Reproductible paraplégie par l'aorte thoracique occlusion dans un modèle murin de la moelle épinière ischémie-reperfusion

Summary

Le manque de compréhension des mécanismes de la moelle épinière lésion d'ischémie-reperfusion a empêché d'autres additifs pour empêcher la paraplégie suite à des opérations de l'aorte à haut risque. Ainsi, le développement de modèles animaux est impératif. Ce manuscrit démontre reproductible inférieure paralysie des extrémités après occlusion de l'aorte thoracique dans un modèle murin.

Abstract

Fond
Basse-paralysie du membre continue à compliquer les interventions aortiques. Le manque de compréhension de la pathologie sous-jacente a entravé les progrès de diminuer l'apparition de cette blessure. Le modèle actuel démontre reproductible inférieure paralysie des extrémités après occlusion de l'aorte thoracique.

Méthodes
Souris C57BL6 mâles adultes ont été anesthésiés avec de l'isoflurane. Grâce à une incision cervicosternal l'aorte a été exposé. L'aorte et les artères sous-clavière gauche thoracique descendante ont été identifiés sans entrée dans l'espace pleural. Squelettisation de ces artères a été suivie par la fermeture immédiate (Sham) ou occlusion pendant 4 min (ischémie modérée) ou 8 min (ischémie prolongée). La sternotomie et de la peau ont été fermés et la souris ont été transférés au lit de réchauffement pour la récupération. Après la récupération, l'analyse fonctionnelle a été obtenue à des intervalles de 12 h jusqu'à 48 h.

<p class= ""> Résultats jove_content
Les souris qui ont subi une intervention chirurgicale fictive ne présentaient aucun déficit membre postérieur observable. Souris soumises à une ischémie modérée pendant 4 min avaient déficit fonctionnel minimal à 12 h suivie par la progression de la paralysie complète à 48 h. Souris soumises à une ischémie prolongée avaient une paralysie immédiate sans mouvement des membres postérieurs observable à tout moment dans la période post-opératoire. Il n'y avait pas observé peropératoire ou de la mortalité post-opératoire.

Conclusion
Reproductible inférieure paralysie des extrémités immédiat ou différé peut être obtenue dans un modèle murin. En outre, en utilisant une sternotomie médiane et une dissection minutieuse, les taux de survie élevé et la reproductibilité peut être atteint.

Introduction

Basse-paralysie du membre continue à compliquer les interventions thoraco-abdominale. La blessure, connu sous le nom de la moelle épinière d'ischémie-reperfusion (CPRI), entraînant la paralysie chez jusqu'à 20% des patients à haut risque ^1. Adjuvants chirurgicaux comme le pontage cardiaque gauche, liquide s'écoule cerbrospinal lombaires, arrêt circulatoire en hypothermie et la réimplantation de l'artère intercostale ont réduit l'incidence de cette complication ^2, mais beaucoup trop de patients continuent de souffrir.

Cliniquement, l'ischémie de la moelle épinière et de reperfusion est considéré comme immédiat ou différé paralysie suite à l'intervention ^3. Cependant, notre compréhension de cette blessure a été étouffé par le manque de détail mécaniste. En conséquence, peu d'options sont disponibles pour atténuer la blessure une fois qu'elle s'est produite.

Nous avons donc fait appel un petit animal, souris, modèle de ischémie de la moelle épinière, et reperfusion àmieux caractériser sa pathogénie. La majorité des études à ce jour ont utilisé des modèles animaux plus grands pour caractériser ce préjudice, à savoir ⁴ rat, lapin ^5, et ⁶ modèles de porc. Cependant, ceux-ci sont limités par leur coût, de la complexité, de la reproductibilité de variable, et, plus important encore, le manque de techniques disponibles pour la manipulation génétique. La plus fiable de ces modèles animaux implique publié Croix-rénal serrage de l'aorte abdominale chez les lapins. Cependant, antérieures humaine neurones spinaux tirent le plus souvent leur approvisionnement vasculaire de plusieurs branches proximales ^7. Variable anatomie vasculaire de la moelle épinière dans ces modèles ajoute à la difficulté à faire la transition de leurs résultats dans l'utilisation clinique.

Ce manuscrit présente un modèle de paraplégie immédiate ou différée après occlusion de l'aorte thoracique qui est cliniquement pertinente et facile à utiliser. Exposition de la crosse aortique par mini-sternotoma est moins invasive et peut provoquer des résultats très reproductibles à une morbidité et une mortalité minimale. Bien que ce modèle dans pas sans défis et les nuances techniques, ceux-ci peuvent être surmontés avec dissection minutieuse et la manipulation des tissus pour produire un modèle de paralysie des membres postérieurs qui peuvent être facilement mis en œuvre.

Protocol

Une. Préparation préopératoire et anesthésie Veillez à respecter une technique stérile tout au long de la procédure. Disposez tous les instruments. Allumer le lit de régulation de température avant l'induction anesthésique afin qu'elle puisse se réchauffer à la température appropriée (36,5 ° C). Puissance sur le moniteur de perfusion par laser Doppler de sorte qu'il puisse démarrer lors de l'induction. Placer la souris dans la chambre d'induction. <l…

Representative Results

Souris a subi une opération fictive (n = 3) ou une occlusion aortique pour 4 (n = 3) à 8 min (n = 3). Souris après l'opération ont été classés par le Score Basso souris (figure 1). Les souris qui ont subi une chirurgie fictive n'avaient pas de déficits fonctionnels observables à tout moment après l'opération. Souris soumises à une ischémie modérée (4 min) ont près de la fonction normale des membres postérieurs à 12 heures avec le déclin fonctionnel progressif à la paralys…

Discussion

Paraplégie secondaire à une ischémie reperfusion de la moelle épinière est le résultat d'un complexe de pathologies mal comprises ^9. Tandis que ceci est le plus souvent observée après une intervention chirurgicale de l'aorte thoraco-abdominale, une variété d'autres agressions telles que les dissections aortiques, les traumatismes, les phénomènes emboliques, vascularite, hypotension systémique et ¹⁰ peut aboutir à une paraplégie. Pour avoir une meilleure compréhension de …

Materials

VMS Anesthesia Machine	MDS Matrx
Isoflurane	Vet One	13985-528-60	2.0% through nose cone
Induction Chamber	Vet Equip	941444
Heating Bed	Vestavia Scientific
Laser Doppler Monitor	Moor Instruments	VMS-LDF1
5-0 Suture, Polyester	Surgidac	VD-551	Taper Needel
Microdissecting Clips	Biomedical Research Insturments	14-1030, 14-1060
Surgical Instruments	Fine Surgical Instruments		Forceps, needle holder