend für klinische Anwendungen aufgrund seiner Heilung fördernden Eigenschaften 15-17 verwendet. In der vorliegenden Studie wurde PRP als neuer Ansatz für die Infektionsprävention vorgestellt. PRP wurde festgestellt, dass starke antimikrobielle Eigenschaften gegen MRSA, MSSA, Gruppe A Streptococcus und Neisseria gonorrhoeae haben. Die wichtigsten Vorteile von PRP im Vergleich zu konventionellen Antibiotika, für Infektionsprävention gehören: (1) Aktuelle…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Die Autoren danken Therwa Hamza, John E. Tidwell, Nina Clovis und Suzanne Smith für experimentelle Unterstützung und Suzanne Smith für das Korrekturlesen. Die Autoren danken John Thomas, PhD für die Bereitstellung der bakteriellen klinischen Isolaten und John B. Barnett, PhD für seine Unterstützung und die Nutzung der biologischen Sicherheit Labor an der Abteilung für Mikrobiologie, Immunologie und Zellbiologie an der West Virginia University. Die Autoren danken für die finanzielle Unterstützung durch die Osteosynthese und Trauma Care Foundation und der National Science Foundation (# 1003907). Microscope Experimente und Bildanalyse wurden auch in der West Virginia University Imaging Facility, die zum Teil von der Mary Babb Randolph Cancer Center und NIH P20 RR016440 unterstützt wird durchgeführt.
Verwendung von Tieren für die Blutabnahmen wurden von der West Virginia University Institutional Animal Care und Use Committee genehmigt. Alle Experimente wurden in Übereinstimmung mit allen relevanten guidelin hingerichtetes, Vorschriften und Regulierungsbehörden.
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| Bovine thrombin | King Pharmaceuticals, Inc | 60793-215-05 | Thrombin (bovine origin) |
| Calcium chloride | King Pharmaceuticals, Inc | 60793-215-05 | 10% calcium chloride |
| Ethanol | Sigma-Aldrich | E7023 | |
| Isoflurane | Baxter | 1001936060 | |
| Mueller Hinton broth | Becton, Dickinson and Company | 275710 | |
| Phosphate-buffered saline | Sigma-Aldrich | D8662 | |
| Tri-sodium citrate | Sigma-Aldrich | W302600 | |
| Tryptic soy agar | Fisher Scientific | R01202 | |
| Centrifuge | Kendro Laboratory Products | 750043077 | |
| Syringe filter | Millipore | SLGP033RS |
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