Summary

膵臓癌の進行の生物発光同所性モデル

Published: June 28, 2013
doi:

Summary

膵臓癌生物学の理解の向上は非常に重要膵臓癌を治療するための良好な治療選択肢の開発を可能にするために必要とされる。このニーズに対応するために、我々は使用して癌の進行の非侵襲的なモニタリングを可能に膵臓癌の同所性モデルを示す<em生体内で></em>生物発光イメージング。

Abstract

<p class="jove_content">膵臓癌は4〜6%の極めて悪い5年生存率を有している。新たな治療オプションが批判​​的に必要であり、膵臓癌生物学の理解の向上に依存している。良好な膵微小環境とがん細胞との相互作用を理解するために、我々は、癌の進行の非侵襲的なモニタリングを可能に膵臓癌の同所性モデルを示す。ルシフェラーゼタグ付き膵臓癌細胞をマトリゲル中に再懸濁し、開腹時に膵尾部に送達される。マトリゲルは、注入時のがん細胞の漏れを防止するために体温で固化する。遠隔臓器に原発腫瘍の増殖や転移を使用して、ルシフェラーゼ基質ルシフェリンの注射後に監視されている<em生体内で></em癌細胞の生物発光の>撮像。<em生体内で></em>イメージングは​​また、切除後の原発腫瘍の再発を追跡するために使用することができる。このモデルは、同所性異種移植モデルと同系の両方に適しており、一次膵臓腫瘍および転移の増殖に対する新規抗癌治療の影響を調査するための前臨床試験で使用されてもよい。</p>

Introduction

膵臓癌は4〜6%の5年生存率は、癌関連死因の第4位である。患者の1,2だけが15%、手術の対象になる病気の早い段階で十分に診断され、腫瘍が再発している>でこれらの患者の80%は3,4ゲムシタビンは、膵臓腺癌の治療に使用されているが、化学療法耐性が一般的であり、多くの場合、薬物は、全体的な生存率にほとんど影響を与えない。膵臓癌を治療するために5新しい薬理学的戦略が決定的に必要とされる。その開発は、治療的介入に敏感かもしれない病気の進行の重要なステップの大幅に改善理解に依存します。

膵臓癌の同所性モデルは、膵臓癌の生物学を研究するための理想的なツールがそれらを作り、ヒトの疾患の重要な側面をエミュレートする。膵臓癌細胞の挙動のin vitroでの細胞ベースのアッセイとは対照的に6-9dは皮下膵臓癌のin vivoモデルにおいて 、同所性モデルは、膵臓腫瘍細胞微小環境との相互作用の調査を可能にする。病気の進行の速度論は同所性モデルで再現性の高いであり、それらはよく小説治療薬の前臨床試験に適しています短い時間枠(週)にわたって生じる。これにより、疾患発症が長く、より可変時間枠(ヶ月〜1年間)にわたって生じるトランスジェニックモデルとは対照的である。10は、より積極的な細胞株と一緒に使用すると、膵臓癌の同所性モデルは、に見られるものと同様の自然転移のパターンを有する患者はこのようなホタルルシフェラーゼが治療に転移性播種、再発および応答、腫瘍増殖の縦監視を容易にします。6,11のように生物発光レポーター遺伝子の発現は8

ここでは、MATRを利用膵臓癌の同所性モデルを記述腫瘍進行の非侵襲的なモニタリングのためのローカライズされた細胞送達およびin vivoの生物発光イメージングためのIGEL。膵臓癌の同所このモデルは、疾患の進行および同系移植片または異種移植片モデルにおける治療的介入に対する応答の非侵襲的な分析を可能にする。

Protocol

実証されているプロトコルは、著者の機関の動物のケアと使用委員会の指導と承認の下で行われる。すべての実験は、関連するすべてのガイドライン、規制、規制機関に準拠して実行されます。 1。膵臓癌細胞株を形質導入 12,13 PANC-1。前述したように、ルシフェラーゼ発現させる膵臓癌細胞を形質導入し、ホタルルシフェラーゼを形質導入CAPAN-1膵臓癌細?…

Representative Results

この方法は、麻酔導入、開腹、マトリゲル、腹部閉止( 図1A)中の癌細胞の注射を含む外科的処置を用いて膵臓癌の同所性モデルについて説明する。注入された細胞は、膵臓の表面の気泡( 図1B)を形成する。膵臓癌の進行を非侵襲的に癌細胞の増殖と普及し( 図2)を追跡するためにインビボ生物発光撮像で使用して監視することができ?…

Discussion

ここでは、膵臓腫瘍発生および進行の長手方向の評価のための同所性モデルを記述。原発腫瘍増殖動態は、再現性がある( 図3)と非侵襲的に新規抗膵臓癌治療に対する腫瘍の応答の分析のために、例えば 、ルシフェラーゼタグ付き細胞の生物発光撮像を用いてモニターすることができる。ヒトの疾患と一致して、モデルは、膵臓微小環境と腫瘍細胞との相互作用の調査?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、国立保健医療研究評議会、オーストラリア(1008865)、オーストラリアの研究評議会(LE110100125)、国立がん研究所(CA138687-01)によってサポートされていました、エリカ·スローンは、国立乳がんから早期キャリアフェローシップでサポートされています財団、オーストラリア。コリーナキム·フックスは、スイスのがんリーグと薬学部のモナッシュ研究所のHDRの奨学金からのフェローシップでサポートされています。エリアーヌ不安はベルンがんリーグからの助成金によってサポートされています。

Materials

Equipment Company Catalog Number Comments
Clean Bench coat
Heating pad Set to 37 °C
Ivis Lumina ll Bioluminescent imager Caliper Alternative bioluminescent imaging systems include In vivo F PRO (Carestream) and Photon Imager (Biospace Lab)
Dissecting scissors
Iris forceps (serrated)
Needle holder
27 G 0.3 ml insulin syringe Terumo T35525M2913

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Cite This Article
Chai, M. G., Kim-Fuchs, C., Angst, E., Sloan, E. K. Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression. J. Vis. Exp. (76), e50395, doi:10.3791/50395 (2013).

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