हम एक साथ 6 माउस पिंजरों है कि घर में आसानी से उपलब्ध सामग्री का उपयोग शराब वाष्प कक्षों के निर्माण का प्रदर्शन. हम आगे मानव गर्भावस्था के सभी 3 trimesters के बराबर भ्रूण शराब जोखिम के एक माउस मॉडल में उनके उपयोग का वर्णन. इस प्रतिमान के गर्भ और प्रसव के बाद दिन 1-12 दौरान पशुओं को उजागर करता है.
विकास के दौरान शराब के संपर्क में सामूहिक रूप से भ्रूण शराब स्पेक्ट्रम विकार (FASDs) के रूप में जाना जाता है कि रूपात्मक और व्यवहार असामान्यताएं की एक नक्षत्र में परिणाम कर सकते हैं. स्पेक्ट्रम की सबसे गंभीर अंत में विकास मंदता, craniofacial dysmorphology, और neurobehavioral घाटे विशेषता द्वारा भ्रूण शराब सिंड्रोम (एफएएस), है. कृन्तकों सहित पशु मॉडल, साथ अध्ययन FASDs के pathophysiology में शामिल कई आणविक और सेलुलर तंत्र elucidated है. गर्भवती कृन्तकों के लिए इथेनॉल प्रशासन गर्भावस्था के पहले और दूसरे trimesters के दौरान मानव जोखिम मॉडल करने के लिए इस्तेमाल किया गया है. मानव में तीसरी तिमाही इथेनॉल खपत नवजात कृन्तकों मॉडलिंग का उपयोग किया गया है. हालांकि, कुछ कृंतक अध्ययन मानव गर्भावस्था, गर्भवती महिलाओं में आम है कि जोखिम के एक पैटर्न के सभी तीन trimesters के बराबर दौरान इथेनॉल जोखिम के प्रभाव की विशेषता है. यहाँ, हम ओ आसानी से वाष्प कक्षों का निर्माण करने के लिए दिखानेप्रत्येक छह मानक माउस पिंजरों को समायोजित कर सकते हैं कि btainable सामग्री. हम सभी तीन trimesters के दौरान, कम से कम हैंडलिंग के साथ, इथेनॉल के लिए जोखिम मॉडल करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि एक भाप कक्ष प्रतिमान का वर्णन. हमारे अध्ययन से गर्भवती बांधों इथेनॉल के लिए महत्वपूर्ण चयापचय सहिष्णुता विकसित दिखाना है कि. हालांकि, नवजात चूहों चयापचय सहिष्णुता और भ्रूण की संख्या, भ्रूण वजन, नाल वजन, पिल्ले / कूड़े की संख्या, मृत पिल्ले / कूड़े की संख्या विकसित नहीं किया, और पिल्ला वजन काफी इथेनॉल जोखिम से प्रभावित नहीं थे. इस प्रतिमान का एक महत्वपूर्ण लाभ आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों के साथ अध्ययन करने के लिए इसके लागू है. साथ ही, यह प्रतिमान जानवरों की हैंडलिंग, भ्रूण शराब अनुसंधान के क्षेत्र में एक प्रमुख उलझाना कम करता है.
गर्भावस्था के दौरान शराब पीने काफी प्रभावित व्यक्तियों और उनके परिवारों के लिए जीवन की गुणवत्ता में कमी है कि कई अंगों और प्रणालियों में लगातार परिवर्तन के कारण भ्रूण को नुकसान पहुँचा सकते हैं. यह महिलाओं की लगभग 10-30% एक द्वि घातुमान पैटर्न 1,2 में 1-8% पीने के साथ, अमेरिका में गर्भावस्था के दौरान पीने का अनुमान है. भ्रूण के विकास के दौरान इथेनॉल जोखिम द्वारा उत्पादित प्रभाव की सीमा सामूहिक रूप से भ्रूण शराब स्पेक्ट्रम विकार (FASDs) के रूप में जाना जाता है. हाल के अनुमान FASDs अमेरिका 3 में 2-5% के रूप में उच्च व्यापकता के साथ एक प्रमुख सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्या है कि संकेत मिलता है. FASDs के और अधिक गंभीर अभिव्यक्ति विकास मंदता, craniofacial असामान्यताएं, और सीखने विकलांग सहित neurobehavioral घाटे, की विशेषता है, जो भ्रूण शराब सिंड्रोम (एफएएस), है. एफएएस की व्यापकता अमेरिका 3 में 0.2-0.7% होने का अनुमान लगाया गया है. FASDs के लिए वर्तमान में उपलब्ध उपचार केवल आंशिक रूप से प्रभावी हैंऔर अधिक प्रभावी उपचार के विकास से जुड़ी समस्याओं के इस जटिल स्पेक्ट्रम के सेलुलर और आणविक आधार के गरीब समझ के द्वारा सीमित है.
राष्ट्रीय जन्म दोष निवारण अध्ययन (NBDPS) से डेटा गर्भावस्था के गर्भ 2 के बाद के चरणों के दौरान पता चला, संयम से पालन किया गया है इससे पहले कि गर्भवती महिलाओं को सबसे अधिक, 1 सेंट तिमाही के दौरान पीने संकेत मिलता है कि. NBDPS भी हमल के दौरान इथेनॉल खपत का दूसरा सबसे आम पैटर्न गर्भावस्था 2 के सभी trimesters भर पीने शामिल पाया. इस के लिए कारणों भ्रूण इथेनॉल जोखिम (यहां तक कि कम मात्रा में), प्रसव पूर्व देखभाल के लिए सीमित उपयोग, neuropsychiatric विकारों के लिए सकारात्मक इतिहास, और के दुरुपयोग या इथेनॉल 4 पर निर्भरता के हानिकारक प्रभाव के बारे में जागरूकता की कमी शामिल है. दिलचस्प है, NBDPS खपत के तीसरे सबसे आम पैटर्न 1 के दौरान संयम है कि इसमें शामिल की सूचना <sup> सेंट और यह अक्सर जीवोत्पत्ति के ज्यादातर पूरा हो चुका है, क्योंकि पीने के लिए सुरक्षित माना जाता है कि जब 3 तिमाही के दौरान खपत द्वारा पीछा 2 एन डी trimesters. इस neuronal सर्किट गहरा शोधन 2 गुजरना जब एक अवधि है क्योंकि हालांकि, 3 तिमाही इथेनॉल प्रेरित तंत्रिका तंत्र को नुकसान के लिए उच्च संवेदनशीलता की अवधि है. NBDPS भी 1 और 3 तिमाही के दौरान 2 संयम द्वारा पीछा 2 एन डी trimesters भर खपत सहित गर्भावस्था के दौरान होने वाले शराब की खपत के अन्य, कम अक्सर पैटर्न की पहचान की.
गर्भवती महिलाओं में मनाया इथेनॉल खपत का अलग पैटर्न मॉडल के प्रयास में, विकास इथेनॉल जोखिम मानदंड की एक संख्या सबसे आम 5,6 जा रहा चूहों और चूहों के साथ, विविध जानवरों की प्रजातियों का उपयोग कर स्थापित किया गया है. इन जानवरों में गर्भावस्था की अवधि आम तौर पर लासलगभग 3 सप्ताह, 1 अनुसूचित जनजाति और मानव गर्भावस्था के 2 एन डी trimesters से मेल खाती है जो टीएस. कई कृंतक अध्ययनों से इस अवधि के दौरान विभिन्न खुराक और इथेनॉल जोखिम के पैटर्न के प्रभाव का आकलन किया है. अक्सर गर्भवती चूहों को इथेनॉल प्रशासन के लिए इस्तेमाल किया तरीकों और चूहों के उदाहरण तरल आहार 7,8, पीने के पानी 9,10 के लिए इथेनॉल के अलावा, साकारीन मीठा समाधान की स्वैच्छिक पीने 11, गैस्ट्रिक नलिका – पोषण 12, भाप साँस लेना 13 के माध्यम से प्रशासन में शामिल , और चमड़े के नीचे या intraperitoneal इंजेक्शन 14. इन अध्ययनों के परिणामों गर्भावस्था के प्रारंभिक दौर के दौरान (6,15 में समीक्षा) मस्तिष्क में neuronal सर्किट को नुकसान करने के लिए पर्याप्त है कि जोखिम है, प्रदर्शन FASDs साथ मनुष्य में मनाया घाटे के कई recapitulated है.
कृन्तकों के साथ प्रयोग भी दिखा दिया है कि 3 करने के लिए बराबर के दौरान जोखिम </sup> लगभग चूहों और चूहों में प्रसव के बाद जीवन के पहले 1-2 सप्ताह से मेल खाती है जो मानव गर्भावस्था,, की तिमाही में काफी मस्तिष्क के विकास क्षीण कर सकते हैं. इस अवधि के दौरान जोखिम नवजात चूहों या चूहों के लिए इथेनॉल प्रशासन से मॉडलिंग कर दिया गया है. इथेनॉल एक कृत्रिम रूप से पाला पशुओं 16-18, intragastric इंटुबैषेण 19, चमड़े के नीचे इंजेक्शन 20 में gastrostomy के माध्यम से खिला सहित तरीकों की विविधता,, और भाप साँस लेना 21,22 का उपयोग कर इन जानवरों को दिलाई गई है. इन अध्ययनों से खांसने मस्तिष्क विकास तेजी इथेनॉल 6 की विकासात्मक प्रभाव के लिए उच्च जोखिम की अवधि है कि प्रदर्शन किया है.
जैसा कि ऊपर कहा, गर्भावस्था के सभी trimesters के दौरान पीने महिलाओं 2 में इथेनॉल खपत का एक आम तरीका है. हालांकि, अपेक्षाकृत कुछ अध्ययनों पशु मॉडल का उपयोग कर जोखिम की इस पद्धति के प्रभाव का आकलन किया है. इन अध्ययनों में से कुछ लाभ ले लिया है3 तिमाही के समकक्ष चूहों और चूहों के मामले में के रूप में गर्भ के बजाय नवजात की अवधि में होता है, जहां बड़े जानवरों के ए. इन पशु मॉडल गैर मानव प्राइमेट 23,24 और भेड़ 25-27 शामिल हैं. हालांकि, इन पशु मॉडल व्यापक रूप से, क्योंकि उच्च लागत और विशेष देखभाल की सुविधा के लिए की जरूरत है, इस भाग में, FASDs अनुसंधान में इस्तेमाल नहीं किया गया है. कृंतक अधिक सामान्यतः भ्रूण के विकास के लिए 5 पर सभी तिमाही इथेनॉल जोखिम के प्रभाव को चिह्नित करने के लिए इस्तेमाल किया गया है. गिनी सूअरों मनुष्य 28,29 की है कि मस्तिष्क परिपक्वता में उनकी व्यापक जन्म के पूर्व का विकास और समानता को देखते हुए इस संबंध में विशेष रूप से लाभप्रद हो गया है. गिनी सूअरों के साथ, यह मानव 3 तिमाही के बराबर विकास की अवधि भी शामिल है कि गर्भ में इथेनॉल जोखिम के प्रभाव को चिह्नित करना संभव हो गया है. इन पशुओं के अपेक्षाकृत उच्च लागत, साथ ही उनकी गर्भावस्था की अपेक्षाकृत लंबी अवधि(~ 67 दिन), FASDs शोध पर काम कर रहे कुछ प्रयोगशालाओं के लिए उनके उपयोग सीमित है.
क्योंकि जैव चिकित्सा अनुसंधान के क्षेत्र में उनकी लागत प्रभावशीलता और व्यापक उपयोग के कारण, जांचकर्ताओं गर्भावस्था के सभी trimesters के दौरान इथेनॉल के लिए जोखिम मॉडल करने के लिए चूहों का इस्तेमाल किया है. प्रारंभिक अध्ययन में चूहों 0.08 ग्राम / डीएल के बांधों में शिखर रक्त इथेनॉल का स्तर (सी) में जिसके परिणामस्वरूप gastrostomy कृत्रिम रूप से पाला को नवजात शिशुओं (प्रसव के बाद दिन (पी) 1-10) के माध्यम से इथेनॉल के प्रशासन द्वारा पीछा तरल आहार के माध्यम से गर्भावस्था के दौरान अवगत कराया गया और पिल्ले 0.16 ग्राम / डीएल में. इस प्रतिमान ऑप्टिक तंत्रिका myelination में लंबे समय से स्थायी परिवर्तन के कारण होता है और सेरिबैलम 30-32 में Bergmann glia फाइबर की संख्या कम हो. 3 तिमाही के बराबर (पी 4-9) 33,34 के हिस्से के दौरान नवजात प्रशासन द्वारा पीछा intragastric इंटुबैषेण के माध्यम से एक द्वि घातुमान की तरह ढंग से गर्भवती चूहे बांधों को इथेनॉल प्रशासित कृत्रिम पालन शर्तों का उपयोग इसी तरह, Maier और सहयोगियों. पीeak मातृ और पिल्ला BECs गर्भावधि दिन 20 और P6 दोनों में 0.3 ग्राम / डीएल थे. यह सब तिमाही जोखिम प्रतिमान हमल 33 के चयनित अवधि के दौरान उजागर पिल्ले में मनाया है कि तुलना में काफी अधिक था कि विकास मंदता में हुई. इसके अलावा, सभी trimesters के बराबर दौरान इथेनॉल के संपर्क में चूहों अनुमस्तिष्क Purkinje और अन्य अवधियों 34 के दौरान उजागर पशुओं में मनाया तुलना में अधिक था कि ग्रेन्युल कोशिकाओं की संख्या में कमी का प्रदर्शन किया. हिप्पोकैम्पस सेल संख्या में कटौती भी इस प्रतिमान के साथ सूचना दी, लेकिन इन प्रभावों को 35 तिमाही के समकक्ष 3 के दौरान मुख्य रूप से जोखिम का एक परिणाम होना दिखाई देते थे. गर्भवती चूहों और नवजात चूहों दोनों को intragastric नलिका – पोषण के माध्यम से इथेनॉल प्रशासन शामिल है एक विधि को भी सभी तिमाही के जोखिम 36 मॉडल का उपयोग किया गया है. बांधों में 0.13 ग्राम / डीएल (गर्भावधि दिन 17) और P6 पिल्ले में 0.24 ग्राम / डीएल, प्रेरित लंदन के BECs सामने आए जो इस विधि,monoamine neurotransmitter हिप्पोकैम्पस और हाइपोथेलेमस में स्तरों, और हिप्पोकैम्पस 37,38 में प्रोटीन 2 बंधन डीएनए methyltransferases और मिथाइल CPG की वृद्धि की अभिव्यक्ति में जी स्थायी परिवर्तन. इसी तरह के एक जोखिम प्रतिमान (बांधों और पिल्ले में 0.2 ग्राम / डीएल में बीईसी = 0.14-0.2 ग्राम / डीएल) का उपयोग करना, गिल-Mohapel एट अल. 39 वयस्क चूहों के दांतेदार गाइरस में नई अपरिपक्व न्यूरॉन्स की संख्या में वृद्धि का पता चला है कि वयस्क जन्म न्यूरॉन्स की परिपक्वता में इथेनॉल प्रेरित neuronal नुकसान या एक परिवर्तन के लिए एक प्रतिपूरक तंत्र का प्रतिनिधित्व कर सकते हैं. जांचकर्ताओं ने यह भी तरल आहार के माध्यम से बांधों को उजागर या गर्भावस्था और स्तनपान 9,40 दोनों के दौरान पीने के पानी की सभी तिमाही इथेनॉल जोखिम मॉडल करने का प्रयास किया है. यह आम तौर पर कम पिल्ला BECs (; 41,42 जैसे, .002-.05 जी / डीएल) में यह परिणाम हालांकि, क्योंकि उनकी मां के दूध के माध्यम से पिल्ले को प्रकाश में लाने की उपयोगिता सीमित है.
चूहे भी extens इस्तेमाल किया गया हैविकास इथेनॉल जोखिम के प्रभावों को चिह्नित करने के लिए ively. इस पशु मॉडल कई आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस उपभेदों 5 उपलब्ध हैं कि अतिरिक्त लाभ के साथ, चूहे पशु मॉडल के लिए ऊपर वर्णित ताकत के कई शेयरों. चूहे सफलतापूर्वक 1, 2 या गर्भावस्था 43,44 के 3 trimesters के दौरान इथेनॉल के प्रभाव को चिह्नित करने के लिए इस्तेमाल किया गया है. यह तकनीकी रूप से अधिक कठिन मानव गर्भावस्था के सभी trimesters के बराबर दौरान चूहों को बेनकाब करने के लिए है क्योंकि हालांकि, इन जानवरों पर सभी तिमाही के जोखिम के प्रभाव अच्छी तरह से होती नहीं किया गया है. उदाहरण के लिए, चूहों में सफलतापूर्वक इस्तेमाल किया गया है जो कृत्रिम पालन और गैस्ट्रिक नलिका – पोषण, चूहों 45 में अधिक विशिष्ट प्रक्रियाओं की आवश्यकता है. हमारे ज्ञान का सबसे अच्छा करने के लिए तिथि करने के लिए केवल एक अध्ययन चूहों का उपयोग सभी तिमाही इथेनॉल जोखिम के प्रभाव का अध्ययन करने का प्रयास किया गया है; इन जानवरों को पानी duri पीने में इथेनॉल समाधान से अवगत कराया गयाएनजी गर्भावस्था और स्तनपान के 46. मातृ BECs 0.07 ग्राम / डीएल और पिल्ला BECs निर्धारित है, लेकिन बांधों में उन का एक अंश होने की उम्मीद नहीं कर रहे थे थे.
यहाँ, हम शराब वाष्प साँस लेना कक्षों के माध्यम से गर्भवती बांधों और नवजात शिशुओं दोनों को दिलाई है जहाँ चूहों के सभी तिमाही इथेनॉल प्रदर्शन के लिए एक नए मॉडल का वर्णन. भाप कक्षों पिछले एक डिजाइन 47 के आधार पर बनाया गया था. हम साँस लेना कक्षों का निर्माण और जोखिम प्रक्रियाओं को पूरा करने के लिए पर विस्तृत निर्देश प्रदान करते हैं. हम भी प्राप्त किया जा सकता है कि BECs और पिल्ला अस्तित्व और विकास पर जोखिम के प्रभाव के बारे में जानकारी प्रदान करते हैं.
यहाँ, हम विस्तार से भाप साँस लेना कक्षों के निर्माण के लिए विधियों का वर्णन. कक्षों के निर्माण के लिए आवश्यक सामग्री और उपकरण वाणिज्यिक आपूर्तिकर्ताओं में से एक नंबर से आसानी से उपलब्ध हैं और कक्षों के…
The authors have nothing to disclose.
R01-AA015614, R01-AA014973, T32-AA014127 और K12-GM088021 स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान द्वारा अनुदान का समर्थन किया. लेखकों तकनीकी सहायता और डीआरएस के लिए सामन्था एल Blomquist धन्यवाद. गंभीर रूप से पांडुलिपि और वीडियो के मूल्यांकन के लिए केविन काल्डवेल और डोनाल्ड तीतर.
Item | Company | Cat # | Qty | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Polycarbonate 1/4" clear 48" x 24" | McMaster-Carr | 8574K23 | 10 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Foam Rubber bulb seal 3/8"w x 7/32"h | McMaster-Carr | 93085K67 | 10ft | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Weld-on #16 | McMaster-Carr | 7515A11 | 3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Piano hinge 12" long | McMaster-Carr | 1658A11 | 2 x 1ft | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Hold-down toggle clamps standard | McMaster-Carr | 5126A26 | 8 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
PEX tubing 1/2" | McMaster-Carr | 51275K88 | 10ft | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Barbed Tee tube fitting (Black) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5463K608 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Barbed plug fitting (Black) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5462K79 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Barbed Elbow tube fitting (Black) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5463K596 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3/8" Through-Wall Adapters, Tube to Threaded Pipe | McMaster-Carr | 5463K851 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Phillips Machine screw 4-40 | McMaster-Carr | 91772A112 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Machine screw hex nut 4-40 | McMaster-Carr | 90480A005 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Panel-mount flowmeter 2-20 | McMaster-Carr | 41945K76 | 3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
FLASK, FILTER 1000ML 6/PACK | VWR | 89001-800 | 2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Precision Seal Septa | VWR | 89084-490 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
VWR Black Rubber Stopper #8 1-hole | VWR | 59581-367 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50' | VWR | 89068-556 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50' | VWR | 89068-502 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Aerator Stone P2120 | VWR | 32573-007 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3/8" T-connectors Pk of 20 | VWR | 46600-060 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
VWR Disconnectors tapered Pk of 10 | VWR | 46600-110 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3/8 Hose Barb valved in-line coupling | Colder Products Company | HFCD17612 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Air pump medium capacity | LMI Manufacturers | DB60L | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Nexelate Wire Shelving 36"W X 24"D X 63"H | Global industrial | T9A990135 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Stem Casters Set of (4) 5" Polyurethane Wheel | Global industrial | T9A500591 | 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Breathalyzer Alco-Sensor III | Intoximeters, Inc. | ASIII | 1
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