Summary

준비를 한 다음 감염을 방지하기 위해 새로운 접근 방식으로 PRP<em> 체외에서</emPRP의> 항균 속성

Published: April 09, 2013
doi:

Summary

임플란트 – 관련 감염은 중요한 임상 합병증입니다. 이 연구는 임플란트 – 관련 감염을 방지하기 위해 혈소판이 풍부한 혈장 (PRP)를 사용하여 접근 방식을 설명 지속적인 혈소판 농도와 PRP를 준비 프로토콜을 제시하고, PRP의 새로 확인 된 항균 특성 및 항균 특성을 조사에 대한 관련 프로토콜을보고<em> 체외 인치</em

Abstract

임플란트 – 관련 감염 항생제 저항, 동물과 인간 사이의 항생제 내성 박테리아의 전송과 감염을 치료의 높은 비용을 증가로 인해 점점 더 의료 산업에 더 도전 세계적되고 있습니다.

본 연구에서는, 우리는 혈소판이 풍부한 혈장 (PRP)의 잠재적 인 항균 특성을 바탕으로 임플란트 – 관련 감염을 예방에 효과가있을 수 있습니다 새로운 전략을 공개. 치유를 촉진위한 잘 연구 특성으로 인해, PRP는 (생물 제품) 점점 정형 외과 수술, 치주 및 구강 수술, 악안면 수술, 플라스틱 수술, 스포츠 의학 등 임상 응용에 사용되었습니다

PRP는 임플란트 – 관련 감염을 예방 기존의 항생제 치료에 대한 고급 대안이 될 수 있습니다. PRP의 사용은 기존의 항생제 치료시에 비해 유리할 수있다PRP는 항생제 저항을 유도 할 수 있고 PRP의 항균 및 치료 – 홍보 속성이 감염 예방에 시너지 효과가있을 수 있습니다 적은 가능성이 nce. 그것은 잘 병원균과 인간의 세포가 이식 표면에 경주하는 알려져 있으며, 홍보 치유의 PRP의 속성함으로써 감염 가능성을 줄여 인간의 세포 첨부 파일을 향상 수 있습니다. 또한, PRP는 본질적으로 biocompatible하고, 안전하고 전도 할 수있는 질병의 위험에서 무료입니다.

우리의 연구를 들어, 우리는 일반적으로 정형 외과 감염에서 발견하고 PRP이 박테리아에 대한 체외 항균 속성에 있는지 여부를 검사 몇 가지 임상 박테리아 변종을 선택했습니다. 우리는 같은 혈소판 농도가 모든 샘플에 대해 얻을 수 할 수있는 두 번 원심 분리 방식을 사용하여 PRP를 준비했습니다. 우리는 일관성있는 항균 결과를 달성하고 PRP는 methi 같은 세균에 대한 시험 관내 항균 속성에 강한 것으로 나타났습니다cillin에 민감한와 methicillin – 내성 황색 포도상 구균, 그룹 연쇄상 구균과 Neisseria gonorrhoeae. 따라서, PRP의 사용은 감염을 예방하고 임플란트 – 관련 감염의 비용이 많이 드는 수술 치료의 필요성을 줄일 수있는 가능성이있을 수 있습니다.

Introduction

임플란트 – 관련 감염은 상당한 임상 합병증입니다. 포도상 구균 (S. 구균)이 임플란트 – 관련 감염으로부터 격리 가장 흔한 미생물 중 하나입니다. 그것은 임플란트의 표면을 커버하고 항생제 내성 감염 1,2으로 이어질 수있는 biofilm을 생산 할 수 있습니다. 임플란트 – 관련 감염의 치료가 자주 반복 ​​debridements과 장기간 비경 항생제 치료 장기 입원이 필요합니다. 항생제 내성의 경우, 보형물의 제거가 필요할 수 있습니다. 항생제에 대한 박테리아의 증가 저항도 등의 질병 통제 및 예방 (CDC)의 센터에 의해 참조되었습니다 "세계에서 가장 급박 한 건강 문제 중 하나입니다." 시간이, 새로운과 효과적인 항균 요법의 개발없이, 그것은 다중 약물 내성 병원균은 기존의 항생제와 untreatable 될 가능성이 있습니다. 임플란트 – 관련 예방감염 것이 중요하며, 새로운 예방 대리인 또는 접근 방법은 이러한 감염을 예방하기 위해 필요합니다.

혈소판이 풍부한 혈장 (PRP)은 뼈와 뼈 이식 치료 3-5으로 도움을 줄 수 30 성장 요인을 포함 autologous 혈액의 농도이다. 뼈 재생과 부드러운 조직 성숙을 향상시키는 PRP의 응용 프로그램이 점점 때문에 혈소판에 의해 발표 다양한 성장 요인의 높은 농도의 병원에서보고되었습니다.

PRP의 여러 특성은 PRP는 항균 특성에게 6-9있을 수 있습니다 것으로 나타났습니다. PRP는 혈소판의 큰 번호, 백혈구의 높은 농도 (세균 및 곰팡이에 대한 호스트 방어 동작을 가지고 할 수있는), 그리고 여러 항균 펩티드 7,8,10가 포함되어 있습니다. 심장 수술 환자의 큰 일대의 최근 연구에서,이 드러났다 그 상처 폐쇄 signif 동안 PRP-젤의 intraoperative 사용icantly 표면과 깊은 가슴 감염 (11)의 발생률을 감소. 이러한 이유와 관찰의 경우, 우리는 PRP는 그 잘 공부 치료 – 추진 특성 외에, 항균 특성을 가지고 가상. 감염을 방지하기 위해 PRP를 사용하는 잠재적 인 장점이 포함될 수 있습니다 :은 (i) PRP는 기존의 항생제 치료에 비해 저항을 유도 할 가능성이 적습니다. PRP의 치료 – 홍보 특성은 병원균과 인간의 세포가 이식 표면 12 질주를하고 같이함으로써 감염 가능성을 줄여 세균 첨부 파일을 방지하기 위해 인감을 제공 할 수 경우, (ii) PRP는 감염 예방에 시너지 효과가있을 수 있습니다 치유를 촉진 속성을 가지고 있습니다 13. (III) PRP는 본질적으로 biocompatible하고, 안전하고 전도 할 수있는 질병의 위험에서 무료입니다.

우리의 장기 목표는 임플란트 – 관련 infecti을 방지하기 위해 새로운 접근 방법으로 PRP를 사용하는 것입니다기능. 본 연구의 목적은 체외 항균 속성에 PRP의를 검사하기 위해, 두 번 원심 분리 방식을 사용하여 PRP를 준비하고, 이러한 항균 속성을 평가하기위한 프로토콜을 설명하는 것이 었습니다.

Protocol

1. 준비와 PRP의 활성화 1.1 혈액 무승부 isoflurane의 흡입 (유도를위한 O 2 2 % 유지 보수 1 %)에서 토끼를 마취. 20 ML의 주사기로 2 ML 0.129 M 트라이 – 나트륨 구연산을 (anticoagulent 솔루션)립니다. 트라이 나트륨 구연산 솔루션은 50 ML 증류수 H 2 O에 1.897 g 트라이 – 나트륨 구연산을 용해하고 0.22 μm 살균 필터로 필터링하여 준비가되어 있습니다. 70 %…

Representative Results

PRP는 reproducibly 두 번 원심 분리 방식 (그림 1)를 사용하여 준비가되어 있습니다. PRP는 methicillin 내성 S.에 대한 체외 항균 속성에 (CFUs에서 최대 100 배 감소) 강한 제시 찾을 수 있습니다 구균 (MRSA) (그림 3)은, 그는 일반적으로 전세계 병원 14에서 발견됩니다. 마찬가지로, PRP는 methicillin에 민감한 S.에 대한 강력한 항균 특성을 가지고…

Discussion

혈소판이 풍부한 혈장은 점점 그 치유 – 홍보 등록 15-17으로 인해 임상 응용에 사용되었습니다. 본 연구에서는 PRP는 감염 예방을위한 새로운 접근 방법으로 제시되었다. PRP는 MRSA, MSSA, 그룹 연쇄상 구균Neisseria gonorrhoeae에 대한 강력한 항균 특성을 가지고 발견되었습니다. 기존의 항생제 치료에 비해 PRP의 주요 장점은, 감염 예방을 위해 포함 : (1) 현재 항생제 치료는 점점 ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

저자는 Therwa 함자, 존 E. Tidwell, 니나 클로비스, 그리고 실험 지원 및 교정을위한 수잔 스미스 수잔 스미스 감사드립니다. 저자는 자신의 지원과 미생물학, 면역학 및 웨스트 버지니아 대학에서 세포 생물학의 부에있는 생물 안전 실험실의 사용에 대한 세균의 임상 격리하고 존 B. 바넷, 박사 학위를 제공하는 존 토마스, 박사 학위를 감사합니다. 저자 Osteosynthesis 및 외상 관리 재단과 국립 과학 재단 (National Science Foundation) (# 1003907)에서 재정 지원을 인정합니다. 현미경 실험 및 이미지 분석도 메리 Babb 랜돌프 암 센터와 NIH 보조금 P20 RR016440에 의해 부분적으로 지원되는 웨스트 버지니아 대학 이미징 시설에서 수행되었다.

피를 동물 사용은 웨스트 버지니아 대학 기관 동물 케어 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다립니다. 모든 실험은 모든 관련 guidelin을 준수 실행 된어, 규정 및 규제 기관.

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Bovine thrombin King Pharmaceuticals, Inc 60793-215-05 Thrombin (bovine origin)
Calcium chloride King Pharmaceuticals, Inc 60793-215-05 10% calcium chloride
Ethanol Sigma-Aldrich E7023
Isoflurane Baxter 1001936060
Mueller Hinton broth Becton, Dickinson and Company 275710
Phosphate-buffered saline Sigma-Aldrich D8662
Tri-sodium citrate Sigma-Aldrich W302600
Tryptic soy agar Fisher Scientific R01202
Centrifuge Kendro Laboratory Products 750043077
Syringe filter Millipore SLGP033RS

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Cite This Article
Li, H., Li, B. PRP as a New Approach to Prevent Infection: Preparation and In vitro Antimicrobial Properties of PRP. J. Vis. Exp. (74), e50351, doi:10.3791/50351 (2013).

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