Summary

Hücre-malzeme Etkileşim Araştırmalar Nanogözenekli Altın Patterns mikroimalat

Published: July 15, 2013
doi:

Summary

Biz şablon baskı ve fotolitografi, hem de microfabricated desenleri kültür hücreleri yöntemleri ile micropattern nano altın ince filmler için teknikler hakkında rapor. Buna ek olarak, malzeme ve taramalı elektron ve floresan mikroskobu teknikleri kullanılarak kültürlenmiş hücrelerin morfolojisi karakterize etmek için görüntü analiz yöntemleri açıklanmaktadır.

Abstract

Nanometre onlarca özelliği boyutları ile nanoyapılar yakıt hücreleri, biyosensör, biyomedikal cihaz kaplamalar ve ilaç dağıtım araçları da dahil olmak üzere çeşitli teknolojileri, performansını geliştirmiştir. Bir nano ölçekli kendini montaj işlemi tarafından üretilen Nanogözenekli altın (NP-Au), geniş etkili yüzey alanı, yüksek elektrik iletkenliği ve katalitik aktivite sergileyen bir nispeten yeni bir malzemedir. Bu özellikler NP-Au bilimsel topluluk için çekici bir malzeme yaptık. NP-Au ile ilgili çalışmaların çoğu makro ölçekli örnekleri istihdam ve malzeme ve katalitik ve sensör uygulamaları temel bilim odaklanmak. Makro ölçekli örnekler biyomedikal cihaz da dahil olmak üzere minyatür sistemleri, NP-Au potansiyel sınırlar. Bu konuları ele için, başlangıçta sert yüzeylerde micropattern NP-Au ince filmler için iki farklı yöntem tarif. İlk yöntem, whil milimetre ölçekli NP-Au desenleri oluşturmak için elle üretilen şablon maskeler istihdame İkinci yöntem desen alt milimetre ölçekli desen havalanma fotolitografi kullanır. Np-Au ince filmler sıçramasına biriktirme işlemi ile elde edilir, onlar mikro içine basit entegrasyon böylece mükellef geleneksel imalat teknikleri, ile uyumludur. Bu sistemler yüksek etkili yüzey alanı, elektriksel iletkenlik ve altın-tiyol-esaslı yüzey bioconjugation gelen bu fayda elektrikle adresli biyosensör platformlar içerir. Bazı biyosensörler için önemli bir performans parametredir memeli hücreleri ile NP-Au etkileşimi ölçmek için hücre kültürü, immün ve görüntü işleme teknikleri anlatıyoruz. Burada gösterilen teknikleri çeşitli uzunluk-ölçeklerde ve biyosensörler, enerji depolama sistemleri ve katalizörler gibi birçok uygulamalarda platformlarda NP-Au entegrasyonu yardımcı olacağını bekliyoruz.

Introduction

<p class="jove_content"Nano ölçekli özellikleri ile> Malzeme yakıt hücreleri de dahil olmak üzere çeşitli uygulamalar, artırmada söz göstermiştir<sup> 1</sup>, Sensörler<sup> 2,3</sup> Ve biyomedikal cihazlar<sup> 4,5</sup>. Nispeten yeni malzeme bir nano ölçekli kendini montaj işlemi tarafından üretilen nano altın (NP-Au) vardır. NP-Au habercisi en sık atomik yüzde ile% 60 ila% 80 gümüş oluşan bir altın alaşımıdır. Kısaca, karakteristik açık gözenekli nano-gümüş kuvvetli bir asit ile çözülmüş olarak kümelerin altın atomlarının düzenlenmesi sonucudur (<em> Örneğin</em>% 70 nitrik asit) veya bir elektrokimyasal potansiyeli altında<sup> 6-8</sup>. Geniş etkili yüzey alanı dahil olmak üzere birçok arzu özellikleri, yüksek elektriksel iletkenlik, köklü yüzey işlevsellik teknikleri ve biyouyumluluk gelen NP-Au faydaları<sup> 9</sup>. NP-Au ile ilgili çalışmaların hızlı bir genişleme, NP-Au mekanik özellikleri odaklanmak çoğu olmuştur rağmen<sup> 10,11</sup>, Katalitik aktivite<sup> 12</sup> Ve biyomoleküler algılama performansı<sup> 13-15</sup>. Arzu edilen özellikleri çeşitli biyomedikal araçlar için son derece yararlı olsa da<sup> 16,17</sup>, Bu alandaki uygulamalarda sınırlı olmuştur. Bu olası nedenlerinden biri, çoğu çalışmaların ağırlıklı olarak makro ölçekli örnekler kullanmış olan (<em> Örneğin</em> Yaprak, folyo, ve külçe) ve minyatür sistemlerinde NP-Au içeren için teknikleri yetersiz kalmıştır. Aslında NP-Au filmler istihdam geleneksel imalat teknikleri kullanma örnekleri sadece bir avuç vardır<sup> 16-20</sup>. Minyatür teknoloji ve yeni biyomedikal araçlar için ihtiyaç ile birlikte, bu cihazların içine yeni malzemeler entegre edebilmek için önemli hale gelmiştir. Bu, tipik olarak malzeme yatırılır ve bilinen imalat teknikleri ile desenli olabilir gerektirir. Buna ek olarak, hücre-malzeme etkileşimleri hızlı miktar yeni bir malzeme biyouyumluluk değerlendirmek için yaygın olarak gereklidir. Bu yazının amacı micropattern NP-Au filmlere temel teknikleri göstermek ve nanoyapı ve dijital görüntü işleme ile hücre-malzeme etkileşimleri hem ölçümüdür.</p

Protocol

1. Nanogözenekli Altın Fabrikasyon Piranha çözüm temiz yüzeyler Bir kristalizasyon tabağına ve ısı ° C bir ocak 65 karışım, 100 ml sülfürik asit (% 96) 25 ml hidrojen peroksit (% 30) ilave edilir. DİKKAT: sıvılar son derece korozif ve dikkatle ele alınması gerekir. Bu patlayabilir gibi harcanan çözüm, kapalı bir kapta muhafaza edilmemelidir. Yer aside dayanıklı forseps ve 10 dakika boyunca bunları temizlemek kullanılarak karışımın içine 3 inç mikroskop 1-i…

Representative Results

Şekil 1,, kültür hücreleri np-Au desenleri oluşturmak nano miktarının, ve hücre morfolojileri karakterize dahil olmak üzere, büyük prosedür adımları açıklar. Şekil 2a'da gösterildiği gibi elastomer şablon (üst) altına resimlerde gösterildiği NP-Au desen oluşturmak için kullanılır. Şekil 2b, toplu işlem numuneler için porselen kap bir fotoğrafıdır. Şekil 2c, kaplama metal desen renk değişimi gösterir öncesi ve B…

Discussion

Biz mikro ve biyolojik çalışmalar bu filmlerin kullanımı genişletmek için micropattern NP-Au film için iki farklı teknikleri göstermek. Sıçramasına kaplama altın ve gümüş püskürtme Klasik imalat süreçleri ve alaşım bileşimi ve kalınlığı kolayca tek tek püskürtme tabancası güçleri değişen tarafından kontrol (altın ve gümüş hedefleri için) ve edilebilir ile uyumlu olarak, NP-Au desenleri oluşturmak için çok yönlü bir yöntemdir sırasıyla depozisyon süresi. Tipik NP-Au filmi…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

O. Kurtulus ve D Dimlioglu bir California Üniversitesi Laboratuar Ücretleri Araştırma Programı Ödülü 12-LR-237197 tarafından desteklenmektedir. P. Daggumati Bilimleri ve Mühendisliği (RISE) Ödülü California Davis Araştırma Yatırımların bir üniversite tarafından desteklenmektedir. CA Chapman Ulusal Need Arkadaş Grubu eğitim mezun Yardım Alanları Departmanı tarafından desteklenmektedir. Bu çalışma UC Lab Ücretler Araştırma Programı, UC Davis RISE ve Mühendislik start-up fonların UC Davis Koleji tarafından desteklenmiştir.

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Gold target Lesker EJTAUXX403A2 Precursor to alloy for producing np-Au
Chrome target Lesker EJTCRXX353A2 Adhesive layer
Silver target Lesker EJTAGXX403A2 Precursor to alloy for producing np-Au
Porcelain boat Thomas Scientific 8542E40 Used for processing small samples
Nitric acid Sigma-Aldrich 43873 Used at 70% for dealloying
Sulfuric acid J.T Baker 7664-93-9 Used at 96% for piranha cleaning
Hydrogen peroxide J.T Baker 7722-84-1 Used at 30% for piranha cleaning
Biopsy punches Ted Pella 150xx Available in several sizes
Silicone elastomer sheets Rogers Corporation HT 6240 Available in several thicknesses
Hexamethyldisilazane Sigma-Aldrich 440191-100ML Used as adhesion promoter for positive resist
Microposit MF CD26 Shipley 38490 Positive photoresist developer
PRS 3000 J.T Baker JT6403-5 Positive photoresist stripper
Circular glass coverslips (12 mm) Ted Pella 26023 Used as substrate for metal patterns and cell culture
Glass slides (1 x 3 inch) Ted Pella 26007 Used as substrate for metal patterns
Kapton polyimide tape VWR 82030-950 Used for securing elastomer
Transparency masks Output City Used in photolithography http://www.outputcity.com/
Plasma cleaner Harrick Plasma PDC-32G Used for activating glass surfaces
Sputtering machine Kurt J. Lesker LAB18 Used for depositing metals

References

  1. Arico, A. S., Bruce, P., Scrosati, B., Tarascon, J. M., Van Schalkwijk, W. Nanostructured materials for advanced energy conversion and storage devices. Nature Materials. 4, 366-377 (2005).
  2. Roy, S., Gao, Z. Nanostructure-based electrical biosensors. Nano Today. 4, 318-334 (2009).
  3. Chen, C. L., et al. DNA-decorated carbon-nanotube-based chemical sensors on complementary metal oxide semiconductor circuitry. Nanotechnology. 21, 095504 (2010).
  4. Lu, J., Rao, M. P., MacDonald, N. C., Khang, D., Webster, T. J. Improved endothelial cell adhesion and proliferation on patterned titanium surfaces with rationally designed, micrometer to nanometer features. Acta Biomaterialia. 4, 192-201 (2008).
  5. Wagner, V., Dullaart, A., Bock, A. K., Zweck, A. The emerging nanomedicine landscape. Nat. Biotechnol. 24, 1211-1218 (2006).
  6. Weissmüller, J., Newman, R., Jin, H., Hodge, A., Kysar, J. Theme Article – Nanoporous Metals by Alloy Corrosion: Formation and Mechanical Properties. Materials Research Society Bulletin. 34, 577-586 (2009).
  7. Erlebacher, J., Aziz, M., Karma, A., Dimitrov, N., Sieradzki, K. Evolution of nanoporosity in dealloying. Nature. 410, 450-453 (2001).
  8. Okman, O., Lee, D., Kysar, J. W. Fabrication of crack-free nanoporous gold blanket thin films by potentiostatic dealloying. Scripta Mater. 63, 1005-1008 (2010).
  9. Seker, E., Reed, M., Begley, M. Nanoporous Gold: Fabrication, Characterization, and Applications. Materials. 2, 2188-2215 (2009).
  10. Biener, J., et al. Size effects on the mechanical behavior of nanoporous Au. Nano Lett. 6, 2379-2382 (2006).
  11. Senior, N., Newman, R. Synthesis of tough nanoporous metals by controlled electrolytic dealloying. Nanotechnology. 17, 2311-2316 (2006).
  12. Zielasek, V., et al. Gold catalysts: Nanoporous gold foams. Angew. Chem. Int. Ed. 45, 8241-8244 (2006).
  13. Wittstock, A., Biener, J., Bäumer, M. Nanoporous gold: a new material for catalytic and sensor applications. PCCP. 12, 12919-12930 (2010).
  14. Shulga, O., et al. Preparation and characterization of porous gold and its application as a platform for immobilization of acetylcholine esterase. Chem. Mater. 19, 3902 (2007).
  15. Shulga, O., Zhou, D., Demchenko, A., Stine, K. Detection of free prostate specific antigen (fPSA) on a nanoporous gold platform. The Analyst. 133, 319-322 (2008).
  16. Seker, E., et al. The fabrication of low-impedance nanoporous gold multiple-electrode arrays for neural electrophysiology studies. Nanotechnology. 21, 125504 (2010).
  17. Seker, E., Berdichevsky, Y., Staley, K. J., Yarmush, M. L. Microfabrication-Compatible Nanoporous Gold Foams as Biomaterials for Drug Delivery. Advanced Healthcare Materials. 1, 172-176 (2012).
  18. Okman, O., Kysar, J. W. Microfabrication of Nanoporous Gold. Nanoporous Gold: From an Ancient Technology to a High-Tech Material. 22, 69 (2012).
  19. Lee, D., et al. Microfabrication and mechanical properties of nanoporous gold at the nanoscale. Scripta Mater. 56, 437-440 (2007).
  20. Seker, E., et al. The effects of post-fabrication annealing on the mechanical properties of freestanding nanoporous gold structures. Acta Mater. 55, 4593-4602 (2007).
  21. Parida, S., et al. Volume change during the formation of nanoporous gold by dealloying. Phys. Rev. Lett. 97, 35504-35506 (2006).
check_url/50678?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Daggumati, P., Kurtulus, O., Chapman, C. A. R., Dimlioglu, D., Seker, E. Microfabrication of Nanoporous Gold Patterns for Cell-material Interaction Studies. J. Vis. Exp. (77), e50678, doi:10.3791/50678 (2013).

View Video